蒲麗君，羅 勇，趙 珂

(川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，四川 南充 637000)

高血壓病是最常見的心血管疾病之一，也是其它心血管疾病的一個主要危險因素。近年來隨著我國社會經(jīng)濟狀況的改善和人民生活方式的轉(zhuǎn)變，其發(fā)病率呈增加趨勢，我國高血壓患者已逾1億人口［1］。由于高血壓病的病因及發(fā)病機制較為復(fù)雜，尚未完全闡明，使其防治工作成為目前一大難題。有文獻研究發(fā)現(xiàn)，心臟在高負荷狀態(tài)下能量代謝的改變是心肌肥厚發(fā)生發(fā)展的機制之一［2］。因此，臨床上抑制高血壓心肌肥厚已經(jīng)成為成為治療高血壓的新途徑。有學(xué)者研究，改善心肌細胞代謝是抑制高血壓心肌肥厚的有效途徑。過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR-γ)與葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT-4)與心肌細胞代謝密切相關(guān)［3］。本文就選擇20只自發(fā)性高血壓大鼠為研究對象，探討分析阿托伐他汀對自發(fā)性高血壓大鼠心肌細胞PPAR-γ及GLUT-4表達水平的影響，為臨床運用提供理論指導(dǎo)。

1 資料與方法

1.1 實驗動物:選擇8周齡180～200g的健康雄性自發(fā)性高血壓大鼠20只，隨機分為A組與B組，同期同批次選擇10只同周齡和體重的健康雄性大鼠組成C組。在保持溫度(20±2.5)℃、24h自由進食與進水的條件下喂養(yǎng)三組大鼠。

1.2 藥物喂養(yǎng)方法:A組大鼠按照50mg·kg-1·d-1的水平喂養(yǎng)阿托伐他汀溶液，連續(xù)喂養(yǎng)10周，每周3次;同時喂養(yǎng)B組、C組大鼠等量的蒸餾水，連續(xù)喂養(yǎng)10周，每周3次.觀察三組大鼠的血壓值、血脂水平、左心室質(zhì)量指數(shù)水平以及PPAR-γ及GLUT-4表達水平的差異性。

1.3 實驗組器材以及試劑:CODA尾袖套法無創(chuàng)血壓系統(tǒng);DW-86L386型-80℃低溫冰箱;全自動化學(xué)分析儀;免疫組化光學(xué)顯微鏡;各種規(guī)格的量筒、燒杯、EP管、槍頭及槍頭盒;UV-2500紫外分光光度計;阿托伐他汀，規(guī)格為20mg/片;鼠抗鼠PPARγ單克隆抗體;鼠抗鼠GLUT4單克隆抗體等。

1.4 血壓監(jiān)測:采用CODA尾袖套法無創(chuàng)血壓系統(tǒng)檢測三組大鼠第1周、3周、5周、7周以及10周的的血壓水平，比較三組大鼠的血壓的差異性。

1.5 血脂水平以及左心室質(zhì)量指數(shù)水平的檢測:使用全自動化學(xué)分析儀檢測三組大鼠TC、TG、HDL-C以及LDL-C等的水平。嚴(yán)格按照實驗組操作方法制備實驗標(biāo)本，計算三組大鼠的左心室質(zhì)量指數(shù)水平，比較差異性。

1.6 PPAR-γ、GLUT-4 表達水平的檢測［4］:采用免疫組化法及PT-PCR法檢測三組大鼠的PPAR-γ及GLUT-4表達水平。檢測過程嚴(yán)格按照試劑盒操作標(biāo)準(zhǔn)操作，保證檢測結(jié)果的科學(xué)性。

1.7 統(tǒng)計學(xué)方法:數(shù)據(jù)處理軟件包為SPSS16.0，計量的比較采用t值檢驗，計數(shù)的比較采用χ2檢驗，P＜0.05表示有顯著性差異。

2 結(jié) 果

2.1 三組大鼠血壓值的比較:A組與B組大鼠的舒張壓與收縮壓水平較C組大鼠均較高，具有明顯差異性(P＜0.05)，A組與B組大鼠的血壓值水平比較，差異性不明顯(P＞0.05)。具體見表1。

2.2 三組大鼠血脂水平、LVM1水平的比較:A組與B組大鼠的TC、TG、HDL-C以及LDL-C等血脂水平較C組大鼠均較低，具有明顯差異性(P＜0.05)，A組與B組比較血脂水平無差異性(P＞0.05)。三組大鼠的LVM1水平兩兩比較均具有顯著性差異(P＞0.05)，但B組大鼠的LVM1水平最高，其次是A組，C組大鼠水平最低。見表2。

2.3 三組大鼠PPAR-γ、GLUT-4表達水平的比較:干預(yù)前，A組與B組大鼠PPAR-γ及GLUT-4表達水平均較C組較低，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，但A組與B組比較差異性不大(P＞0.05);干預(yù)后，A組大鼠PPAR-γ及GLUT-4表達水平顯著提高，與C組大鼠比較差異性不大，但與B組大鼠比較，具有較大差異性(P＜0.05)。見表 3。

表1 三組大鼠血壓值的比較(±s)

表1 三組大鼠血壓值的比較(±s)

時間 血壓 A組 B組 C組 A組與B組比較χ2 P A組與C組比較χ2 P B組與C組比較χ2 P 1 周 舒張壓 122.80±13.80 125.30±16.50 99.10±12.10 0.943 ＞0.05 4.204 ＜0.05 5.132 ＜0.05收縮壓 166.50±35.20 167.80±36.10 141.04±14.50 0.823 ＞0.05 5.043 ＜0.05 4.893 ＜0.05 3 周 舒張壓 123.30±13.50 125.30±15.50 98.80±13.10 0.847 ＞0.05 5.132 ＜0.05 4.321 ＜0.05收縮壓 168.30±34.10 169.20±37.20 140.35±15.12 0.475 ＞0.05 5.054 ＜0.05 5.012 ＜0.05 5 周 舒張壓 124.20±14.20 125.40±12.90 99.50±12.20 0.124 ＞0.05 4.982 ＜0.05 4.892 ＜0.05收縮壓 169.50±36.20 169.80±37.80 139.18±15.20 0.784 ＞0.05 4.829 ＜0.05 5.013 ＜0.05 7 周 舒張壓 122.40±12.20 124.30±14.60 100.10±11.15 0.673 ＞0.05 4.545 ＜0.05 5.312 ＜0.05收縮壓 167.50±36.20 170.50±37.10 140.32±15.50 0.812 ＞0.05 5.032 ＜0.05 4.554 ＜0.05 10 周 舒張壓 123.40±12.70 122.80±14.50 98.85±12.60 0.783 ＞0.05 5.012 ＜0.05 5.984 ＜0.05收縮壓 170.50±34.80 168.50±37.50 141.2±15.30 0.384 ＞0.05 5.392 ＜0.05 5.324 ＜0.05

表2 三組大鼠血脂水平、LVM1水平的比較±s)

表2 三組大鼠血脂水平、LVM1水平的比較±s)

指標(biāo) A組 B組 C組 A組與B組比較χ2 P A組與C組比較χ2 P B組與C組比較χ2 P TC(mmoL/L) 0.32±0.02 0.33±0.02 0.58±0.06 0.583 ＞0.05 4.021 ＜0.05 4.092 ＜0.05 TG(mmoL/L) 1.36±0.21 1.37±0.23 2.35±0.35 0.832 ＞0.05 4.943 ＜0.05 4.343 ＜0.05 HDL-C(mmoL/L) 0.40±0.10 0.41±0.08 0.93±0.18 0.812 ＞0.05 5.032 ＜0.05 4.091 ＜0.05 LDL-C(mmoL/L) 0.84±0.11 0.82±0.13 1.25±0.16 0.482 ＞0.05 5.475 ＜0.05 5.043 ＜0.05 LVM1(mg/g) 3.31±0.24 3.86±0.46 2.88±0.16 4.901 ＜0.05 5.132 ＜0.05 4.823 ＜0.05

表3 三組大鼠PPAR-γ、GLUT-4表達水平的比較(±s)

表3 三組大鼠PPAR-γ、GLUT-4表達水平的比較(±s)

指標(biāo) A組 B組 C組 A組與B組比較χ2 P A組與C組比較χ2 P B組與C組比較χ2 P PPAR-γ 干預(yù)前 1.15±0.03 1.13±0.02 1.28±0.05 0.854 ＞0.05 5.493 ＜0.05 4.343 ＜0.05干預(yù)后 1.25±0.06 1.13±0.03 1.28±0.06 5.034 ＜0.05 0.989 ＞0.05 5.034 ＜0.05 GLUT-4 干預(yù)前 1.10±0.02 1.08±0.01 1.25±0.06 0.912 ＞0.05 4.844 ＜0.05 5.175 ＜0.05干預(yù)后 1.23±0.05 1.08±0.02 1.25±0.07 4.983 ＜0.05 0.894 ＞0.05 4.434 ＜0.05

3 討論

高血壓是一種遺傳異質(zhì)性疾病，若干有微弱效應(yīng)的基因累積作用生成高血壓，并受一系列環(huán)境因素的影響［5，6］。該疾病的病理過程常涉及動脈血管壁增厚、左室肥厚及心肌纖維化即心血管重塑的過程。血管壁重塑可引致高血壓靶器官的損害，而高血壓長期壓力超負荷所引起的心臟結(jié)構(gòu)改變即左心室肥厚，明顯增加心臟事件的發(fā)生率和死亡率，嚴(yán)重威脅到患者的生命安全［7，8］。隨著我國高血壓的發(fā)病率呈增加趨勢，患病人口超過1億人口，因此，如何治療高血壓，如何改善心臟機能成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)研究的熱點課題［9］。

阿托伐他汀是第三代他汀類藥物，是新型的全合成的高效他汀類藥物。他汀類藥物又名羥甲基戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑，是目前臨床應(yīng)用最廣泛最重要的降低膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇的藥物，且對各種類型的高脂血癥均有一定療效［10］。但是本文研究發(fā)現(xiàn)，在阿托伐他汀干預(yù)的A組大鼠與蒸餾水喂養(yǎng)的B組大鼠的血脂水平差異性不明顯，這可能與實驗樣本數(shù)量較少及阿托伐他汀干預(yù)時間較短有關(guān)。過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR-γ)是PPARs亞型之一，屬于核內(nèi)受體轉(zhuǎn)錄因子超家族成員，是一類由配體激活的核轉(zhuǎn)錄因子，在脂肪組織、骨骼肌組織中高表達，最新研究發(fā)現(xiàn)其在心臟組織內(nèi)也存在［11］。有文獻報道［12］，PPAR-γ 通過以下機制發(fā)揮作用:①通過阻斷內(nèi)皮素的產(chǎn)生，抑制血管緊張素Ⅱ及其受體的表達②抑制促纖維化因子轉(zhuǎn)化生長因子β、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)及炎性細胞因子的表達;③抑制心肌細胞凋亡以及改善心肌脂質(zhì)代謝來。葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白(GLUTs)是細胞膜上的一種載體蛋白，負責(zé)葡萄糖分子或果糖分子的運載。有作者研究發(fā)現(xiàn)［13］，隨年齡增長心肌中GLUT1的表達逐漸降低，GLUT4的表達升高，并伴隨著糖分解代謝到氧化代謝的轉(zhuǎn)變，但在心肌肥厚的過程中出現(xiàn)GLUT4的表達減少，GLUT1的表達增加，這說明葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白參與了肥厚心肌的糖代謝過程。本文研究發(fā)現(xiàn)，阿托伐他汀干預(yù)的A組大鼠的PPAR-γ、GLUT-4表達水平較B組大鼠顯著升高，與正常大鼠水平相差無幾，并且A組大鼠的左心室質(zhì)量指數(shù)(LVM1)水平明顯降低，血壓水平與B組、C組相差無幾。這說明了阿托伐他汀不是通過影響血壓，而是通過增強PPAR-γ、GLUT-4高表達的途徑影響LVM1水平。因此，這一結(jié)論為臨床研究提供了理論參考依據(jù)，具有較高的臨床價值。，

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