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        乳腺癌患者血清HER-2/neu濃度與組織HER-2表達(dá)水平的相關(guān)性

        2015-03-02 02:15:40周愛清陳志軍孫正魁黃傳生
        實(shí)用癌癥雜志 2015年4期
        關(guān)鍵詞:化學(xué)發(fā)光陽(yáng)性率乳腺

        周愛清 陳志軍 孫正魁 黃傳生

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        乳腺癌患者血清HER-2/neu濃度與組織HER-2表達(dá)水平的相關(guān)性

        周愛清陳志軍孫正魁黃傳生

        作者單位:330029 江西省腫瘤醫(yī)院

        【摘要】目的探討化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)可手術(shù)乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD濃度與組織HER-2表達(dá)水平的相關(guān)性。方法采用西門子化學(xué)發(fā)光儀檢測(cè)2012年12月至2013年12月收治的84例可手術(shù)乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD水平,并采用同期的58例乳腺良性病變患者及56例健康體檢女性作為對(duì)照;同時(shí)對(duì)84例可手術(shù)乳腺癌患者進(jìn)行組織HER-2表達(dá)的檢測(cè)。結(jié)果可手術(shù)乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD水平及陽(yáng)性率分別為(15.56±6.79)ng/ml、19.05%,明顯高于乳腺良性病變患者的(6.21±3.21)ng/ml、0.00%,及健康體檢者的(5.13±2.25)ng/ml、0.00%,P均<0.05。34例組織HER-2表達(dá)陽(yáng)性的可手術(shù)乳腺癌中有14例血清HER-2/neu陽(yáng)性,陽(yáng)性符合率為41.2%;50例組織HER-2表達(dá)陰性的可手術(shù)乳腺癌中有48例血清HER-2/neu陰性,陰性符合率為96.0%;血清HER-2/neu水平與組織HER-2表達(dá)狀態(tài)具有較好的一致性,(kappa=0.406,P<0.05)。結(jié)論化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)可手術(shù)乳腺癌患者血清HER-2/neu濃度與組織HER-2表達(dá)水平具有較好的一致性。因此,乳腺癌患者在系統(tǒng)治療期間,可通過(guò)化學(xué)發(fā)光法動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)患者血清HER-2/neu ECD水平,可彌補(bǔ)組織HER-2檢測(cè)的不足,在乳腺癌隨訪、療效監(jiān)測(cè)尤其是用Herceptin治療后的療效監(jiān)測(cè)中發(fā)揮其獨(dú)到作用。

        【關(guān)鍵詞】乳腺癌;化學(xué)發(fā)光法;血清;HER-2/neu;免疫組化;熒光原位雜交

        (ThePracticalJournalofCancer,2015,30:479~481)

        人類表皮生長(zhǎng)因子受體-2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)基因是一種原癌基因,由具有酪氨酸激酶活性的胞質(zhì)區(qū)、跨膜區(qū)及胞外域(extracellular domain,ECD)組成。目前臨床多采用免疫組化(IHC)和熒光原位雜交(FISH)判斷組織HER-2表達(dá)水平,但這些方法有流程繁瑣復(fù)雜、靈敏度及特異性較差等缺點(diǎn),且對(duì)于晚期無(wú)法取得實(shí)體瘤樣本的患者,IHC和FISH均無(wú)法檢測(cè)。有研究表明,HER-2/neu的細(xì)胞外區(qū)(ECD)可脫離進(jìn)入血清,形成游離的HER-2/neu蛋白,稱血清HER-2/neu[1]。血清HER-2/neu檢測(cè)具有簡(jiǎn)單、方便、定量及動(dòng)態(tài)觀察等優(yōu)點(diǎn),可以監(jiān)控治療效果、預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)或提供乳腺癌轉(zhuǎn)移時(shí)HER-2狀態(tài)的實(shí)時(shí)評(píng)估[2]。本研究通過(guò)化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)可手術(shù)乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD水平,對(duì)其與組織HER-2表達(dá)水平的相關(guān)性進(jìn)行探討,現(xiàn)報(bào)告如下。

        1材料與方法

        1.1一般資料

        收集我院2012年12月至2013年12月可手術(shù)乳腺癌患者84例,所有病例均經(jīng)病理檢查證實(shí)為浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌,均為女性;年齡26~71歲,平均年齡52歲。另外收集健康體檢女性56例作為正常對(duì)照組,年齡21~53歲,平均年齡37歲。手術(shù)證實(shí)為乳腺良性病變患者58例,其中乳腺纖維瘤31例,小葉增生27例,年齡31~65歲,平均年齡39歲。受檢者抽空腹血3~5 ml,不抗凝,待血液凝固后分離血清置于無(wú)菌有蓋試管中,置于-25 ℃低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.2儀器與方法

        測(cè)量?jī)x為西門子centaur XP化學(xué)發(fā)光儀,HER-2/neu試劑由西門子公司提供。

        1.3結(jié)果判斷

        血清HER-2/neu>15.2 ng/ml為陽(yáng)性。組織HER-2陽(yáng)性的判斷標(biāo)準(zhǔn):IHC計(jì)分3+或IHC計(jì)分2+再經(jīng)熒光原位雜交(FISH)驗(yàn)證陽(yáng)性者視為陽(yáng)性;組織HER-2陰性的判斷標(biāo)準(zhǔn):IHC計(jì)分0+~1+或IHC計(jì)分2+再經(jīng)熒光原位雜交(FISH)驗(yàn)證陰性者視為陰性。

        1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

        兩樣本均數(shù)比較用t檢驗(yàn),陽(yáng)性率的比較采用χ2檢驗(yàn),采用Kappa檢驗(yàn)來(lái)判斷2種檢測(cè)方法結(jié)果是否具有一致性,Kappa值的判斷[3]:k>0.75一致性好,0.40≤k≤0.75一致性較好,k<0.4一致性差。

        2結(jié)果

        2.1血清HER-2/neu ECD的水平和陽(yáng)性率

        可手術(shù)乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD水平均高于乳腺良性病變患者及健康體檢者(P均<0.05),乳腺良性病變患者血清HER-2/neu ECD水平高于健康體檢者(P<0.05);可手術(shù)乳腺癌血清HER-2/neu ECD陽(yáng)性率均高于乳腺良性病變患者及健康體檢者(P均<0.05),乳腺良性病變患者血清HER-2/neu ECD陽(yáng)性率與正常對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);見表1。

        表1 不同組別血清HER-2/neu水平及陽(yáng)性率

        注:△為乳腺癌患者血清HER-2/neu水平與乳腺良性病變及正常對(duì)照組相比,P均<0.05;▲為乳腺良性病變患者血清HER-2/neu水平與正常對(duì)照組相比,P<0.05。☆為乳腺癌患者血清HER-2/neu陽(yáng)性率與乳腺良性病變及正常對(duì)照組相比,P均<0.05;★為乳腺良性病變患者血清HER-2/neu陽(yáng)性率與正常對(duì)照組相比,P>0.05。

        2.2血清HER-2/neu濃度與組織HER-2表達(dá)水平的關(guān)系

        34例組織HER-2表達(dá)陽(yáng)性的可手術(shù)乳腺癌中有14例血清HER-2/neu陽(yáng)性,陽(yáng)性符合率為41.2%;50例組織HER-2表達(dá)陰性的可手術(shù)乳腺癌中有48例血清HER-2/neu陰性,陰性符合率為96.0%。化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)結(jié)果顯示血清HER-2/neu水平與組織HER-2表達(dá)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,2種檢查方法具有較好的一致性,(kappa=0.406,P<0.05);見表2。

        表2 乳腺癌患者HER-2/neu水平與組織HER-2

        3討論

        乳腺癌是女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤,且發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)。20%~30%的乳腺癌患者呈HER-2過(guò)度表達(dá)或基因擴(kuò)增,HER-2基因的擴(kuò)增和蛋白的過(guò)度表達(dá)預(yù)示腫瘤的生物學(xué)行為惡性程度高,侵襲力強(qiáng),無(wú)病生存期短,預(yù)后差[4]。組織HER-2和激素受體的表達(dá)是乳腺癌的內(nèi)分泌治療和靶向治療的唯一選擇依據(jù),目前大多數(shù)乳腺癌患者的臨床治療仍然是根據(jù)初始評(píng)估,但HER-2的表達(dá)狀態(tài)隨疾病的進(jìn)展會(huì)發(fā)生改變[5]。

        目前國(guó)際上認(rèn)可的篩選HER-2表達(dá)陽(yáng)性乳腺癌的方法有免疫組化(immunohistochem istry,IHC)法和熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,F(xiàn)ISH)法。IHC法由于蛋白在標(biāo)本固定和處理過(guò)程中容易變形破壞,以及抗體不同批號(hào)產(chǎn)生的差異和結(jié)果判斷的主觀差異等,使假陽(yáng)性和假陰性無(wú)法避免[6];FISH技術(shù)是一種基因技術(shù),具有敏感性高、穩(wěn)定性和重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),但檢測(cè)費(fèi)用高,且兩者均需要實(shí)體瘤樣本;對(duì)于晚期乳腺癌或治療過(guò)程中出現(xiàn)肝、骨等轉(zhuǎn)移不能取得實(shí)體標(biāo)本的患者,均不能做IHC和FISH檢測(cè)。因此,僅僅根據(jù)以往組織學(xué)檢測(cè)結(jié)果來(lái)判斷HER-2狀態(tài)并不科學(xué),需要及時(shí)監(jiān)測(cè)HER-2表達(dá)狀態(tài),否則可能會(huì)使部分組織HER-2假陰性的患者失去靶向治療和臨床獲益的機(jī)會(huì)。國(guó)家綜合癌癥網(wǎng)(NCCN)建議盡可能進(jìn)行轉(zhuǎn)移灶的活檢,但很少得到關(guān)注,尤其當(dāng)轉(zhuǎn)移灶難以活檢時(shí)。

        在這種情況下,血清HER-2/neu胞外段(extracellular domain,ECD)可能可以作為乳腺癌患者治療的一個(gè)重要的依據(jù)。袁芃等[7]采用ELISA方法檢測(cè)可手術(shù)乳腺癌血清HER-2/neu ECD陽(yáng)性率為19%,組織HER-2/neu陽(yáng)性率為47%。而采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)乳腺癌患者血清HER-2/neu水平的文獻(xiàn)至今還未見報(bào)道,本研究采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)可手術(shù)乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD陽(yáng)性率為19.05%(16/84),組織HER-2/neu陽(yáng)性率為40.5%(34/84);可手術(shù)乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD水平和陽(yáng)性率均高于乳腺良性病變患者及健康體檢者(P均<0.05),與袁芃等報(bào)道一致。

        總之,目前被廣泛采用的HIC和FISH存在諸多問(wèn)題:由于活檢的創(chuàng)傷性和標(biāo)本的局限性,HER-2的檢測(cè)無(wú)法動(dòng)態(tài)隨訪,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè);而且部分患者無(wú)法提供檢測(cè)所需的組織切片;腫瘤異質(zhì)性會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果,有些患者的HER-2表達(dá)水平在疾病的發(fā)展過(guò)程中可能發(fā)生轉(zhuǎn)變,有些可由陰性表達(dá)轉(zhuǎn)為陽(yáng)性表達(dá)。因此,臨床需要持續(xù)了解患者機(jī)體HER-2的表達(dá)水平,而血清HER-2/neu ECD檢測(cè)作為“液體活檢”可隨時(shí)進(jìn)行,做到量化、實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè),從而有助于臨床醫(yī)生根據(jù)HER-2表達(dá)情況制定治療方案,以實(shí)現(xiàn)個(gè)體化治療。本研究顯示化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)可手術(shù)乳腺癌患者血清HER-2/neu濃度與組織HER-2表達(dá)水平具有較好的一致性(kappa=0.406,P<0.05);化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)可手術(shù)乳腺癌患者血清HER-2/neu ECD的敏感性不高(41.2%),但特異性很好(96.0%)。因此,乳腺癌患者在系統(tǒng)治療期間,可通過(guò)化學(xué)發(fā)光法動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)患者血清HER-2/neu ECD水平,彌補(bǔ)組織HER-2檢測(cè)的不足,在乳腺癌隨訪、療效監(jiān)測(cè)尤其是用Herceptin治療后的療效監(jiān)測(cè)中發(fā)揮其獨(dú)到作用。

        參考文獻(xiàn)

        [1]Cook GB,Neaman IE,Goldblatt JL,et al.Clinical utility of serum HER-2/neu testing on the Bayer Immuno 1 automated system in breast cancer〔J〕.Anticancer Res,2001,21(2B):1465-1470.

        [2]Leary AF,Hanna WM,van de Vijver MJ,et al.Value and limitations of measuring HER-2 extracellular domain in the serum of breast cancer patienta〔J〕.J Clin Oncol,2009,27(10):1694-1705.

        [3]孫振球主編.醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)(第三版)〔M〕.北京:人民衛(wèi)生出版社,2011:662-663.

        [4]步宏,陳杰,丁華野,等.乳腺癌HER2檢測(cè)指南〔J〕.中華病理學(xué)雜志,2006,35(10):631.

        [5]臧愛華,冉鳳鳴,張菁,等.乳腺癌生物標(biāo)志物表達(dá)狀態(tài)的時(shí)間變異性〔J〕.腫瘤防治研究,2010,37(9):1031-1034,1039.

        [6]萬(wàn)美珍,凌揚(yáng),徐志毅,等.熒光原位雜交與免疫組化檢測(cè)乳腺癌組織HER-2基因擴(kuò)增或蛋白表達(dá)情況的比較分析〔J〕.腫瘤基礎(chǔ)與臨床,2010,23(1):16-18.

        [7]袁芃,徐兵河,齊軍.乳腺癌患者血清與腫瘤組織中Her-2/neu表達(dá)的相關(guān)性研究〔J〕.臨床腫瘤學(xué)雜志,2004,9(5):449-451.

        (編輯:甘艷)

        Correlation between Serum HER-2/neu Concentration of Breast Cancer Patients and HER-2 Expression Level

        ZHOUAiqing,CHENZhijun,SUNZhengkui,etal.JiangxiCancerHospital,Nanchang,330029

        【Abstract】ObjectiveTo explore the correlation between concentration of HER-2/neu ECD and HER-2 expression level in tissues by chemiluminescence.MethodsSiemens chemiluminescence apparatus was used to detect the serum HER-2/neu ECD level in 84 operable breast cancer patients.58 patients with breast benign lesions over the same period and 56 cases of healthy patients were selected as contrast.HER-2 expression level in tissues of 84 cases of breast cancer patients were detected.ResultsHER-2/neu ECD levels and serum positive rate of the breast cancer patients were 15.56±6.79 ng/ml and 19.05%,which were significantly higher than patients with breast benign lesions (6.21±3.21 ng/ml,0.00%) and healthy patients (5.13±2.25 ng/ml,0.00%),P<0.05.There were 14 cases of positive serum HER-2/neu in 34 operable breast cancer patients with positive expression of HER-2,positive coincidence rate was 41.2%.There were 48 cases of negative serum HER-2/neu in 50 operable breast cancer patients with negative expression of HER-2,negative coincidence rate was 96%.The serum HER-2/neu level had good consistency with expression of HER-2(kappa=0.406,P<0.05).ConclusionSerum Her-2/neu concentration in operable breast cancer patients has good consistency with expression of HER-2 by chemiluminescence.During the system treatment for breast cancer patients,dynamic monitoring of serum HER-2/neu ECD level by chemiluminescence can make up for the insufficiency of HER-2 detection.It plays an unique role in the follow-up of breast cancer patients and monitoring of efficacy,especially monitoring of efficacy after treatment with Herceptin.

        【Key words】Breast cancer;Chemiluminescence method;Serum;HER-2/neu;Lmmunohistochemical;Fluorescence in situ hybridization(FISH)

        (收稿日期2014-12-04修回日期 2015-01-14)

        中圖分類號(hào):R737.9

        文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

        文章編號(hào):1001-5930(2015)04-0479-03

        DOI:10.3969/j.issn.1001-5930.2015.04.002

        基金項(xiàng)目:江西省衛(wèi)生廳科技計(jì)劃(編號(hào):20123106)

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