鄭世海，田耘博，田 進(jìn)

(1.重慶市北部新區(qū)第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 401147；2.重慶市血液

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·論 著·

屎腸球菌的分布及耐藥性研究

鄭世海1△，田耘博2，田 進(jìn)3

(1.重慶市北部新區(qū)第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 401147；2.重慶市血液

中心檢驗(yàn)科 400152；3.重慶市酉陽縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 409899)

目的 對屎腸球菌耐藥情況進(jìn)行分析研究。方法 分析重慶市北部新區(qū)第一人民醫(yī)院2011年1月至2014年10月分離的478株屎腸球菌的耐藥性，總結(jié)其標(biāo)本類型、科室分布等情況，探討耐藥率發(fā)展趨勢。結(jié)果 屎腸球菌和耐萬古霉素屎腸球菌(VREfm)的分離率呈逐年遞增趨勢。重慶市北部新區(qū)第一人民醫(yī)院屎腸球菌萬古霉素耐藥率由2011年的2.67%上升到2014年的6.99%。結(jié)論 ICU是屎腸球菌和VREfm株數(shù)分離最多的科室。VREfm的耐藥性分析顯示，VREfm對于利奈唑胺和替加環(huán)素的敏感性仍很高，這兩種抗菌藥物可用于VREfm的臨床治療。

屎腸球菌; VREfm; 抗菌藥物

腸球菌屬是消化道正常定植菌群，也是醫(yī)院感染的重要病原菌之一，可導(dǎo)致尿路感染、心內(nèi)膜炎、腹腔感染、菌血癥等，研究顯示以糞腸球菌和屎腸球菌導(dǎo)致的尿路感染最為常見[1]。糞腸球菌引起的感染過去曾占絕對優(yōu)勢(85%～90%)，但屎腸球菌引起的感染近些年來逐年增加，已引起衛(wèi)生領(lǐng)域的重視。2007年的美國疾控中心報(bào)告顯示，所有醫(yī)院感染腸球菌中，屎腸球菌的比例已超過1/3，屎腸球菌導(dǎo)致感染的比例已與糞腸球菌相持平，且有繼續(xù)上升的趨勢[1-2]。廣譜抗菌藥物的廣泛使用及不合理應(yīng)用，導(dǎo)致了耐藥菌株的出現(xiàn)，以耐萬古霉素屎腸球菌(VREfm)最為常見，這給臨床治療和院感控制帶來巨大困難[1-3]。本研究對本院2011年1月至2014年10月分離的屎腸球菌進(jìn)行抗菌藥物耐藥分析，總結(jié)標(biāo)本類型、科室分布等情況，探討其耐藥率的變化趨勢，為臨床合理應(yīng)用抗菌藥物治療和院感監(jiān)測控制提供合理依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 納入 2011年1月至2014年12月本院患者送檢的痰、胸腹水、尿、腦脊液、引流液、血液等標(biāo)本中所分離出的屎腸球菌478株。所有標(biāo)本均按照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)制定的微生物臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)及操作規(guī)范采集標(biāo)本。痰液標(biāo)本為清晨漱口后第一口深部咳痰；尿液標(biāo)本為清潔中段尿；血液標(biāo)本為患者發(fā)熱初期或高峰時(shí)無菌采集；胸腹水等其他標(biāo)本均無菌采集于拭子或試管內(nèi)。

1.2 標(biāo)本的處理及菌株分離及鑒定 按照CLSI微生物臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，血培養(yǎng)入血培養(yǎng)儀培養(yǎng)后，取出陽性瓶，無菌操作用針頭刺入瓶中，取一定量的標(biāo)本接種于血平板上分三區(qū)劃線；尿液標(biāo)本取10 μL定量接種于血平板后連續(xù)劃線；痰、腦脊液、胸腹水等標(biāo)本，用無菌接種環(huán)挑取接種于血平板上分三區(qū)劃線；所收集的標(biāo)本接種于血平板后，35 ℃、5%CO2條件下培養(yǎng)18～24 h。挑選灰白色可疑菌落，經(jīng)革蘭染色和觸酶試驗(yàn)證實(shí)后，取單個(gè)菌落，用VITEK-2全自動(dòng)細(xì)菌分析系統(tǒng)以及配套的革蘭陽性菌鑒定卡進(jìn)行鑒定。

1.3 采用VITEK進(jìn)行藥敏試驗(yàn) 采用法國生物梅里埃公司的VITEK藥敏檢測卡AST-GP67卡測定腸球菌屬，對6種抗菌藥物的敏感性，分別為氨芐青霉素、紅霉素、左氧氟沙星、萬古霉素、利奈唑胺以及替加環(huán)素，采用當(dāng)年CLSI規(guī)定的臨界值判定敏感、中介和耐藥。萬古霉素及利奈唑胺耐藥或中介時(shí)用E-test法確證。將商品化的含有抗菌藥物(萬古霉素、利奈唑胺)濃度梯度的E-test藥敏條，放在已接種0.5個(gè)麥?zhǔn)蠞舛葐挝痪旱腂HI平板上，置5%CO2孵箱，35 ℃培養(yǎng)24 h后可讀取梨形抑菌圈結(jié)果，圈的邊緣與藥敏條交界處的數(shù)值為抗菌藥物抑制細(xì)菌生長的濃度。此濃度即為該抗菌藥物對受試菌的MIC值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS17.0軟件，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 478株屎腸球菌標(biāo)本來源及菌種分布 2011年1月至2014年10月分離屎腸球菌478株，其檢出率呈逐年遞增趨勢，科室臨床分布以ICU居多(94株，占19.67%)，其次為消化科(68株,14.23%)、神經(jīng)科(56株，11.72%)，泌尿科(48株，10.04%)，見表1。

表1 2011年1月至2014年10月分離屎腸球菌的

注：泌尿科包含腎內(nèi)科和泌尿外科，神經(jīng)科包含神經(jīng)外科和神經(jīng)內(nèi)科，消化科包含消化內(nèi)科、肝膽外科、胃腸外科、肛腸外科。

4年來分離屎腸球菌標(biāo)本情況顯示，其中來源最多的標(biāo)本為尿液(173株，36.19%)，其次是血液標(biāo)本(84株，17.57%)和分泌物(51株，10.67%)；無菌體液里以血液分離率最高(84株，17.57%)，見表2。

表2 2011年1月至2014年10月分離的屎腸球菌

2.2 屎腸球菌耐藥情況 左氧氟沙星、紅霉素和氨芐西林的耐藥率每年均高于90%，替加環(huán)素和利奈唑胺未發(fā)現(xiàn)其耐藥株，萬古霉素的耐藥率呈逐年遞增趨勢，見表3。其中以ICU的分離率遠(yuǎn)高于其他科室。本院23株VREfm分布情況，2011年2株VREfm分布(ICU 2株)，2012年5株VREfm分布(ICU 4株，泌尿科1株)，2013年6株VREfm分布(ICU 4株，血液科1株，泌尿科1株)，2014年10株VREfm分布(ICU 7株，血液科1株，泌尿科1株，消化科1株)。

表3 2011年1月至2014年10月分離的屎腸球菌對6種抗菌藥物的耐藥情況

注：/表示無數(shù)據(jù)。

3 討 論

近些年來，腸球菌屬引起的院感的研究報(bào)道日益增多，腸球菌已成為革蘭陽性菌院感的第三位[1]。腸球菌也可引起院外感染,以屎腸球菌檢出率最高。因此，加強(qiáng)腸球菌感染的控制及耐藥檢測，合理有效運(yùn)用抗菌藥物治療已成為目前醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的重要問題[1]。

本研究回顧性分析了2011年1月至2014年10月本院屎腸球菌的分布情況和耐藥情況。結(jié)果表明屎腸球菌檢出率及數(shù)量逐年遞增，標(biāo)本來源以在尿液中檢出率最高，占36.19%，略高于國內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[4-5]。科室分布以ICU為主，這可能由于ICU患者均為危重病例，并伴有嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病，如高血壓、糖尿病、重大手術(shù)及外傷后，免疫力普遍低，再加上廣譜抗菌藥物的應(yīng)用、腸外營養(yǎng)、靜脈置管、機(jī)械通氣等，這些都是導(dǎo)致腸球菌感染和VREfm感染的高危因素[1-2]。消化科屎腸球菌分離率占第2位，多由腸源性感染所引起。但消化科室患者免疫力低下及機(jī)械通氣等引起VREfm感染的高危因素較少，所以分離的VREfm較ICU少。血液標(biāo)本分離出的屎腸球菌呈逐年遞增趨勢，這與本院采取了血培養(yǎng)雙瓶送檢工作有關(guān)，血培養(yǎng)雙瓶送檢率明顯增加，血培養(yǎng)的陽性率也明顯增加，因而分離出的屎腸球菌也明顯增多。

本院分離屎腸球菌對氨基糖苷類藥物的耐藥率很高，臨床上對于屎腸球菌或糞腸球菌引起的嚴(yán)重感染時(shí)，常選擇慶大霉素與作用于細(xì)胞壁的抗菌藥物進(jìn)行聯(lián)合用藥，可發(fā)揮其協(xié)同殺菌作用[2]。萬古霉素耐藥是目前臨床最重視的腸球菌耐藥問題。萬古霉素屬于糖肽類抗菌藥物，對革蘭陽性球菌的治療效果較好，常作為治療首選，也因此導(dǎo)致萬古霉素的耐藥率呈逐年遞增趨勢[2]。本院屎腸球菌萬古霉素耐藥率由2011年的2.67%，上升到2014年的6.99%，明顯低于中國臺灣報(bào)道的30.00%[6]。合理有效地運(yùn)用抗菌藥物，以保持屎腸球菌對萬古霉素的高度敏感性，降低耐藥率是臨床值得重視的問題。

利奈唑胺是第一代惡唑烷酮藥物，可與細(xì)菌50s亞基上核糖體RNA的23s位點(diǎn)結(jié)合，從而阻止形成70s始動(dòng)復(fù)合物。利奈唑胺是目前認(rèn)為一類可有效治愈VREfm感染的抗菌藥物，其用于臨床革蘭陽性菌感染的治療時(shí)間較晚，故屎腸球菌對其的耐藥率極低。替加環(huán)素是一類新型的甘氨酰環(huán)素類抗菌藥物，在臨床研究VREfm的治療非常有效。

在屎腸球菌感染臨床治療中，應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)合理有效地選擇窄譜以及敏感性較高的抗菌藥物，對院感的治療和降低VREfm感染的發(fā)生有重要意義。

[1]Thierfelder C,Keller PM,Kocher C,et al.Vancomycin-resistant Enterococcus[J].Swiss Med Wkly,2012，142:W13540.

[2]Hollenbeck BL,Rice LB.Intrinsic and acquired resistance mechanisms in enterococcus[J].Virulence,2012,3(5):421-433.

[3]Brilliantova AN,Kliasova GA,Mironova AV,et al.Spread of vancomycin-resistant Enterococcus faecium in two haematological centres in Russia[J].J Antimicrob Agents,2010,35(2):177-181.

[4]Zhu X,Zheng B,Wang S,et al.Molecular characterisation of outbreak-related strains of vancomycin-resistant Enterococcus faecium from an intensive care unit in Beijing,China[J].J Hosp Infect,2009,72(2):147-154.

[5]Sun H,Wang H,Xu Y,et al.Molecular characterization of vancomycin-resistant Enterococcus spp.clinical isolates recovered from hospitalized patients among several medical institutions in China[J].Diag Micro Infect Disea,2012,74(4):399-403.

[6]Lu CL,Chuang YC,Chang HC,et al.Microbiological and clinical characteristics of vancomycin-resistant Enterococcus faecium bacteraemia in Taiwan:implication of sequence type for prognosis[J].J Antmicrob Chem,2012,67(9):2243-2249.

Distribution and drug resistance of Enterococcus faecium

ZHENShi-hai1△,TianYun-bo2,TianJin3

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,NorthernNewDistrictFirstPeople′sHospital,Chongqing401147,China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,ChongqingBloodCenter,Chongqing400152,China;3.YouyangCopuntyPeople′sHospital,Chongqing409899,China)

Objective To analyze and study the drug resistance situation of Enterococcus faecium.Methods To investigate the drug resistant situation of Enterococcus faecium isolated in the northern new district first people′s hospital and to summarize the situation of specimens types and departments distribution,etc.The drug resistance development trend was investigated.Results The results showed that the drug resistance rate of Enterococcus faecium and vancomycin-resistant Enterococcus faecium(VREfm) in this hospital was increased from 2.67% in 2011 to 6.99% in 2014.Vancomycin resistant rates were increased from 2.67% in 2011 to 6.99% in 2014.Conclusion Most of Enterococcus faecium and VREfm are isolated from ICU.The VREfm drug resistance analysis shows that VREfm is still highly sensitive high sensitive to linezolid and tigecycline,these two drugs can be used in the clinical treatment of VREfm.

Enterococcus faecium; VREfm; antibacterial drugs

鄭世海，男，本科，主管檢驗(yàn)師，主要從事生化檢驗(yàn)方面的研究?！?/p>

，E-mail：huxiao_4215@qq.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.17.042

A

1672-9455(2015)17-2589-02

2015-03-28

2015-04-12)