張?zhí)煊?，王紅羚

(1.重慶市沙坪壩區(qū)婦幼保健院檢驗科 400030；2.重慶市腫瘤醫(yī)院 400030)

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·臨床探討·

胃癌患者外周血Th17細胞相關(guān)因子檢測及其臨床意義*

張?zhí)煊?，王紅羚2

(1.重慶市沙坪壩區(qū)婦幼保健院檢驗科 400030；2.重慶市腫瘤醫(yī)院 400030)

目的 探討胃癌患者外周血Th17細胞相關(guān)因子的臨床價值。方法 收集該院2012年6月至2013年6月間30例胃癌患者的外周血，同時檢測30例健康者外周血作為健康對照者，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血漿Th17細胞相關(guān)因子白細胞介素-1β(IL-1β)、白細胞介素-6 (IL-6)、白細胞介素-23 (IL-23)、白細胞介素-17 (IL-17)水平。結(jié)果 胃癌患者IL-1β、IL-6、IL-23、IL-17水平均顯著高于健康對照者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；且晚期胃癌患者IL-6、IL-23、IL-17水平顯著高于早期胃癌患者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論 Th17細胞相關(guān)因子與胃癌密切相關(guān)，檢測其水平有助于疾病的判斷。

胃癌； Th17細胞相關(guān)因子； 進展

CD4+T細胞即輔助性T細胞(Th)，其在機體介導的免疫應答和免疫調(diào)控中發(fā)揮重要作用。根據(jù)細胞因子表達譜和轉(zhuǎn)錄調(diào)控子的不同，Th 細胞可分為Th1、Th2、Th17和調(diào)節(jié)性T細胞[1]。調(diào)節(jié)性T細胞是免疫抑制性細胞，在多個腫瘤(如結(jié)直腸癌、肝癌和胃癌等患者)的外周血中顯著增加并抑制效應性T細胞功能，進而介導腫瘤的免疫逃逸[2]。Th17細胞是新近發(fā)現(xiàn)的、以分泌白細胞介素-17(IL-17)為主要特征的輔助性T細胞，在細胞因子白細胞介素-1β(IL-1β)、白細胞介素-6(IL-6)、白細胞介素-23(IL-23)的共同作用下，初始CD4+T細胞可特異性地上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子STAT3和RORγt表達，進而誘導Th17細胞的分化成熟[3]。早期研究顯示Th17細胞可防御胞外菌感染、促進自身免疫性疾病的發(fā)展并介導免疫移植排斥反應[4]。后期研究發(fā)現(xiàn)，Th17細胞與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及患者的預后密切相關(guān)[5]。胃癌患者的Th17細胞不僅在外周血中的比例顯著高于健康者，還與胃癌患者生存時間呈顯著負相關(guān)，提示Th17細胞可評價胃癌患者的預后[6]。為了進一步明確Th17細胞效應分子及其分化調(diào)控相關(guān)因子在胃癌外周血的變化情況，現(xiàn)收集胃癌患者外周血，檢測其Th17細胞相關(guān)因子的水平，同時評價該類因子與不同分期胃癌患者的相關(guān)性，為研究胃癌免疫治療提供臨床指導。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集重慶市腫瘤醫(yī)院2012年6月至2013年6月進行胃癌切除手術(shù)的30例患者外周血(患者組)，其中男14例，女16例，年齡34～65歲?；颊吲R床分期根據(jù)最新國際TNM分期標準，其中Ⅰ期患者6例，Ⅱ期患者8例，Ⅲ期患者11例，Ⅳ期患者5例。同時收集重慶市腫瘤醫(yī)院30例體檢健康者的外周血作為健康對照者(健康對照組)，其中男15例，女15例，年齡25～72歲。

1.2 方法 采集患者組術(shù)前和健康對照組當日外周血2 mL，置于肝素抗凝管，常規(guī)離心，收集上層血漿，所有研究對象的外周血均一次性獲取，-80 ℃保存，備檢。使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)進行細胞因子IL-1β、IL-6、IL-23、IL-17水平檢測。ELISA 試劑盒購于北京嘉美諾斯生物科技有限公司，專人檢測，酶標儀應用瑞士TECAN ferrdom Evolyzer 全自動酶免工作站。

2 結(jié) 果

2.1 2組研究對象Th17細胞相關(guān)因子的檢測結(jié)果比較 患者組IL-17水平(86.4±14.5 pg/mL)顯著高于健康對照組(32.3±8.6 pg/mL)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；同時檢測Th17細胞分化相關(guān)細胞因子水平結(jié)果顯示，患者組IL-1β(66.8±6.2 pg/mL)、IL-6(189.7±19.4 pg/mL)、IL-23(234.6±18.8 pg/mL)均顯著高于健康對照組(31.5±6.7、42.5±11.6、90.8±8.5 pg/mL)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見圖1。

2.2 患者組不同分期胃癌患者外周血Th17細胞相關(guān)因子水平的檢測結(jié)果比較 根據(jù)國際最新腫瘤TNM分期標準，將患者組分為早期(Ⅰ+Ⅱ期)和晚期(Ⅲ+Ⅳ期)2組。晚期胃癌患者IL-6、IL-23、IL-17水平(分別為254.9±16.4、287.3±14.2、106.4±9.9 pg/mL)均顯著高于早期患者(分別為135.3±18.2、176.2±10.4、59.3±7.5 pg/mL)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。雖然早、晚期患者IL-1β水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，但與早期比較(56.7±5.6 pg/mL)，晚期患者(78.8±6.4 pg/mL)呈增加趨勢。見圖2。

圖1 2組研究對象外周血IL-17、IL-1β、IL-6、IL-23水平結(jié)果圖

3 討 論

腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中，機體會產(chǎn)生一系列復雜的抗腫瘤免疫應答，以抵抗腫瘤生長，但腫瘤的不斷進展則表明效應性T細胞并不能有效清除腫瘤細胞；不僅如此，腫瘤微環(huán)境可誘導T細胞轉(zhuǎn)變成具有促腫瘤活性的免疫抑制性T細胞，進一步導致腫瘤的惡性進程。有研究報道，腫瘤來源的轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)可通過誘導調(diào)節(jié)性T細胞而產(chǎn)生抑制效應性T細胞的免疫應答，經(jīng)腫瘤活化的單核細胞則通過分泌細胞因子IL-1β、IL-6、IL-23從而誘導Th17細胞分化導致腫瘤新生血管的形成[7]。

目前，關(guān)于胃癌與Th17細胞的研究多集中在Th17細胞水平改變及其與臨床的關(guān)系。胃癌患者外周血和腫瘤組織中均能檢測到Th17細胞水平的顯著增加，且晚期胃癌患者Th17水平顯著高于早期胃癌患者；同時，高水平Th17細胞的胃癌患者生存時間要小于低水平Th17細胞的胃癌患者[6]。此外，免疫組織化學染色檢測提示腫瘤IL-17的表達可獨立預測胃癌患者的總體生存率，表明Th17細胞及其效應分子IL-17在胃癌中發(fā)揮免疫抑制作用[8]。

本研究結(jié)果顯示，Th17細胞來源的效應分子IL-17除了在腫瘤組織中表達增加，其在胃癌患者外周血中的水平也顯著增加，同時經(jīng)臨床分析統(tǒng)計表明，晚期胃癌患者外周血IL-17的水平顯著高于早期胃癌患者，進一步證實Th17細胞及其效應分子IL-17在胃癌中的作用。IL-1β、IL-6、IL-23是協(xié)同誘導Th17細胞分化成熟的細胞因子，本組檢測胃癌患者外周血中這3個細胞因子的水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與健康對照組比較，IL-1β、IL-6、IL-23在患者組外周血中顯著增加，且晚期胃癌患者外周血IL-6和IL-23水平明顯高于早期胃癌患者，提示其不僅能誘導Th17細胞產(chǎn)生，而且可能與Th17細胞效應分子IL-17共同介導胃癌進展。然而，IL-17促進胃癌發(fā)生、發(fā)展的具體機制仍不明確。盡管有關(guān)研究報道IL-17經(jīng)其受體促進胃癌細胞系的增殖和損傷修復，但是腫瘤微環(huán)境由多種不同類型細胞參與、組成，且單核-巨噬細胞也高表達IL-17受體[9-10]。IL-17是否通過巨噬細胞抑制抗腫瘤免疫應答仍不清楚。

綜上所述，Th17細胞相關(guān)因子在胃癌患者外周血中發(fā)生顯著變化并與腫瘤的進展密切相關(guān)，進一步明確胃癌Th17細胞促腫瘤調(diào)控機制，將為其臨床免疫治療提供新的實驗室證據(jù)。

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2012年重慶市科委一般課題資助項目(cstc2012jja10046)。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.17.058

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1672-9455(2015)17-2626-03

2015-06-15

2015-06-20)