戎秀格　盧玉娟　才淑芳　徐　彪　王金權(quán)　李　茜　彭桂平　田　衛(wèi)(唐山市工人醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北　唐山　063000)

葉酸、VB12對(duì)腦梗死患者同型半胱氨酸、氧化型低密度脂蛋白抗體水平的影響

戎秀格盧玉娟才淑芳徐彪王金權(quán)李茜彭桂平田衛(wèi)
(唐山市工人醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北唐山063000)

〔摘要〕目的觀察使用葉酸、VitB12治療后，腦梗死患者同型半胱氨酸(Hcy)和氧化型低密度脂蛋白抗體(oxLDL-Ab)的變化。方法90例腦梗死患者及30例健康對(duì)照組血清Hcy、oxLDL-Ab、葉酸和VitB12水平變化;再取接受維生素干預(yù)治療的腦梗死患者25例(Hcy＞15 μmol/L)，同時(shí)口服葉酸5 mg，VitB12 25 μg，每日3次，治療4 w后復(fù)查血清上述指標(biāo)的變化。結(jié)果與對(duì)照組比較，腦梗死患者血清Hcy、oxLDL-Ab水平明顯升高;血清VitB12水平明顯降低(P＜0.05)?？诜~酸、VitB12干預(yù)治療4 w后血清Hcy水平明顯下降，但oxLDL-Ab的水平無(wú)明顯變化。結(jié)論腦梗死患者給予葉酸、VB12干預(yù)尚未顯示可以預(yù)防腦卒中。

〔關(guān)鍵詞〕腦梗死;同型半胱氨酸(Hcy) ;氧化型低密度脂蛋白抗體(oxLDL-Ab) ;葉酸; VitB12

第一作者:戎秀格(1967-)，女，主任技師，碩士，碩士生導(dǎo)師，主要從事實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)和生化檢驗(yàn)研究。

高同型半胱氨酸(Hcy)血癥(HHcy)是缺血性腦血管病的一個(gè)重要因素〔1，2〕。影響血清Hcy水平的因素主要有遺傳和營(yíng)養(yǎng)因素二方面，而營(yíng)養(yǎng)因素因其可控性顯得尤為重要。由于缺血性腦卒中是由多種不同病因?qū)е碌囊粋€(gè)綜合征，病因不同，治療方案也不同，業(yè)已證明高Hcy是缺血性腦卒中病因之一〔3〕;氧化型低密度脂蛋白抗體(oxLDL-Ab)水平可能與動(dòng)脈粥樣硬化的階段相關(guān)〔4〕。本文旨在觀察葉酸、VitB12治療后腦梗死患者Hcy和oxLDL-Ab的變化。

1　資料與方法

1.1一般資料我院神經(jīng)內(nèi)科住院腦梗死患者90例，男48例，女42例;平均年齡(58.2±9.8)歲。均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)第四次腦血管病專題學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)。均進(jìn)行頭部CT或MRI檢查。排除標(biāo)準(zhǔn):腦出血、癌癥、肝硬化、白血病、甲狀腺疾病、銀屑病、接受器官移植、腎透析、嚴(yán)重營(yíng)養(yǎng)不良及免疫系統(tǒng)疾病;近1個(gè)月內(nèi)服用多巴胺類藥物、苯妥英鈉、抗癲癇藥物、卡馬西平、避孕藥、氨甲蝶呤、抗氧化劑等可影響Hcy代謝的藥物。健康對(duì)照組30例，男19，女11例;平均年齡(60.1±8.5)歲;分別測(cè)定血清葉酸、VitB12、Hcy、oxLDL-Ab。取接受維生素干預(yù)治療的腦梗死患者25例(Hcy＞15 μmol/L)。同時(shí)口服葉酸5 mg，VitB12 25 μg，3次/d，治療4 w后復(fù)查血漿Hcy、oxLDL-Ab、葉酸和VitB12水平變化，腦梗死常規(guī)治療方法相同。

1.2測(cè)定方法早晨空腹采血送檢血清Hcy，測(cè)定采用循環(huán)酶法在日立全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定;測(cè)定葉酸和VitB12采用化學(xué)發(fā)光法在雅培i2000上進(jìn)行; oxLDL-Ab的測(cè)定應(yīng)用美國(guó)TSZ公司的試劑，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法定量測(cè)定。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2　結(jié)果

與對(duì)照組比較，腦梗死組血清Hcy、oxLDL-Ab水平明顯升高;而血清VitB12水平明顯降低(均P＜0.05)。見表1。口服葉酸、VitB12干預(yù)治療4 w后血清Hcy水平顯著降低，而VitB12和葉酸水平則明顯升高(P＜0.05) ;但oxLDL-Ab的水平無(wú)明顯變化(P＞0.05)。見表2。

表1　腦梗死組和健康對(duì)照組血清Hcy、oxLDL-Ab、葉酸和VitB12水平比較(±s)

表1　腦梗死組和健康對(duì)照組血清Hcy、oxLDL-Ab、葉酸和VitB12水平比較(±s)

與健康對(duì)照組比較: 1) P＜0.05

組別　n　　葉酸(nmol/L) VitB12 (pmol/L) Hcy (μmol/L) oxLDL-Ab (μg/L)腦梗死組　90 15.35±5.86 421.8±420.31)17.2±7.51)114.8±1021)健康對(duì)照組30 16.04±6.23 571.9±410.8　 10.1±6.3　 8.3±24.8

表2　腦梗死患者葉酸和VitB12治療后各指標(biāo)的變化(±s，n=25)

表2　腦梗死患者葉酸和VitB12治療后各指標(biāo)的變化(±s，n=25)

與治療前比較: 1) P＜0.05

組別　　葉酸(nmol/L) VitB12 (pmol/L) Hcy (μmol/L) oxLDL-Ab (μg/L)治療前　12.45±5.76 277.75±147.4　 20.9±5.2　 134.7±110.8治療后　36.12±8.151)456.2±342.31)10.8±8.421)　133.6±114.2

3　討論

臨床上所指的Hcy是蛋氨酸代謝的中間產(chǎn)物，分為游離型和蛋白結(jié)合型;血清Hcy 70％～80％是蛋白結(jié)合型，Hcy可以結(jié)合血紅蛋白、γ-球蛋白、胰蛋白酶、纖維蛋白原、轉(zhuǎn)鐵蛋白、白蛋白等，其中Hcy-N-白蛋白為最多;游離型則主要以二硫同型半胱氨酸和以二硫鍵結(jié)合的Hcy化合物形式存在〔5〕。

目前大多數(shù)人認(rèn)為HHCY引起腦梗死原因涉及血管壁、血小板和凝血因子三個(gè)方面。血漿中Hcy-N-pro約占體內(nèi)tHcy 的25％。Hcy-N-pro通過(guò)氧化對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞造成損傷，引起自身免疫反應(yīng)，激活血管炎癥反應(yīng)釋放炎癥因子，血小板在內(nèi)皮細(xì)胞損傷處集聚，加速動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成〔6，7〕。纖維蛋白原Hcy(N-Hcy-纖維蛋白原)促進(jìn)膠原的合成，促進(jìn)動(dòng)脈硬化的形成〔8～10〕。HHcy可誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞斑片狀脫落，影響血管壁彈性，促進(jìn)氧自由基和過(guò)氧化氫的生成，加強(qiáng)凝血因子Ⅶ和Ⅵ的活性，抑制蛋白C的活性，阻止組織型纖溶酶原激活物結(jié)合到內(nèi)皮細(xì)胞〔11〕;從而促進(jìn)腦梗死發(fā)生。

高血壓和HHcy均是腦梗死重要危險(xiǎn)因素，兩者均可增加動(dòng)脈硬化發(fā)生率。高血壓伴血Hcy升高被定義之為“H”型高血壓〔12〕。國(guó)內(nèi)有學(xué)者研究〔13〕表明，補(bǔ)充葉酸和B族維生素用于二級(jí)預(yù)防并不能降低腦梗死的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。因此控制H型高血壓預(yù)防腦梗死應(yīng)分兩步走:首先一級(jí)預(yù)防應(yīng)積極給予補(bǔ)充葉酸和B族維生素;二級(jí)預(yù)防以控制血壓為主。

Hankey等〔14〕報(bào)道維生素干預(yù)治療可以降低血清Hcy水平，但并不能阻止腦卒中病人的神經(jīng)功能惡化。Lee等〔15〕報(bào)道多元回歸分析未能顯示Hcy與腦卒中預(yù)防或腦卒中治療持續(xù)時(shí)間之間的線性關(guān)系;發(fā)現(xiàn)對(duì)于服用葉酸結(jié)合維生素B族的男性患者對(duì)初級(jí)腦卒中的預(yù)防有益。

He等〔16〕報(bào)道725例男性腦卒中事件，其中包括455例缺血性，125例出血性和145例未知類型的腦卒中歷經(jīng)14年的隨訪記錄，對(duì)主要的生活方式和飲食因素調(diào)整后，攝入的葉酸使缺血性但不是出血性腦卒中風(fēng)險(xiǎn)顯著降低。攝入維生素B12與缺血性腦卒中風(fēng)險(xiǎn)呈負(fù)相關(guān)。

oxLDL制備方法常用的有Cu-LDL、MDA-LDL、輕微氧化LDL;所以產(chǎn)生的oxLDL-Ab也不同。色譜分析顯示，oxLDL-Ab分為IgM、IgG、IgA三大類，又以IgM、IgG為主，IgG主要是IgG1類和IgG3類，這些抗體主要識(shí)別MDA修飾的位點(diǎn)〔17〕。還有研究指出oxLDL-Ab其中IgG型主要是IgG2和IgG3，并且在動(dòng)脈粥樣硬化患者和正常健康人中均可以存在〔18〕; Virella等〔19〕用親和層析的方法以Cu2+-oxLDL純化分離特異性抗體，發(fā)現(xiàn)其同種型依次為: IgG1＞IgM＞IgG3＞IgG2＞IgA＞IgG4。有報(bào)道〔20〕認(rèn)為oxLDL-Ab可能在疾病早期出現(xiàn)，而血管損傷后血栓一旦形成，抗體的作用就不再明顯了。

綜上，葉酸、維生素B12干預(yù)治療確實(shí)可以降低Hcy水平，但并未能引起oxLDL-Ab水平的變化，尚未顯示出可以預(yù)防腦卒中。還需進(jìn)一步研究Hcy和oxLDL的不同抗體在腦梗死各個(gè)階段的變化。

4　參考文獻(xiàn)

1 Sacco RL，Roberts JK，Jacobs BS.Homocysteine as a risk factor for ischemic stroke; an epidemiological story in evolution〔J〕．Neuroepidemiology，1998; 17(4) : 167-73.

2 Houston PE，Rana S，Sekhsaria S，et al.Homocysteine in sickle cell disease: relationship to stroke〔J〕．Am J Med，1997; 103(6) : 192-6.

3 Willnek WA，Ludwin GM，Lennar ZM，et al.High-normal serum homocysteine concentrations are associated with an increased risk of early atherosclerotic carotid artery wall lesions in healthy subjects〔J〕．Hypertension，2000; 18(4) : 425-30.

4 Frostegard J，Nilsson J，Haegerstrand A，et al.Oxidized low density lipoprotein induces differentiation and adhesion of human monocytes and the monocytic cell line U937〔J〕．Proc Natl Acad Sci USA，1990; 87(3) : 904-8.

5 Ueland PM.Homocysteine species as components of plasma redox thiol status〔J〕．Clin Chem，1995; 41(2) : 340-2.

6Jakubowski H.Pathophysiological consequences of homocysteine excess 〔J〕．J Nutr，2006; 136(6 Suppl) : 1741S-9S.

7 Bogdanski P，Pupek-Musialik D，Dytfeld J，et al.Plasma homocysteine is a determinant of tissue necrosis factor-α in hypertensive patients〔J〕．Biomed Pharmacother，2008; 62(4) : 360-5.

8 Undas A，Brozek J，Jankowski M，et al.Plasma homocysteine affects fibrin clot permeability and resistance to lysis in human subjects〔J〕．Arterioscler Thromb Vasc Biol，2006; 26(6) : 1397-404.

9 Sauls DL，Lockhart E，Warren ME，et al.Modification of fibrinogen by homocysteine thiolactone increases resistance to fibrinolysis: a potential mechanism of the thrombotic tendency in hyperhomocysteinemia〔J〕．Biochemistry，2006; 45(8) : 2480-7.

10 Ferretti G，Bacchetti T，Moroni C，et al.Effect of homocysteinylation of low density lipoproteins on lipid peroxidation of human endothelial cells 〔J〕．J Cell Biochem，2004; 92(6) : 351-60.

11Barbe F，Klein M，Chango A.Homocysteine folate vitamin B12 and transcobalamins in patients undergoing successive hypo and hyperthyroid states〔J〕．J Clin Endocrinol Metab，2001; 86(4) : 1845-6.

12 El-Khairy L，Ueland PM，Refsum H，et al.Plasma total cysteine as a risk factor for vascular disease: the European concerted action project〔J〕．JAMA，2001; 103(21) : 2544-9.

13任春娟，張旭東，張毅，等.腦梗死伴H型高血壓的臨床特征〔J〕．中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志，2012; 15(8) : 5-8．

14 Hankey GJ，F(xiàn)ord AH，Yi Q，et al.Effect of B vitamins and lowering homocysteine on cognitive impair ment in patients with previous stroke or transient ischemic attack: a prespecified secondary analysis of a randomized，placebo-controlled trial and meta-analysis〔J〕．Stroke，2013; 44 (6) : 2232-9.

15 Lee M，Hong KS，Chang SC，et al.Saver efficacy of homocysteine-lowering therapy with folic acid in stroke prevention: a meta-analysis〔J〕．Stroke，2010; 41(6) : 1205-12.

16 He K，Merchant A，Rimm ED．Folate，Vitamin B6 and B12 Intakes in relation to risk of stroke among men〔J〕．Stroke，2004; 35: 169-74．

17 Galkina E，Ley K.Immune and inflammatory mechanisms of athereselerosis〔J〕．Ann Rev Immunol，2009; 27: 165-9.

18 Hamann GF.Unriddling the role of matrix metallopro-teinases in human cerebral stroke〔J〕．Stroke，2003; 34(1) : 40.

19 Virella G，Koskinen S，Krings G，et al.Immunochemical_characterization of purified human oxidized low-densitylipoprotein antibodies〔J〕．Clin Immunol，2000; 95(2) : 135-44.

20 Carr AC，Zhu BZ，F(xiàn)rei B.Potential antiatherogenic mechanisms of ascorbate(vitaminC) and alpha-tocoPherol (vitaminE)〔J〕．Circ Res，2000; 87(5) : 349-54.

〔2014-05-19修回〕

(編輯苑云杰)

基金項(xiàng)目:河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題計(jì)劃(20130669)

〔中圖分類號(hào)〕R749

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2015) 16-4527-02;

doi:10.3969/j.issn.1005-9202.2015.16.046