王國海，宋　莉，楊瑞瑞

(陜西省食品藥品檢驗所,陜西 西安　710065)

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用離子色譜法研究飲片中殘留二氧化硫在制劑過程中的變化

王國海，宋莉，楊瑞瑞

(陜西省食品藥品檢驗所,陜西 西安710065)

摘要：目的采用離子色譜法考察飲片中二氧化硫在牛黃上清丸制劑過程中的變化，為評價制劑安全性提供數(shù)據(jù)支撐。方法將飲片及自制樣品經(jīng)水蒸汽蒸餾，3%雙氧水氧化吸收后，進離子色譜儀分析，測定其殘留量。結(jié)果在1～30 mg·L-1濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系(r=0.999 9)；平均收率(n=9)為95.5%，RSD為3.0%。結(jié)論飲片中殘留二氧化硫在其與煉蜜加熱混合的過程中有一定程度的減少，但有部分伴隨原粉轉(zhuǎn)移到生藥粉制劑中。

關(guān)鍵詞：牛黃上清丸；二氧化硫；離子色譜法(IC)

牛黃上清丸由19味藥的原粉加煉蜜制成[1]，具有清熱瀉火散風(fēng)止痛的功效[1]。處方中的白芷、當(dāng)歸、白芷、菊花等中藥材炮制時常用硫磺熏蒸以達到防蛀蟲、霉變，同時提升視覺感官效果。藥材中殘留的二氧化硫在以原粉入藥的制劑過程中是否會隨粉碎、混勻及加煉蜜而減少值得我們?nèi)ヌ剿鳌榇?，我們設(shè)計了合理的實驗方案，考察飲片中二氧化硫在制劑制備過程中的變化[2-3]，為飲片安全、規(guī)范炮制提供參考依據(jù)，同時為評價制劑安全性提供數(shù)據(jù)支撐。

1儀器、試藥及藥材

1.1儀器萬通離子色譜儀(型號761)；電導(dǎo)檢測器；水蒸汽蒸餾裝置[4]；超純水系統(tǒng)。

1.2試藥亞硫酸鈉(Na2SO3)為優(yōu)級醇(純度99.7%)，碳酸氫鈉(NaHCO3)、硫代硫酸鈉(Na2S2O3)、碳酸鈉(Na2CO3)、EDTA、碘(I2)、均為分析純；實驗用去離子水(電阻率為18.2ΜΩ)；硫酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液購自中國計量科學(xué)研究院(編號0942，標(biāo)示值為 1 000 mg·L-1)。

1.3藥材荊芥穗、黃芩、薄荷、梔子、連翹、白芷、黃連、黃柏、川芎、大黃、當(dāng)歸、菊花、地黃、冰片、桔

梗、赤芍、甘草、人工牛黃、石膏原料藥材及煉蜜均由牛黃上清系列生產(chǎn)廠家提供。

2方法與結(jié)果

2.1標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的制備取硫酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用去離子水稀釋成濃度分別為1、2、5、10、20、30 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

2.2供試品溶液的制備取相當(dāng)于2丸牛黃上清丸的藥粉或(制備)樣品，精密稱定，置水蒸汽蒸餾裝置的樣品瓶中，加脫氧的去離子水20 mL使其潤濕、分散，在100 mL量瓶中加入20 mL 3%的雙氧水作為接收液，吸取濃鹽酸5 mL快速加入樣品瓶，迅速塞緊裝置，進行蒸餾，至接收瓶中液體接近90 mL時，停止蒸餾，取下接收瓶，用去離子水洗滌尾接管將其并入量瓶中并定容至刻度，搖勻，放置1 h，作為供試品溶液[5-6]。

2.3色譜條件陰離子分析色譜柱：Metrosep A Supp 7 (250 mm×4 mm)；淋洗液：5 mmol·L-1碳酸鈉和5 mmol·L-1碳酸氫鈉混合溶液；等度淋洗；流速：0.8 mL·min-1；進樣量：20 μL ；電導(dǎo)檢測器。

2.4線性關(guān)系將2.1項下各標(biāo)準(zhǔn)系列溶液按上述色譜條件進樣分析，以硫酸根的峰面積與其濃度分別任縱坐標(biāo)和橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為：Y=13.924X-4.527，r=0.999 9，結(jié)果表明，硫酸根在1～30 mg·L-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5精密度試驗取同一份標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，按照上述色譜條件連續(xù)進樣6次，得硫酸根峰面積RSD為0.62%。

2.6穩(wěn)定性試驗取同一供試品溶液，按上述色譜條件分別在0、2、4、8、12、24 h進樣，測定硫酸根峰面積，其RSD為0.88% ，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7重復(fù)性試驗取白芷藥材細(xì)粉，按“2.2” 項下供試品溶液制備方法平行制備6份供試液，按上述測定方法測定，其平均值為138.2 mg·kg-1，RSD為1.3%。

2.8回收率試驗精密稱得無水亞硫酸鈉82.27 mg置100 mL量瓶中，用0.05%EDTA溶解并定容至刻度，用碘量法對其進行標(biāo)定[7]，結(jié)果為為0.408 3 mg·L-1(以SO2計)。取白芷藥材細(xì)粉適量，精密稱取9份，每份約6.0 g，將其均分為3組，每組依次精密加入上述亞硫酸鈉溶液0.8、1、1.2 mL，同供試品溶液的制備及測定操作，計算回收率，結(jié)果見表1。

圖1　色譜圖

2.9樣品處理

2.9.1樣品制備將上述19味藥按牛黃上清丸處方量混合，粉細(xì)，過篩，混勻，分A、B、C、D、E五組試驗，每組取樣6份，每份約10 g， A組用于測定混合藥材中二氧化硫殘留量；將B組置于90℃的烘箱加熱1 h后，用于測定其二氧化硫殘留量； 將C、D、E三組中每份樣加入13.0 g煉蜜，于90℃加熱充分混合，時間分別為30、60、90 min，再測定其二氧化硫殘留。

2.9.2樣品溶液的制備取上述相當(dāng)于2丸牛黃上清丸的量的粉末或樣品，按“2.2” 項下供試品溶液制備方法制備供試液并按上述測定方法測定，結(jié)果見表2。

由此可見：在牛黃上清丸的制劑過程中，飲片中二氧化硫殘留的損失率并不是很高，加熱過程對二氧化硫損失的影響也很有限。因此，對制劑中二氧化硫殘留量的監(jiān)測來對飲片中二氧化硫殘留作評估并沒有很強的相關(guān)性。

表2　二氧化硫?qū)嶒灆z測結(jié)果

3討論

通過模擬牛黃上清丸制劑工藝過程，考察飲片中二氧化硫在整個制劑過程中的變化發(fā)現(xiàn)：飲片中殘留二氧化硫在其與煉蜜加熱混合的過程并非大量減少，而是伴隨原粉轉(zhuǎn)移到原粉入藥的制劑中，但由于部分飲片在處方中所占比例較小(如牛黃上清丸中白芷、桔梗、當(dāng)歸等常用硫磺熏蒸的藥材在處方中所占比例依次為16/622、16/622、50/622)，從而致使制劑中二氧化硫的含量較小。因此符合二氧化硫殘留限度要求的制劑，其部分原藥材殘留二氧化硫嚴(yán)重超標(biāo)仍有一定的可能性，通過對制劑中二氧化硫殘留監(jiān)測來對飲片中二氧化硫殘留進行評估并不存在很強的相關(guān)性。因此，加強對藥材及飲片中二氧化硫的監(jiān)測，規(guī)范飲片炮制，整頓飲片市場比控制制劑中二氧化硫殘留更有意義。

硫磺熏蒸對不同藥材的成分、藥性、藥效、歸經(jīng)等是否有影響，有多大影響，是否影響制劑的藥理作用、療效等目前尚不清楚，因此應(yīng)制定更加嚴(yán)格的二氧化硫殘留限度標(biāo)準(zhǔn)，促使企業(yè)從源頭上控制二氧化硫殘留問題，二者相輔相成為藥品的安全性提供保障。

檢測限按3倍信噪比計算，定量限以10倍信噪比計算。

參考文獻:

[1]國家藥典委員會.中國藥典(一部)[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：191.

[2]羅建民，王愛霞，陳俊宇．離子色譜法測定葡萄干中二氧化硫殘留量 [J].檢測分析，2014，35(4)：90-92.

[3]陳秀杰，譚倩，余濤．離子色譜法測定食品中二氧化硫與傳統(tǒng)化學(xué)法的比較 [J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2014，24(1)：38-43.

[4]袁向輝，喬蓉霞，劉海靜，等．菊花中二氧化硫殘留兩測定方法研究 [J].安徽醫(yī)藥，2011，15(1)：32-33.

[5]喬蓉霞，楊瑞瑞，劉海靜，等.離子色譜法檢測牛黃上清丸中二氧化硫殘留量 [J].藥物鑒定，2011,20(13)：18-19.

[6]施秀杰，衷明華．氧瓶燃燒-離子色譜法測定中草藥中硫含量 [J].江西化工，2014(2)：70-72.

[7]國家藥典委員會.中國藥典(二部)[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄183.

(收稿日期：2014-04-13，修回日期：2014-07-08)

基金項目：陜西省中醫(yī)管理局科研課題(No 13-ZY021)

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2015.02.019