劉曉景，祁秀娟，呂映頻，劉海寧，劉建新，湯秀明

(青島大學附屬醫(yī)院生殖科，山東 青島 266003)

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凍融胚胎復蘇后生長情況和移植數(shù)對妊娠率的影響

劉曉景，祁秀娟，呂映頻，劉海寧，劉建新，湯秀明

(青島大學附屬醫(yī)院生殖科，山東 青島 266003)

目的 探討凍融胚胎復蘇后的生長情況和移植胚胎數(shù)對臨床妊娠率的影響。方法 選擇2012年6月—2013年6月行凍融胚胎移植的病人193例，根據(jù)移植胚胎數(shù)和進一步生長胚胎個數(shù)分組，移植2枚胚胎組(A組)分為A0組(無胚胎生長)、A1組(有1枚胚胎生長)、A2組(有2枚胚胎生長)，移植3枚胚胎組(B組)分為B0組(無胚胎生長)、B1組(有1枚胚胎生長)、B2組(有2枚胚胎生長)、B3組(有3枚胚胎生長)，比較兩組間及組內(nèi)胚胎種植率和妊娠率等。結(jié)果 A組胚胎種植率和妊娠率與B組比較差異無顯著性(P>0.05)；兩組組內(nèi)種植率和妊娠率比較，差異有顯著性(χ2=4.34～4.59，P<0.05)。結(jié)論 移植2或3枚胚胎對凍融胚胎移植周期的妊娠結(jié)局并無影響，但隨著生長胚胎個數(shù)的增長，種植率和妊娠率有所增加。因此，可以根據(jù)復蘇后胚胎生長情況選擇胚胎移植，進而提高凍融胚胎移植周期的妊娠率。

胚胎；胚胎移植；妊娠率

自1984年人類第一例凍融胚胎移植(FET)嬰兒出生后[1]，F(xiàn)ET日趨廣泛地應用于臨床，已成為人類輔助生殖技術(shù)(ART)不可或缺的一部分。它一方面凍存新鮮周期剩余的可用胚胎，另一方面將由于各種因素未能行新鮮周期移植的胚胎進行凍存，之后選擇恰當?shù)囊浦矔r間進行FET，可以減少反復控制性超促排卵帶來的經(jīng)濟負擔，減輕病人的痛苦，增加周期的累積妊娠率。本研究對我科收治的193例病人的FET周期進行分析，旨在探討冷凍移植胚數(shù)和胚胎復蘇后生長情況對妊娠結(jié)局的影響?，F(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

2012年6月—2013年6月，在青島大學附屬醫(yī)院生殖科行FET的病人193例，年齡22～38歲。所有胚胎均過夜培養(yǎng)。不孕因素包括輸卵管因素、排卵障礙、男方因素、不明原因性不孕等，排除有子宮結(jié)構(gòu)異常、既往有子宮手術(shù)史以及子宮內(nèi)膜異常的病人。根據(jù)移植胚胎數(shù)目分為A組(移植2枚胚胎)和B組(移植3枚胚胎)兩組，再根據(jù)兩組內(nèi)移植胚胎復蘇后是否生長分為A0組(無胚胎生長)、A1組(有1枚胚胎生長)、A2組(有2枚胚胎生長)和B0組(無胚胎生長)、B1組(有1枚胚胎生長)、B2組(有2枚胚胎生長)、B3組(有3枚胚胎生長)。兩組病人組間及組內(nèi)年齡、不孕類型、不孕年限、胚胎培養(yǎng)時間、移植日內(nèi)膜厚度比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1～3。

表1 A與B組一般情況比較

表2 A組內(nèi)各組間一般情況比較

表3 B組內(nèi)各組間一般情況比較

1.2研究方法

1.2.1冷凍胚胎選擇 選擇受精后第3天細胞數(shù)≥6的胚胎進行冷凍保存。

1.2.2胚胎冷凍與復蘇 采用玻璃化冷凍和快速解凍的方法進行胚胎冷凍與復蘇。

1.2.3子宮內(nèi)膜移植前準備 所有FET周期內(nèi)膜準備方案均為人工周期。于月經(jīng)周期第2～4天起口服戊酸雌二醇)4～8 mg/d，7～8 d后B超監(jiān)測子宮內(nèi)膜厚度,根據(jù)內(nèi)膜厚度調(diào)整戊酸雌二醇用量,當內(nèi)膜的厚度≥0.8 cm時,加用孕激素,4 d后選擇胚胎進行移植。

1.2.4妊娠率和種植率的測定 FET后第35天超聲檢查子宮內(nèi)見孕囊為臨床妊娠,并計算種植率(種植率=孕囊數(shù)/移植凍胚總數(shù)×100%)、妊娠率(妊娠率=妊娠數(shù)/周期總數(shù)×100%)和多胎妊娠率(多胎妊娠率=多胎妊娠數(shù)/妊娠總數(shù)×100%)[2]。

1.3統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0及PPMS 1.5[3]軟件進行統(tǒng)計分析,計數(shù)資料結(jié)果以率表示， 組間及組內(nèi)比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有顯著性。

2 結(jié) 果

2.1移植胚胎個數(shù)對妊娠率的影響

A組胚胎復蘇率、種植率、妊娠率和多胎妊娠率與B組比較，差異均無顯著性(P>0.05)。見表4。

2.2胚胎生長情況對妊娠率的影響

A0、A1和A2組胚胎復蘇率比較差異無顯著性(P>0.05)；A0組和A1組種植率比較差異無顯著性(P>0.05)，妊娠率比較差異有顯著性(χ2=4.34，P<0.05)；A0組和A2組種植率和妊娠率比較差異均有顯著意義(χ2=8.59、6.99，P<0.05)；A1組和A2組種植率和妊娠率比較差異均無顯著意義(P>0.05)。見表5。

B0、B1、B2和B3組胚胎復蘇率比較，差異無顯著性(P>0.05)；B0組和B1組種植率和妊娠率比較，差異均無顯著性(P>0.05)；B0組和B2、B3組種植率和妊娠率比較，差異均有顯著意義(χ2=3.98～13.58，P<0.01)；B1組和B2組種植率和妊娠率比較，差異均無顯著性(P>0.05)；B1組和B3組種植率和妊娠率比較，差異均有顯著性(χ2=8.25、7.77，P<0.01)；B2組和B3組種植率比較，差異有顯著性(χ2=4.59，P<0.05)，妊娠率比較差異無顯著性(P>0.05)。見表6。

表4 A與B組胚胎復蘇率、種植率和妊娠率比較(χ/%)

表5 A組組內(nèi)胚胎復蘇率、種植率和妊娠率比較(χ/%)

表6 B組組內(nèi)胚胎復蘇率、種植率和妊娠率比較(χ/%)

組別n復蘇率種植率妊娠率B0組2194.13.29.5B1組2297.17.618.2B2組3395.213.133.3B3組2098.426.760.0

3 討 論

ART的迅速發(fā)展使其成為治療不孕癥的重要手段之一，F(xiàn)ET是ART的重要組成部分，可以預防控制性超促排卵過程中卵巢過度刺激綜合征的發(fā)生，減輕鮮胚移植病人的精神壓力，降低經(jīng)濟負擔，增加累積妊娠率。因此，如何提高FET周期的妊娠率尤為重要。

影響FET的因素包括病人的年齡、子宮內(nèi)膜容受性、子宮內(nèi)膜與胚胎同步性以及胚胎質(zhì)量等。本研究結(jié)果顯示，移植2枚胚胎與移植3枚胚胎的妊娠結(jié)局無明顯差異。劉軍霞等[4]的研究結(jié)果顯示，移植2枚胚胎與移植3枚胚胎的妊娠率差異無顯著性，但與胚胎質(zhì)量有關。宋韜等[5]的研究顯示，移植胚胎數(shù)量、質(zhì)量與FET周期的妊娠率和多胎妊娠率之間關系密切。JOSHI等[6]研究結(jié)果顯示，在胚胎質(zhì)量相同情況下移植3枚胚胎的妊娠率顯著高于移植2枚胚胎。龔紹瓊[7]研究認為，胚胎的冷凍和復蘇可能會造成部分卵裂球壞死，卵裂球的壞死可直接減少移植時胚胎的細胞數(shù)，同時壞死的卵裂球會釋放有害物質(zhì)間接影響胚胎的發(fā)育潛能，進而影響FET周期的妊娠率。RIENZI等[8]的研究結(jié)果表明，去除壞死的卵裂球，可以提高FET周期的妊娠率。而ALIKANI等[9]的研究結(jié)果顯示，通過顯微操作將鼠胚胎中的部分卵裂球損傷后，囊胚孵出率明顯降低。陸湘等[10]的研究結(jié)果也顯示，凍融胚胎復蘇后部分卵裂球有破損的胚胎，若培養(yǎng)后能繼續(xù)生長，種植率仍較高，提示部分卵裂球破損的胚胎仍有種植潛能。本研究在排除年齡、子宮內(nèi)膜以及胚胎質(zhì)量等因素的情況下，觀察了胚胎復蘇后胚胎生長情況對臨床妊娠率的影響，研究結(jié)果顯示，隨著有生長的胚胎數(shù)目的增多，種植率和妊娠率均明顯增高。VAN DENELST等[11]的研究提示，凍融胚胎復蘇后卵裂球進一步生長可能使著床時胚胎與子宮內(nèi)膜更同步。此外，LAVERGE等[12]對60個凍融胚胎復蘇后卵裂球未生長的胚胎進行針對X、Y和1號染色體的熒光原位雜交顯示，這種胚胎常常伴有染色體異常，如單倍體、多倍體、非整倍體甚至是嵌合體的發(fā)生，其中僅僅20%左右的胚胎染色體正常，因此，可推斷即使是這種胚胎著床了,由于染色體異常大多數(shù)也會發(fā)生早期流產(chǎn)。因此，建議FET周期中選擇移植復蘇后有進一步生長的胚胎。

綜上所述,移植2或3枚胚胎對凍融胚胎移植周期的妊娠結(jié)局并無影響，但隨著生長胚胎個數(shù)的增多，種植率和妊娠率有所增加。因此，可以根據(jù)復蘇后胚胎生長情況選擇胚胎移植，進而提高凍融胚胎移植周期的妊娠率。

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(本文編輯 厲建強)

THE INFLUENCE OF EMBRYO CONDITION AFTER RESUSCITATION OF FROZEN EMBRYO TRANSFER ON PREGNANCY RATE

LIUXiaojing,QIXiujuan,LüYingpin,LIUHaining,LIUJianxin,TANGXiuming

(Reproductive Branch, The Affiliated Hospital of Qingdao University, Qingdao 266003, China)

ObjectiveTo investigate the influence of embryo condition after resuscitation and transplanted embryonic number on clinical pregnancy rate.MethodsAn analysis of 193 cases of frozen embryo transfer cycles was done. All were divi-ded into groups according to the number of transferred embryo and the further growth condition of resuscitated embryo. Two-embryo array (group A) was divided into group A0(none growth embryo), group A1(one growth embryo), group A2(two growth embryos), and three-embryo array (B group) was divided into group B0(none growth embryo), group B1(one growth embryo), group B2(two growth embryos) and group B3(three growth embryos), the implantation rate, pregnancy rate and other indicators were compared among them.ResultsThe difference of embryo implantation rate and clinical pregnancy rate between group A and group B was not significant (P>0.05). The differences within each group of groups A and B were significant in regard to implantation and clinical pregnancy rate (χ2=4.34-4.59,P<0.05).ConclusionTwo-or three-embryo transfer does not affect the clinical pregnancy rate of frozen embryo transfer cycle. But with the growing number of embryo, the implantation rate and clinical pregnancy rate increase, and, thus, the choice of embryo transfer can be made according to the growth of the embryo after resuscitation so as to increase the pregnancy rate of frozen embryo transfer cycle.

embryo; embryo transfer; pregnancy rate

2014-06-26;

2014-10-16

劉曉景(1988-)，女，碩士研究生。

祁秀娟(1963-)，女，碩士，主任醫(yī)師，碩士生導師。

R715.2

A

1008-0341(2015)02-0161-03