王雪麗 蔡麗萍（華北制藥集團(tuán)愛諾有限公司， 河北 石家莊 050000）

微生物檢驗(yàn)技術(shù)研究的進(jìn)展

王雪麗 蔡麗萍（華北制藥集團(tuán)愛諾有限公司， 河北 石家莊 050000）

隨著我國(guó)科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，微生物檢驗(yàn)技術(shù)也有了不斷地提升，已經(jīng)由過去單一的檢驗(yàn)技術(shù)手段轉(zhuǎn)化為多種檢驗(yàn)技術(shù)措施并存的局面，尤其是信息技術(shù)的應(yīng)用大大提高了微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量，為制藥企業(yè)的生產(chǎn)提供了堅(jiān)強(qiáng)的保障。本文主要通過分析微生物檢驗(yàn)技術(shù)存在的重要性，闡述目前我國(guó)微生物檢驗(yàn)技術(shù)的現(xiàn)狀以及未來發(fā)展趨勢(shì)。

微生物；檢驗(yàn)技術(shù)；方法剖析

微生物檢驗(yàn)起源于20世紀(jì)中葉，主要是因?yàn)槊绹?guó)醫(yī)院發(fā)生的因藥品細(xì)菌污染而導(dǎo)致的醫(yī)療事故，由此可見加強(qiáng)微生物檢驗(yàn)對(duì)保證人們的生命健康具有重要的意義。具體而言微生物檢驗(yàn)技術(shù)存在的重要性主要體現(xiàn)在：一是微生物檢驗(yàn)是藥品質(zhì)量保障的基礎(chǔ)。通過微生物檢驗(yàn)可以及時(shí)對(duì)藥品的質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)，避免受到細(xì)菌感染的藥品流入到市場(chǎng)中。比如一些藥品會(huì)因?yàn)殡s菌的感染而導(dǎo)致藥物本身的酸堿性發(fā)生變化，以致失去效果，因此通過微生物檢驗(yàn)可以避免上述問題的出現(xiàn)；二是通過微生物檢驗(yàn)可以規(guī)范制藥企業(yè)的生產(chǎn)行為。通過制定嚴(yán)格的微生物檢驗(yàn)規(guī)范制度，可以約束制藥企業(yè)的生產(chǎn)行為，及時(shí)將檢驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的問題進(jìn)行分析與總結(jié)，并且及時(shí)調(diào)整制藥過程中所存在的問題；三是微生物檢驗(yàn)有助于促進(jìn)我國(guó)制藥行業(yè)的整體發(fā)展。通過不斷加強(qiáng)微生物檢驗(yàn)技術(shù)，能夠不斷地提高制藥企業(yè)的生產(chǎn)質(zhì)量和效率，進(jìn)而提升我國(guó)制藥行業(yè)的發(fā)展水平。

1　微生物檢驗(yàn)技術(shù)的研究現(xiàn)狀

（1）電阻抗法 電阻抗法是微生物檢驗(yàn)中最常見的一種檢驗(yàn)方法。該方法的檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性比較高，檢驗(yàn)過程便于操作，因?yàn)槠鋸V泛應(yīng)用于對(duì)細(xì)菌總數(shù)、類型的檢驗(yàn)。電阻抗法的檢驗(yàn)原理就是利用細(xì)菌的代謝改變培養(yǎng)基，一般情況下每種細(xì)菌在相同情況下的特點(diǎn)是不同的，這樣通過阻抗的變化可以判斷細(xì)菌的情況進(jìn)而判斷出藥品是否被污染。電阻抗法的檢驗(yàn)過程是：首先選取具有代表性的檢驗(yàn)樣品，然后將細(xì)菌置于培養(yǎng)基中，并且設(shè)置符合細(xì)菌生長(zhǎng)的環(huán)境，使其能夠進(jìn)行繁殖，然后由不帶電的大小分子化合物代謝為帶有電負(fù)荷的小分子化合物，這樣一來培養(yǎng)基的導(dǎo)電性能就會(huì)得到增加，而且培養(yǎng)基的電阻會(huì)隨著電阻抗的變化情況進(jìn)行相關(guān)數(shù)據(jù)對(duì)照，以此通過標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌阻抗圖譜進(jìn)行對(duì)比，以此來判斷細(xì)菌的類型。

（2）微量快速生化法 該技術(shù)的發(fā)展歷程比較長(zhǎng)，創(chuàng)始于上世紀(jì)40年代后期，經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間的發(fā)展，微量快速生化法已經(jīng)成為當(dāng)前藥品檢驗(yàn)的主要方法之一，其工作原理：借助于微生物鑒定劑盒，將微生物鑒定用試劑盒內(nèi)置于不同的培養(yǎng)基微管中，這樣在檢驗(yàn)微生物時(shí)，直接將處理過的微生物滴液滴入到微管中，這樣這些滴入的微生物就會(huì)在培養(yǎng)基中發(fā)生酶促反應(yīng)，并且這種反應(yīng)隨著時(shí)間的變化而發(fā)生顏色的變化，這樣檢驗(yàn)人員可以根據(jù)培養(yǎng)基顏色的變化而分析微生物的數(shù)據(jù)。

（3）分子生物學(xué)技術(shù) 分子生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)主要是隨著生命科學(xué)學(xué)科的發(fā)展而逐步形成的一種新技術(shù)，分子生物學(xué)技術(shù)是一種比較前端的檢驗(yàn)技術(shù)，通過分子生物檢驗(yàn)而獲知的分析結(jié)果非常準(zhǔn)確、敏感度也非常高，因此其成為當(dāng)前檢驗(yàn)技術(shù)發(fā)展的最新代表，該技術(shù)對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備以及操作要求比較高，需要制藥企業(yè)配備專門的實(shí)驗(yàn)設(shè)備器材。分子生物學(xué)技術(shù)主要包括：核酸探針技術(shù)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。核算探針技術(shù)就是利用特定的方法測(cè)定標(biāo)記物，但是由于核酸探針的制備比較復(fù)雜，其在實(shí)際中的應(yīng)用受到影響；聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)就是通過加熱使雙鏈DNA裂解成兩條單鏈，最終成為引物和模板，一般來說退火溫度越高，該微生物的擴(kuò)增特異性就越好。

（4）儀器分析監(jiān)測(cè)法 儀器分析監(jiān)測(cè)是微生物檢驗(yàn)中最常用的一種方法，檢驗(yàn)人員通過應(yīng)用儀器設(shè)備對(duì)微生物進(jìn)行檢驗(yàn)。目前使用廣泛的檢驗(yàn)設(shè)備主要集中在氣相色譜法、mini—VIDAS法以及Vietk—AMS法。其中最常用的就是氣相色譜分析法。通過氣相色譜分析法可以檢驗(yàn)多組分樣品，比如屬于微生物比較多的藥品，就可以采取氣相色譜分析法。氣相色譜分析法工作的原理是：先將微生物進(jìn)行分離然后在進(jìn)行檢測(cè)。

2　藥品微生物檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)

雖然近些年隨著微生物檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展，我國(guó)微生物檢驗(yàn)工作取得了不錯(cuò)的成績(jī)，但是在具體的藥品微生物檢驗(yàn)過程中仍然存在不少問題：檢驗(yàn)人員的專業(yè)素質(zhì)不高、對(duì)藥品檢驗(yàn)的認(rèn)識(shí)不夠以及檢驗(yàn)設(shè)備與儀器落后等?？傮w來看，我國(guó)計(jì)算機(jī)技術(shù)在藥品微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用，使得我國(guó)微生物檢驗(yàn)技術(shù)呈現(xiàn)高度自動(dòng)化和簡(jiǎn)潔化方向發(fā)展，尤其是分子生物學(xué)技術(shù)使得對(duì)原菌診斷實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化設(shè)備儀器。因此我們概括我國(guó)微生物檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)主要具有以下特點(diǎn)：一是微生物檢驗(yàn)的工作效率會(huì)更高，微生物檢驗(yàn)的時(shí)間會(huì)越來越短，在短時(shí)間內(nèi)就可以檢測(cè)出微生物的具體含量；二是微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量會(huì)越來越高，具有高精度和高靈敏度；三是微生物檢驗(yàn)的技術(shù)呈現(xiàn)高度的自動(dòng)化，從樣品的選擇到檢驗(yàn)結(jié)果分析呈現(xiàn)自動(dòng)化處理。

3　結(jié)語

總之，微生物檢驗(yàn)技術(shù)的方法有很多種，并且呈現(xiàn)多樣化、自動(dòng)化的方向發(fā)展，但是基于目前微生物檢驗(yàn)過程中所存在的各種問題，作為藥品檢驗(yàn)人員一定要不斷掌握新的檢驗(yàn)技術(shù)并且應(yīng)用于實(shí)踐中，同時(shí)還要勇于創(chuàng)新，敢于借助最前沿的學(xué)科應(yīng)用于創(chuàng)造出最新的微生物檢驗(yàn)技術(shù)，以此促進(jìn)我國(guó)制藥行業(yè)的整體發(fā)展。

［1］趙秀艷，柳瑩.建議采用不確定度對(duì)藥品檢驗(yàn)進(jìn)行評(píng)定［J］.中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育，2010，（11）.

［2］田志發(fā)，伊松鶴.淺談藥物微生物技術(shù)及發(fā)展趨勢(shì)［J］.生物技術(shù)世界， 2014，（04）.

［3］魏常梅.我國(guó)藥品微生物檢驗(yàn)的發(fā)展與挑戰(zhàn)［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2011，（09）.