牛江秀+++楊雪

[摘要] 目的 探討制備尼莫地平泊洛沙姆188納米膠束的優(yōu)良工藝。 方法 采用乳化-溶劑蒸發(fā)法制備尼莫地平泊洛沙姆188納米膠束，考察影響尼莫地平泊洛沙姆188納米膠束包封率的主要因素，即有機(jī)溶劑的種類、尼莫地平溶液滴加速率、有機(jī)相與水相的體積比以及尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比，并在此基礎(chǔ)上采用正交設(shè)計(jì)優(yōu)化尼莫地平泊洛沙姆188納米膠束的制備工藝。 結(jié)果 尼莫地平泊洛沙姆188納米膠束的制備最優(yōu)處方為尼莫地平滴加速率為0.2 ml/min，有機(jī)相與水相的體積比為1∶5，尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比為1∶3。 結(jié)論 通過(guò)正交試驗(yàn)，能夠獲得尼莫地平泊洛沙姆188納米膠束的最佳制備工藝。

[關(guān)鍵詞] 乳化-溶劑蒸發(fā)法；尼莫地平；包封率；正交試驗(yàn)

[中圖分類號(hào)] R94 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2015）01（a）-0004-04

尼莫地平是臨床上廣泛應(yīng)用的一種鈣離子拮抗劑，脂溶性高，容易透過(guò)血-腦脊液屏障，可與中樞神經(jīng)的特異性受體結(jié)合，通過(guò)降低神經(jīng)元細(xì)胞中鈣離子的濃度而改善腦部血液循環(huán)，增加缺血缺氧細(xì)胞的血液供應(yīng)，對(duì)多種腦血管功能失調(diào)具有治療作用[1-2]。目前，臨床上常用的尼莫地平制劑類型主要有普通片劑、膠囊劑、緩釋片和注射劑等，但口服尼莫地平制劑有較嚴(yán)重的肝臟首關(guān)效應(yīng)，生物利用度較低，且在血漿中藥物的濃度迅速降低，半衰期短[3-4]。由于該藥物不溶于水，所應(yīng)用的注射液均含有較高濃度的乙醇，以達(dá)到增溶的目的[5]，而且，注射劑在應(yīng)用時(shí)需要與葡萄糖或生理鹽水混合后靜脈滴注，應(yīng)用非常不方便。由于尼莫地平必須以1.0～2.0 mg/h的速度緩慢靜脈滴注，滴注10 mg尼莫地平所需時(shí)間最少5 h，而文獻(xiàn)報(bào)道尼莫地平注射劑在與葡萄糖或生理鹽水混合靜脈滴注的過(guò)程中易析出結(jié)晶[6-7]。此外，長(zhǎng)期應(yīng)用含有較高濃度乙醇的制劑會(huì)對(duì)患者的血管產(chǎn)生刺激作用[8]，因而將不溶于水的尼莫地平制成納米膠束，既可提高尼群地平的溶解度，又能避免有機(jī)溶劑如乙醇等的應(yīng)用，安全地進(jìn)行靜脈注射。

泊洛沙姆188是聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯（PEO-PPO-PEO）泊洛沙姆188。由于泊洛沙姆188的物理性質(zhì)溫和、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定的特點(diǎn)，其不僅在栓劑、乳劑、片劑和凝膠劑等一些傳統(tǒng)的劑型中有著廣泛的應(yīng)用，還可以形成膠束增加難溶性藥物的溶解度，增加此類藥物的穩(wěn)定性，控制此類藥物的釋放速度，并且還具有約束外排泵的外排作用，促進(jìn)機(jī)體對(duì)藥物的吸收[9-10]。此外，泊洛沙姆188對(duì)于治療血細(xì)胞凝聚引起的血管阻塞有一定作用[11]。研究表明，泊洛沙姆188在藥物穿越血-腦脊液屏障的過(guò)程中亦起著重要的作用，它可以通過(guò)不同的作用機(jī)制使藥物靶向入腦，增加藥物在機(jī)體腦內(nèi)的生物利用度，為藥物能夠腦部靶向提供了新的思路和策略[12]。

1 儀器與試藥

電子分析天平FA104B（北京市北分瑞利分析儀器制造廠）；集熱式恒溫磁力攪拌器DF-101D（上海市博迅醫(yī)療設(shè)備制造廠）；電熱鼓風(fēng)干燥箱GZX-9030 MBE（鞏義予華儀器制造廠）；紫外可見分光光度計(jì)UV-2100（上海市越平科學(xué)儀器制造廠）。尼莫地平（陜西西岳制藥公司）；泊洛沙姆188（陜西西岳制藥公司）；無(wú)水乙醇（分析純、宿州化學(xué)試劑公司）；氯仿（分析純、西隴化工股份公司）；乙醚（分析純、上海市中試化工公司揚(yáng)州市滬寶化學(xué)試劑有限公司）；丙酮（分析純、西隴化工股份公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 尼莫地平泊洛沙姆188納米膠束的制備

采用乳化-溶劑蒸發(fā)法制備尼莫地平泊洛沙姆188納米膠束[13-14]，分別將尼莫地平和泊洛沙姆188溶于有機(jī)溶劑和水中，在磁力攪拌下，將尼莫地平溶液逐滴加入泊洛沙姆188水溶液中，聚合物膠束形成后，減壓蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，得到含有藥物的膠束。

2.2 包封率的測(cè)定

依據(jù)尼莫地平不溶于水的特性和納米脂質(zhì)體粒徑微小等特點(diǎn)，采用過(guò)濾法測(cè)定其包封率[15]。用紫外可見分光光度法測(cè)定待測(cè)液在237 nm處的紫外吸光度，代入尼莫地平的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算包封率。包封率（%）=（尼莫地平投藥量-游離的尼莫地平量）/尼莫地平投藥量×100%。

2.3 尼莫地平處方的單因素試驗(yàn)

2.3.1 有機(jī)溶劑種類的考察 固定尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比為1∶5，有機(jī)相與水相的體積比為1∶3，分別用氯仿、無(wú)水乙醇、乙醚及丙酮作為有機(jī)相溶解尼莫地平，考察有機(jī)溶劑對(duì)包封率的影響。結(jié)果顯示，采用三氯甲烷作為有機(jī)溶劑時(shí)，包封率最高（圖1）。

圖1 有機(jī)溶劑種類對(duì)包封率的影響

2.3.2 尼莫地平溶液滴加速率的考察 固定尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比為1∶5，采用三氯甲烷作為有機(jī)相溶解尼莫地平，有機(jī)相與水相的體積比為1∶3，尼莫地平溶液的滴加速率分別為1.0、0.8、0.6、0.4、0.2 ml/min，考察滴加速率對(duì)包封率的影響。結(jié)果顯示，隨著尼莫地平溶液滴加速率的減小，包封率有增加的趨勢(shì)，當(dāng)?shù)渭铀俾蕼p小至0.6時(shí)，繼續(xù)減小滴加速率，包封率變化不大（圖2）。

圖2 尼莫地平溶液滴加速率對(duì)包封率的影響

2.3.3 有機(jī)相與水相體積比的考察 固定尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比為1∶5，選用三氯甲烷作為有機(jī)溶劑，尼莫地平溶液的滴加速率為0.6 ml/min，有機(jī)相與水相的體積比分別為1∶1、1∶3、1∶5、1∶7和1∶9，考察有機(jī)相與水相的體積比對(duì)包封率的影響。結(jié)果顯示，當(dāng)有機(jī)相與水相的體積比由1∶1逐漸減小時(shí)，尼莫地平的包封率逐漸增加，當(dāng)有機(jī)相與水相的體積比減小到一定值時(shí)，尼莫地平的包封率達(dá)到最大，此后減小有機(jī)相與水相的體積比，尼莫地平的包封率逐漸降低（圖3）。

圖3 有機(jī)相與水相的體積比對(duì)包封率的影響

2.3.4 尼莫地平與泊洛沙姆188質(zhì)量比的考察 固定有機(jī)相與水相的體積比為1∶5，選用三氯甲烷作為有機(jī)溶劑，尼莫地平溶液的滴加速率為0.6 ml/min，尼莫地平與泊洛沙姆188的比例分別為1∶1、1∶3、1∶5、1∶7和1∶9，考察尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比對(duì)包封率的影響。結(jié)果顯示，尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比對(duì)包封率的影響較為明顯，隨著尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比的逐漸增加，尼莫地平的包封率呈逐漸增大的趨勢(shì)，當(dāng)尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比達(dá)到一定值時(shí)，尼莫地平的包封率達(dá)到最大，此后不再隨著尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比的增加而增加，而是逐漸減?。▓D4）。

圖4 尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比對(duì)包封率的影響

2.4 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化處方

2.4.1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化處方 以三氯甲烷為有機(jī)相，選用尼莫地平溶液滴加速率（A）、有機(jī)相與水相的體積比（B）、尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比（C）3個(gè)因素，每個(gè)因素3個(gè)水平（表1），以尼莫地平的包封率為考察指標(biāo)，按L9（34）正交表設(shè)計(jì)方案進(jìn)行實(shí)驗(yàn)（表2），優(yōu)化處方。

采用乳化-溶劑蒸發(fā)法制備尼莫地平泊洛沙姆188納米膠束。在3因素3水平的L9（34）正交實(shí)驗(yàn)中，以包封率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，確定尼莫地平泊洛沙姆188納米膠束的最優(yōu)制備處方。由表2可知，影響尼莫地平包封率大小的因素依次為：有機(jī)溶劑種類>有機(jī)相和水相的體積比>尼莫地平和泊洛沙姆188的質(zhì)量比。其中有機(jī)溶劑的種類對(duì)尼莫地平的包封率的影響最顯著。優(yōu)化處方為A3B2C1，即尼莫地平泊洛沙姆188納米膠束的制備最優(yōu)處方為尼莫地平滴加速率為0.2 ml/min，有機(jī)相與水相的體積比為1∶5，尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比為1∶3。

2.4.2 優(yōu)化處方工藝的驗(yàn)證試驗(yàn) 為進(jìn)一步考察正交優(yōu)化試驗(yàn)所得最佳處方的合理性和穩(wěn)定性，按最優(yōu)處方進(jìn)行3次試驗(yàn)，得到膠束的包封率分別為85.7%、84.9%和85.3%。因此，三次試驗(yàn)測(cè)得的尼莫地平的包封率相差不大，雖然結(jié)果在一定的范圍內(nèi)有所波動(dòng)，但仍趨于穩(wěn)定，結(jié)果的輕微波動(dòng)可能是試驗(yàn)的偶然誤差造成的，并不影響試驗(yàn)的準(zhǔn)確性，即正交試驗(yàn)所得的最佳處方是合理的，測(cè)得的包封率大小也是穩(wěn)定的。

3 討論

本研究以包封率為考察指標(biāo)，分別考察了氯仿、無(wú)水乙醇、丙酮、乙醚對(duì)尼莫地平泊洛沙姆188納米膠束包封率的影響。研究發(fā)現(xiàn)選用丙酮、乙醚和無(wú)水乙醇作為有機(jī)溶劑時(shí)，由于溶劑的親水性較強(qiáng)，疏水性藥物難以溶解在其中，導(dǎo)致藥物的析出而使膠束包封率降低。改變有機(jī)溶劑的性質(zhì)，采用較強(qiáng)疏水性的有機(jī)溶劑即三氯甲烷，疏水性藥物尼群地平在其中的溶解度較大，可以促進(jìn)藥物向膠束的疏水性芯核“微型藥物庫(kù)”中擴(kuò)散，因此采用疏水性溶劑三氯甲烷時(shí)膠束的包封率最高。

在制備的過(guò)程中，隨著尼莫地平溶液滴加速率的增加，包封率下降，可能是因?yàn)檩^快的滴加速率使尼莫地平來(lái)不及進(jìn)入膠束疏水性內(nèi)核而沉淀析出，隨著滴加速率的減小，尼莫地平有足夠的時(shí)間被包裹入膠束，因而包封率增加。

隨著有機(jī)相和水相比例的增加，尼莫地平的包封率呈先增加后減小的趨勢(shì)，可能是因?yàn)殡S著水相的增加，泊洛沙姆188在水中的濃度逐漸增加，所形成的疏水核數(shù)量也隨之增加，對(duì)藥物的包封有促進(jìn)作用，但當(dāng)水相的體積過(guò)大時(shí)，因疏水性藥物尼群地平在水中的濃度降低而析出，反而使膠束的包封有所降低。

隨著尼莫地平與泊洛沙姆188的質(zhì)量比的逐漸增加，尼莫地平的包封率呈先增加后減小的趨勢(shì)。開始階段隨著尼莫地平量的增加，包封率上升，可能是因?yàn)椴绰迳衬?88膠束疏水性內(nèi)核對(duì)尼莫地平的包裹未達(dá)飽和；而隨后包封率的下降，原因可能是由于尼莫地平在膠束疏水性內(nèi)核的包封有一定的限度，當(dāng)達(dá)到飽和時(shí)，多余的尼莫地平由于具有高度的疏水性而形成大的沉淀析出，由于這些沉淀的聚集速度明顯大于尼莫地平被泊洛沙姆188包裹的速度，繼而產(chǎn)生黃色藥物沉淀，因此導(dǎo)致包封率顯著降低。

本研究采用乳化-溶劑蒸發(fā)法制備膠束，磁力攪拌器的轉(zhuǎn)速也會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，攪拌速度過(guò)慢或者過(guò)快，都會(huì)使尼莫地平的包封率降低。

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（收稿日期：2014-09-04 本文編輯：郭靜娟）