韓忠學(xué)，劉 靜，樊 霞

兒童梅毒4種檢測方法的靈敏度及特異性比較

韓忠學(xué)，劉 靜，樊 霞

目的 比較快速血漿反應(yīng)素試驗(rapid plasma reagin，RPR)、膠體金試驗(colloidal gold test for syphilis,SYP)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA)、凝集法(treponema pallidum particle assay，TPPA)診斷兒童梅毒的靈敏度及特異性。方法 選擇本院120例確診為梅毒的患兒及60例非梅毒患兒進(jìn)行RPR、SYP、ELISA、TPPA實驗，統(tǒng)計4種方法檢測梅毒的陽性率、靈敏度、特異性及陽性預(yù)測值。結(jié)果 ELISA陽性率為94.2%、陽性預(yù)測值為95.8%、特異性為95.0%，RPR陽性率為43.3%，SYP靈敏度為66.7%。TPPA靈敏度、特異性及陽性預(yù)測率均不高。結(jié)論 ELISA的陽性預(yù)測值及特異性較高，適合住院、門診兒童的梅毒篩查，SYP可作為陽性標(biāo)本的確認(rèn)試驗，必要時可采用聯(lián)合試驗進(jìn)行檢測。建議對兒童梅毒檢測，不采用TPPA。

快速血漿反應(yīng)素試驗；膠體金試驗；酶聯(lián)免疫吸附試驗；凝集法；兒童梅毒

梅毒是由梅毒螺旋體引起的慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病，臨床表現(xiàn)較為復(fù)雜[1]。由于兒童梅毒為宮內(nèi)感染所致[2]，具有一定的隱蔽性，在兒科不易被發(fā)現(xiàn)，易延誤治療，因而嚴(yán)重影響兒童身心健康與發(fā)育。隨著我國梅毒檢測技術(shù)的進(jìn)步，大大提高了梅毒抗體的陽性檢出率，檢測方法主要分為病原體檢測、血清學(xué)篩選試驗及血清學(xué)確證試驗。臨床實驗室多采用血清學(xué)篩選試驗。為更好地尋找合理的兒童梅毒檢測手段，本研究對我院2012-06至2013-10收集的120例確診梅毒患兒采取的4種檢測方法的靈敏度及特異性進(jìn)行比較。

1 對象與方法

1.1 對象 120例中，男58例，女62例，分新生兒組(≤1歲)60例，幼兒組(>1，≤3歲)60例；對照組為非梅毒兒童(≤3歲)60例，其中，男30例，女30例。三組年齡、性別差異無統(tǒng)計學(xué)意義。梅毒患兒的納入標(biāo)準(zhǔn)為：(1)采用不加熱血清反應(yīng)素玻片試驗，顯示梅毒血清學(xué)試驗陽性；(2)年齡≤3歲；(3)患兒家長均知情同意。

1.2 試劑 RPR、SYP、ELISA、TPPA試驗所需試劑均購自日本富士株式會社，并嚴(yán)格參照說明書操作使用。

1.3 儀器 全自動酶標(biāo)儀(美國，Stat Fax-2100)，全自動洗板機(jī)(深圳，RT-3100)，微量振蕩器(姜堰市，XK96-3型)。

1.4 方法 所有血液標(biāo)本嚴(yán)格按照各項操作說明分別進(jìn)行RPR、SYP、ELISA、TPPA檢測。統(tǒng)計各法的梅毒陽性率、靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值。計算公式：靈敏度=a/(a+b)；特異度=d/(c+d)；陽性預(yù)測值度=(a+b)/(a+b+c)(a為呈陽性結(jié)果的梅毒患者數(shù)，b為呈陰性結(jié)果的梅毒患者數(shù)，c為呈陽性結(jié)果的非梅毒人群數(shù)，d為呈陰性結(jié)果的非梅毒人群數(shù))。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件，率的比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 檢測結(jié)果 用4種檢測方法對梅毒兒童血液進(jìn)行梅毒檢測，結(jié)果顯示，ELISA陽性率(94.2%)最高，RPR陽性率最低(43.3%,表1)。

表1 4種試驗方法在120例梅毒患兒中的陽性檢測結(jié)果 (n=60；n;%)

2.2 靈敏度、特異性和陽性預(yù)測值比較 結(jié)果顯示， ELISA陽性預(yù)測值(95.8%)及特異性(95.0%)均較高，SYP靈敏度較高(66.7%)，TPPA靈敏度、特異性及陽性預(yù)測值均不高(表2)。

表2 4種方法的靈敏度、特異性和陽性預(yù)測值比較 (%)

3 討 論

目前,梅毒抗體檢測是梅毒診斷的主要方法。我國衛(wèi)計委將針對非特異性抗類脂質(zhì)抗體及特異性抗梅毒螺旋體抗體的檢測方法分別列為常規(guī)試驗及確認(rèn)試驗方法[3]。

ELISA法是一種依據(jù)雙抗原夾心法的血清學(xué)檢測方法，具體是將基因重組表達(dá)的梅毒螺旋體抗原包被在微孔板上來合成抗原，極大地提高了試驗的敏感性和特異性[3,4]。由于新生兒在某種程度上攜帶母體的抗體，即便是未感染的新生兒也可以出現(xiàn)陽性結(jié)果，采用ELISA檢測方法所得到的陽性率會較高[5]。本研究顯示,4種方法差異有統(tǒng)計學(xué)意義，其中ELISA的陽性率(94.2%)最高、陽性預(yù)測值(95.8%)及特異性(95.0%)均較高，與上述報道結(jié)果相一致。

有報道，單獨根據(jù)RPR來進(jìn)行梅毒陽性診斷不適宜，因為感染梅毒患者的體內(nèi)會產(chǎn)生兩類抗體：一類是直接針對梅毒螺旋體的抗體，另一類則是針對類脂質(zhì)的抗體(無特異性)[6]。RPR為檢測類脂質(zhì)抗體的試驗，凡能導(dǎo)致產(chǎn)生類脂質(zhì)抗體的疾病，如上呼吸道感染、活動性肺結(jié)核、風(fēng)濕性心臟病、亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等，RPR可呈陽性，因此利用RPR時應(yīng)對結(jié)果加以綜合分析[7]。本研究顯示，RPR在新生兒組及幼兒組中的陽性率均較低，與相關(guān)研究結(jié)果一致[8]。

TPPA采用雙抗體夾心法，具有特異、靈敏、用量小、重復(fù)性好的優(yōu)點，較多用在潛伏期及難以診斷梅毒的檢測，是目前國內(nèi)推薦的梅毒確證試驗方法[8]，但操作復(fù)雜，大批量檢測較為不利。本研究顯示，TPPA靈敏度、特異性及陽性預(yù)測率均不高，提示現(xiàn)對兒童梅毒的檢測不建議應(yīng)用該方法。

膠體金試驗是新近發(fā)展起來的快速體外診斷技術(shù)，其利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)純化重組基因的梅毒抗原，以膠體金作為指示標(biāo)記，制備高度純化的單克隆梅毒螺旋體的基因工程抗原[9,10]。此法操作簡捷、用血量少、特異、靈敏、結(jié)果容易觀察和保存。本研究顯示，SYP的靈敏度較高(66.7%)，可作為其他方法篩檢后的陽性標(biāo)本的確認(rèn)。

綜上所述，診斷梅毒的4種試驗方法特點各異，應(yīng)結(jié)合臨床診斷進(jìn)行綜合分析，必要時可聯(lián)合檢測，并動態(tài)監(jiān)測抗體變化，更好地為臨床小兒梅毒診斷提供正確的結(jié)果。

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[5] 陳小琳.我國梅毒的流行現(xiàn)況與特征[J].暨南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版)，1999，20(2)：29-46.

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(2014-10-13收稿 2014-11-18修回)

(責(zé)任編輯 岳建華)

Sensitivity and specificity of different testing methods for diagnosing syphilis in children

HAN Zhongxue，LIU Jing，and FAN Xia.

Department of Clinical Laboratory，Liaoning Provincial Corps Hospital, Chinese People’s Armed Police Forces, Shenyang 110034, China

Objective To study the sensitivity and specificity of rapid plasma reagin test (RPR), colloidal gold test for syphilis(SYP), and enzyme-linked immune sorbent assay (ELISA), treponema pallidum particle assay (TPPA) test in diagnosis of syphilis in children. Methods 120 children with suspected syphilis were recruited in this hospital, and were divided into newborn group (60 cases) and infant group (60 cases) by age and other 60 children without syphilis were recruited.The RPR,SYP,ELISA, TPPA were conducted. By the statistical methods, syphilis positive rate, sensitivity, specificity, positive predictive value were counted. Results The positive rate of enzyme-linked immune method was 94.2%.The positive predictive value of enzyme-linked immune sovbent assay was 95.8% and specificity was 95.0%.The positive rate of rapid plasma reagin test was 43.3%. The sensitivity of colloidal gold method was 66.7%. The sensitivity, specificity, and positive predictive rate of TPPA were not high.Conclusions The positive predictive value and specificity of ELISA is high, and it is suitable for the diagnosis of syphilis in children.Colloidal gold method can be used for other screening positive specimens after confirmation and its joint testing can be used for testing if necessary. TPPA is not recommended for use in children for syphilis test.

rapid plasma reagin test; colloidal gold test for syphilis; enzyme-linked immune sorbent assay, syphilis antibody detection; treponema pallidum particle assay; children syphilis

韓忠學(xué)，本科學(xué)歷，副主任技師，E-mail：hanzhx7899@163.com

100034沈陽，武警遼寧總隊醫(yī)院檢驗科

R392.11