張美娟，邱勝豐,2△

(1.南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗學(xué)部，南京 210029;2.江蘇省婦幼保健院檢驗科，南京 210036)

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·論 著·

尿肺炎鏈球菌、白細(xì)胞計數(shù)和C反應(yīng)蛋白聯(lián)合檢測在兒童下呼吸道感染中的診斷價值*

張美娟1，邱勝豐1,2△

(1.南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗學(xué)部，南京 210029;2.江蘇省婦幼保健院檢驗科，南京 210036)

目的 探討尿肺炎鏈球菌檢測對兒童下呼吸道感染快速診斷的臨床意義。方法 收集2014年9～10月在江蘇省婦幼保健院的住院患兒66例，采集尿液標(biāo)本用于檢測尿中肺炎鏈球菌抗原，同時進(jìn)行血液分析和C反應(yīng)蛋白(CRP)檢測。結(jié)果 66例患兒中，尿肺炎鏈球菌檢測、白細(xì)胞計數(shù)(WBC)和CRP的陽性率分別為4.55%、25.76%和54.55%；而對于明確的肺炎鏈球菌感染者，三者的陽性率類似，均達(dá)75.00%以上。結(jié)論 尿肺炎鏈球菌快速檢測技術(shù)聯(lián)合WBC和CRP檢測，有助于臨床醫(yī)生輔助快速診斷鏈球菌感染。

尿肺炎鏈球菌； 下呼吸道感染； 免疫層析法； 白細(xì)胞計數(shù)； C反應(yīng)蛋白

肺炎鏈球菌(SP)被認(rèn)為是社區(qū)兒童獲得性下呼吸道感染的主要致病菌，可引起兒童肺炎、腦膜炎、菌血癥、中耳炎和鼻竇炎等[1]。肺炎鏈球菌屬于苛養(yǎng)菌，營養(yǎng)要求高，培養(yǎng)所需時間長，鑒定程序繁瑣，且陽性率較低[2]。目前臨床上診斷的主要依據(jù)是痰培養(yǎng)和血培養(yǎng)，所需時間較長，影響臨床用藥的及時性，并且因為取樣部位的不確定性致使結(jié)果出現(xiàn)假陰性，延誤臨床診斷與治療。研究顯示，尿肺炎鏈球菌抗原是一種可溶性抗原，在肺炎鏈球菌感染的機(jī)體中可有這種抗原的存在，因此,本研究用免疫層析法 (ICT) 測定下呼吸道感染患兒尿液標(biāo)本中肺炎鏈球菌抗原，旨在探討其臨床診斷意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究收集2014年9～10月江蘇省婦幼保健院兒科下呼吸道感染的患兒66例，年齡為3個月至5歲，其中男33例，女33例；所有患兒均符合小兒下呼吸道感染診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。

1.2 標(biāo)本采集與處理 所有患兒在入院時，采集手指末梢血檢測白細(xì)胞計數(shù)(WBC)和C反應(yīng)蛋白(CRP)，并留取尿液標(biāo)本，收集后，24 h內(nèi)測定尿肺炎鏈球菌。

1.3 儀器與試劑 WBC檢測采用SYSMEX公司的XS800i血球儀，CRP檢測采用ORION公司的QuickRead Go CRP檢測儀，尿肺炎鏈球菌抗原的檢測采用ALERE公司的Binax NOW試劑盒。

1.4 試驗原理與檢測方法 肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒(膠體金法)是一種薄膜免疫層析試驗，用于檢測人類尿液和腦脊液中肺炎鏈球菌的可溶性抗原。兔抗肺炎鏈球菌抗體被吸附到硝酸纖維素膜上作為樣本線，對照抗體作為另一條線吸附到同一膜上。結(jié)合有可視粒子的兔抗肺炎鏈球菌抗體和抗種抗體干燥結(jié)合到惰性纖維支持物上，形成的結(jié)合物墊和帶條紋的膜結(jié)合到一起組成檢測條。檢測條和放拭子標(biāo)本的孔位于一個書形鉸鏈狀檢測卡的兩側(cè)。試驗時，將患兒尿液與試劑盒從冰箱取出，平衡至室溫。將拭子浸入尿液標(biāo)本中，取出插入檢測卡底部的孔中。向底部的孔中加入A試劑3滴，將檢測卡閉合，使樣本與檢測條相觸。15 min后在窗口判讀結(jié)果。出現(xiàn)2條紫紅色的色帶線，則視為陽性結(jié)果；只出現(xiàn)對照線，視為陰性結(jié)果。若對照線未出現(xiàn)，則視為無效結(jié)果，應(yīng)重新試驗。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS16.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學(xué)分析，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

在66例下呼吸道感染患兒中，有3例尿肺炎鏈球菌檢測結(jié)果陽性，陽性率大約為4.55%；而對于明確的肺炎鏈球菌感染的陽性率大約為75.00%。而WBC和CRP的檢測結(jié)果顯示，WBC增高者占25.76%，CRP增高者占54.55%；對于明確的肺炎鏈球菌感染，兩者的陽性率則分別為75.00%和100.00%。與尿肺炎鏈球菌檢測結(jié)果類似。患兒WBC、CRP和尿肺炎鏈球菌聯(lián)合檢測結(jié)果見表1。

表1 WBC、CRP和尿肺炎鏈球菌聯(lián)合檢測結(jié)果

3 討 論

肺炎鏈球菌廣泛分布于自然界，常寄居于健康人的鼻咽部，兒童鼻咽部帶菌率可達(dá)24.00%～32.00%；肺炎鏈球菌有近30個血清型對人有致病性，是細(xì)菌性肺炎的主要病原體，尤其易導(dǎo)致兒童感染[3-4]。世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，在全球每年約有160萬人病死于肺炎鏈球菌感染，5歲以下兒童有70～100萬人，其中多數(shù)生活在發(fā)展中國家[5]。在亞太地區(qū)，每小時約有49例兒童死于肺炎球菌性肺炎[6]。早期有效的抗菌藥物治療可顯著降低病死率，因此在臨床工作中，尋找快速、可靠的診斷技術(shù)顯得尤為重要。目前，肺炎鏈球菌肺炎的臨床診斷主要依據(jù)實驗室檢查、影像學(xué)特征和臨床癥狀，確診則必須通過從標(biāo)本中分離出病原菌。肺炎鏈球菌培養(yǎng)鑒定繁瑣、耗時長，且漏檢率高，不能滿足臨床快速診斷的需要。

本研究中采用的免疫層析法，也是目前廣泛用于肺炎鏈球菌診斷的快速方法。其檢測的抗原為C-polysaccharide抗原，是位于細(xì)菌細(xì)胞壁的可溶性C多糖抗原，為肺炎鏈球菌各血清型所共有。由于該檢測方法以尿樣為檢測對象，故又稱為尿抗原檢測法[7]。尿抗原是一種可溶性抗原，在不同患者中的水平差別較大，取決于感染時間、感染的嚴(yán)重程度及機(jī)體產(chǎn)生的抗原量。但是攜帶肺炎鏈球菌的正常兒童體內(nèi)產(chǎn)生的抗原量一般較少[8]。該檢測方法在標(biāo)本收集、儲存和運輸?shù)确矫婢哂休^大的優(yōu)勢，而且檢測結(jié)果不受接受抗菌藥物治療的影響，不僅能夠快速提供診斷依據(jù)，更在抗菌藥物使用方面具有指導(dǎo)意義，為診斷肺炎鏈球菌肺炎提供了快速、有效的輔助診斷方法。

本研究結(jié)果表明，對具有下呼吸道感染癥狀的患兒進(jìn)行尿肺炎鏈球菌檢測的陽性率約為4.55%，對于確定的肺炎鏈球菌感染者陽性率則達(dá)到75.00%。而WBC和CRP增高者則分別達(dá)到25.76%和54.55%，顯著高于免疫層析法，但這兩者缺乏特異性，在其他病原菌感染時亦會升高；并且在對于明確的肺炎鏈球菌感染時的陽性率則與免疫層析法相似。因此，聯(lián)合檢測尿肺炎鏈球菌、WBC和CRP有助于明確診斷小兒下呼吸道感染。但本研究中的檢測陽性率低于龐偉斌等[9]的研究(19.33%)以及李莉等[10]的研究報道(35.29%)，究其原因可能是本研究中納入的研究標(biāo)本量較少，標(biāo)本收集的季節(jié)不同，以及研究對象納入條件的差異等。

綜上，尿肺炎鏈球菌快速檢測技術(shù)聯(lián)合WBC和CRP檢測，有助于臨床醫(yī)生輔助快速診斷鏈球菌感染，指導(dǎo)臨床早期用藥，具有良好的臨床應(yīng)用前景。

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Diagnostic value of combined detection of urinary Streptococcus pneumoniae,WBC and CRP in child lower respiratory tract infection*

ZHANGMei-juan1,QIUSheng-feng1,2△

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,FirstAffiliatedHospitalofNanjingMedicalUniversity,Nanjing,Jiangsu210029,China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,JiangsuProvincialMaternalandChildHealthCareHospital,Nanjing,Jiangsu210036,China)

Objective To study the clinical significance of urinary Streptococcus pneumoniae(SP) detection for the rapid diagnosis of child lower respiratory tract infection.Methods 66 children inpatients in the Jiangsu Provincial Maternal and Child Health Care Hospital from September to October 2014 were collected.The urine samples were collected for conducting the detection of SP antigen C-polysaccharide.At the same time the blood analysis and C-reactive protein(CRP) detection were performed.Results Among 66 children inpatients,the positive rates of urinary SP antigen test,WBC count and CRP were 4.55%,25.76% and 54.55%,respectively.In children patients with definite SP infection,the positive rates of the 3 indexes were similar,up to 75.00%.Conclusion Urinary SP rapid detection technique combined with WBC count and CRP detection conduces to the clinicians to diagnose the SP infection quickly.

urinary Streptococcus pneumoniae; lower respiratory tract infection; immunochromatographic test; WBC; CRP

教育部博士點基金(20123234120018)。

張美娟，女，博士，助理研究員，主要從事病原微生物檢測研究?！?/p>

，E-mail:13813930278@163.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.17.002

A

1672-9455(2015)17-2486-02

2015-03-10

2015-03-25)