楊慶賢，陳江林，王 琨

(重慶市云陽縣人民醫(yī)院輸血科 404500)

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·案例分析·

微柱凝集法與凝聚胺法交叉配血結(jié)果分析

楊慶賢，陳江林，王 琨

(重慶市云陽縣人民醫(yī)院輸血科 404500)

微柱凝集法； 凝聚胺法； 交叉配血

交叉配血是判斷能否輸血的重要依據(jù)，通過將獻(xiàn)血者的紅細(xì)胞和血清分別與受血者的血清和紅細(xì)胞融合，觀察有無凝集反應(yīng)[1-2]。交叉配血有多種方法，如抗人球蛋白法、木瓜蛋白酶法、微柱凝集法和凝聚胺法。隨著微柱凝集法在國內(nèi)的廣泛應(yīng)用，本院特將此方法與凝聚胺法進(jìn)行交叉配血[3-4]。為了分析兩種方法的特點(diǎn)，本研究回顧性分析本院2013年6～12月需要輸血的100例患者的臨床資料，對所有患者分別采用微柱凝集法與凝聚胺法同型交叉配血，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析本院2013年6～12月需要輸血的100例患者的臨床資料，其中男54例，女46例；年齡22～64歲，平均34.3歲；有妊娠史者20例，輸血史者30例。對所有患者分別采用微柱凝集法與凝聚胺法同型交叉配血，血清標(biāo)本均在24 h以內(nèi)檢測。

1.2 儀器與試劑 微柱凝集法：交叉配血卡(美國強(qiáng)生有限公司)，博唯優(yōu)專用離心機(jī)、博唯優(yōu)專用孵育器(美國強(qiáng)生有限公司)；凝聚胺法：重懸液、底離子介質(zhì)液、凝聚胺液(合肥天一生物技術(shù)研究所)。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本檢測 對送檢血標(biāo)本實(shí)施微柱凝集法和凝聚胺法的交叉配血試驗(yàn)，當(dāng)出現(xiàn)不匹配標(biāo)本時，可用相同的血標(biāo)本用上述兩種方法重復(fù)試驗(yàn)1次。

1.3.2 凝聚胺法 (1)把獻(xiàn)血者和供血者提供的血標(biāo)本用生理鹽水調(diào)和成紅細(xì)胞懸液，以3%～5%為準(zhǔn)，兩種血標(biāo)本每份1.0 mL，準(zhǔn)備兩根試管并標(biāo)明主、次側(cè)，將獻(xiàn)血者紅細(xì)胞懸液1滴和受血者血清2滴加入主側(cè)管中，之后將受血者紅細(xì)胞懸液1滴和獻(xiàn)血者血清(漿)2滴加入次側(cè)管中。(2)主、次側(cè)試管分別加入6滴低離子介質(zhì)液，混勻后靜置1 min。(3)主、次側(cè)試管分別加入2滴聚凝胺液，混勻后靜置15 s。(4)以3 000 r/min的速度離心15 s，棄上清液，之后輕晃試管查看有無凝聚，如果未出現(xiàn)凝聚現(xiàn)象，需重做。(5)在主、次側(cè)試管中加重懸液2滴，輕搖試管觀察凝聚是否散開。結(jié)果判斷：如果不是特異性聚集，在加入重懸液后紅細(xì)胞凝塊會在1 min內(nèi)分散，則證明匹配，此非特異性聚集是由凝聚胺引起。相反，試驗(yàn)后仍然是不同強(qiáng)度的凝塊，則證明為不匹配，特異性凝集由抗體和血型抗原引起。

1.3.3 微柱凝集法 (1)把獻(xiàn)血者和供血者提供的血標(biāo)本用生理鹽水調(diào)和成紅細(xì)胞懸液，以3%～5%為準(zhǔn)，兩種血標(biāo)本每份1.0 mL。(2)將患者姓名標(biāo)注在配血卡上，并標(biāo)明主、次側(cè)，首先將BLSS液50 μL加入主、次側(cè)試管中。之后在主側(cè)試管中加入獻(xiàn)血者3%～5%的紅細(xì)胞懸液10 μL和受血者血漿50 μL，在次側(cè)試管中加入受血者3%～5%的紅細(xì)胞懸液10 μL和獻(xiàn)血者血清(漿)50 μL。(3)在37 ℃的環(huán)境下孵育10 min。(4)以1 500 r/min的速度離心2 min，以900 r/min的速度離心3 min后觀察結(jié)果。結(jié)果判斷：若配血相合，有大量的紅細(xì)胞滯留在凝膠管底部，則表示為陰性；若配血不相符，在試管上部或中間只有些許紅細(xì)胞，并沒有滯留在凝膠管底部，則證明為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩種交叉配血結(jié)果比較 在供血者與患者ABO血型及Rh(D)血型血液標(biāo)本相同的情況下進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，微柱凝集法有5例陽性標(biāo)本，5例標(biāo)本經(jīng)抗體篩查證實(shí)后得知其中所產(chǎn)生的不規(guī)則抗體屬于供血者，其操作時間約30 min；凝聚胺法有0例陽性標(biāo)本，其操作時間約10 min。見表1。

表1 100例微柱凝集法與凝聚胺法交叉配血結(jié)果比較

2.2 5例陽性標(biāo)本處理方案及結(jié)果分析 5例陽性標(biāo)本均在ABO、Rh(D)同型的基礎(chǔ)上行交叉配血試驗(yàn)，因此，微柱凝集法陽性標(biāo)本需復(fù)查患者血型，檢查患者輸血史及移植史，排除血型錯誤的原因。試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)均為供血者不規(guī)則抗體導(dǎo)致交叉配血試驗(yàn)陽性。經(jīng)直接、間接抗人球蛋白試驗(yàn)，在排除同種抗體和自身免疫性溶血性貧血等疾病后，可進(jìn)行輸血治療，否則重新經(jīng)交叉配血試驗(yàn)后輸血。5例陽性標(biāo)本均采取重新交叉配血試驗(yàn)后輸血治療，7 d后直接、間接抗人球蛋白試驗(yàn)均為陰性。

3 討 論

交叉配血從血型鑒定的基礎(chǔ)上分析，為了進(jìn)一步證實(shí)受血者和獻(xiàn)血者之間是否存在血型不合的抗原-抗體反應(yīng)，可通過交叉配血試驗(yàn)進(jìn)行證實(shí)，從而保證受血者的輸血安全[5-6]。因患者的生命安全與輸血有著直接聯(lián)系，所以即使患者和獻(xiàn)血者屬于同一血型，也應(yīng)進(jìn)行交叉配血。交叉配血還是確定是否輸血的重要依據(jù)，如主測和次測均未產(chǎn)生凝集現(xiàn)象，可實(shí)施輸血。如果受血者的血清和獻(xiàn)血者紅細(xì)胞在主測發(fā)生凝集，應(yīng)禁止輸血；如主側(cè)不凝集，受血者紅細(xì)胞和獻(xiàn)血人血清在次側(cè)出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，必要時可少量或慢速輸血[7]。交叉配血試驗(yàn)有多種方法，如膠體介質(zhì)配血法、酶技術(shù)配血法、聚凝胺法、鹽水法等，本文研究中采用的微柱凝集法和凝聚胺法。

微柱凝膠試驗(yàn)耗時較長，需要約30 min，需要孵育器和特殊離心機(jī)，從而不適合用于處理急診標(biāo)本。微柱凝集法的敏感性高，能檢測出不規(guī)則抗體，有更準(zhǔn)確的結(jié)果。

凝聚胺法降低溶液的離子強(qiáng)度需利用低離子介質(zhì)，從而減少紅細(xì)胞周圍的陽離子云，促進(jìn)紅細(xì)胞相應(yīng)抗原與血清中的抗體融合，之后加入凝聚胺溶液來中和紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷，形成可逆的非特異性聚集并直接凝集紅細(xì)胞。此方法簡單快捷，試劑便宜，配血時間只需10 min，且不需要特殊儀器設(shè)備，廣泛應(yīng)用于基層醫(yī)院或急診搶救患者。

本文研究中，在供血者與患者ABO血型及Rh(D)血型血液標(biāo)本相同的情況下進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，微柱凝集法有5例陽性標(biāo)本，經(jīng)抗體篩查證實(shí)后得知，5例標(biāo)本已經(jīng)產(chǎn)生了針對供血者的不規(guī)則抗體，其操作時間約30 min；凝聚胺法有0例陽性標(biāo)本，其操作時間約10 min。微柱凝集法出現(xiàn)不匹配的原因有惡性腫瘤、免疫性溶血性貧血，骨髓增生異常綜合征、紅細(xì)胞濃度過渡等。

綜上所述，微柱凝集法的敏感性高于凝聚胺法，能提高不完全抗體檢出率，結(jié)果更準(zhǔn)確，但耗時較長，不適合用于急診配血。凝聚胺法快速、簡便，假陽性較少，適合用于急診配血。

[1]鐘月華，羅鐵軍，黃華華，等．微柱凝膠法與凝聚胺法在交叉配血中的比較研究[J]．廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，27(2)：296-297．

[2]劉永霞．凝聚胺法與微柱凝膠法在臨床配血中的應(yīng)用比較[J]．現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2012，21(3)：266-267．

[3]危艷順，姚明．凝聚胺法、微柱凝膠法兩種配血方法學(xué)評價[J]．臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，12(8)：623-624．

[4]周紅波．微柱凝膠法、凝聚胺法和鹽水法在交叉配血中的應(yīng)用[J]．實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2014，32(1)：92．

[5]晏紅，蘭玉梅．凝聚胺法及微柱凝膠法同型交叉配血的結(jié)果分析[J]．醫(yī)藥前沿，2013，3(12)：117-118．

[6]王遠(yuǎn)杰．凝聚胺法聯(lián)合微柱凝集試驗(yàn)在臨床輸血中的應(yīng)用[J]．西部醫(yī)學(xué)，2009，21(11)：1976-1977．

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10.3969/j.issn.1672-9455.2015.07.066

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