血清脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白測定在慢性腎臟病的臨床應(yīng)用價值

吳亞1，魏宏蓮2

(1.河北省中醫(yī)院 檢驗科,河北 石家莊050011;2河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院 檢驗科，河北 石家莊050000)

近年來，伴有脂質(zhì)代謝紊亂的糖尿病和代謝綜合征的發(fā)病率正在逐年上升,由其導(dǎo)致的慢性腎臟病(CKD)的發(fā)病率和病死率也在逐年增加，從早期脂代謝紊亂角度尋找CKD發(fā)生發(fā)展的診斷指標(biāo)成為目前的研究熱點之一。脂肪細(xì)胞胞液中含有較多的脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(A-FABP)，它在脂肪酸的攝取、代謝和轉(zhuǎn)運過程中起著非常重要的作用，從基因水平調(diào)控脂肪細(xì)胞的分化，與體內(nèi)糖及脂肪代謝密切相關(guān)[1]。有報導(dǎo)血清A-FABP水平與肥胖癥、高血糖癥、胰島素抵抗和代謝綜合征密切相關(guān)[2]。目前有關(guān)CKD時A-FABP的研究鮮有報道。本研究以患不同類型腎病的患者為對象，通過檢測140例CKD(其中原發(fā)性腎小球腎炎52例，腎病綜合征46例，糖尿病腎病42例)患者的血清A-FABP和非酯化脂肪酸(NEFA)水平，探討其在CKD發(fā)生發(fā)展中的意義及臨床應(yīng)用價值。

1資料與方法

1.1研究對象2010年1月-2012年12月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院腎內(nèi)科收治的慢性腎小球腎炎患者52例(CKDⅠ組)，其中男36例，女16例，年齡30-60歲，平均(46.5±13.0)歲；腎病綜合征患者46例(CKDⅡ組)，其中男36例，女10例，年齡28-60歲，平均(45.8±13.4)歲；糖尿病腎病組(CKDⅢ組)42例，其中男25例，女17例，年齡36～64歲，平均(49.2±10.3)歲。對照組(Con組)50例，均為同期健康查體者，其中男35例，女15例，年齡30-60歲，平均(45.0±10.3)歲。所有患者均經(jīng)腎活檢確診，CKDⅠ組、CKDⅡ組、CKDⅢ組和Con組間男女比例和年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。

1.2方法采集空腹靜脈血標(biāo)本后3 500轉(zhuǎn)/min離心10分鐘分離血清，-20℃冷凍保存，集中測定。①A-FABP測定：酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法,試劑盒由美國ADL公司提供，應(yīng)用芬蘭Thermo自動洗板機和酶標(biāo)比色儀進(jìn)行洗板和吸光度測定。② NEFA測定：銅顯色法，試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。③血清中其他生化指標(biāo)測定：在HITACHI7600全自動生化分析儀上測定尿素氮(BUN)，肌酐(SCr)，白蛋白(ALB)、膽固醇(TC) 、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、24小時尿蛋白，試劑由上?？迫A生物公司提供。

2結(jié)果

2.1血生化指標(biāo)測定CKDⅠ組、CKDⅡ組和CKDⅢ組血清A-FABP(P<0.01)、NEFA(P<0.01))、TG(P<0.01)和24小時尿蛋白(P<0.01)均高于Con組，ALB顯著低于Con組(P<0.01)。CKDⅡ組血清TC明顯高于其它組，CKDⅢ組血清FBG明顯高于其它組，支持臨床診斷。各生化指標(biāo)檢測結(jié)果見表1。

組別A-FABP(μg/L)NEFA(mmol/L)BUN(mmol/L)SCr(μmol/L)ALB(g/L)TC(mmol/L)TG(mmol/L)FBG(mmol/L)24小時尿蛋白(g)CKDⅠ組8.41±3.53**1.01±0.14**6.55±3.5493.53±32.9636.28±9.17**4.87±1.591.85±1.02**4.56±0.871.64±0.90**CKDⅡ組8.71±4.54**1.01±0.11**6.28±2.9391.31±23.9924.42±5.94**▲▲8.49±2.99**▲▲2.50±1.16**▲4.39±1.014.59±2.74**▲▲CKDⅢ組6.36±1.93**▲1.04±0.07**8.81±1.55**▲▲106.27±20.48*▲36.09±9.06**5.19±1.322.04±1.37**7.85±2.00**▲▲1.52±0.80**Con組3.88±1.510.82±0.265.30±1.1682.21±5.6548.03±2.404.86±0.591.05±0.334.16±0.390.06±0.03F值24.96618.15215.3548.3687.7443.67616.69796.77144.115P值0.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000

注：與Con組相比：*P<0.05,**P<0.01；與CKDⅠ組相比：▲P<0.05,▲▲P<0.01。

2.2相關(guān)分析直線相關(guān)分析結(jié)果顯示CKDⅠ組A-FABP和NEFA有相關(guān)關(guān)系r=0.446(P=0.033)；CKDⅡ組A-FABP和NEFA有相關(guān)關(guān)系r=0.469(P=0.032)，CKDⅢ組A-FABP和NEFA有相關(guān)關(guān)系r=0.379(P=0.012)。

3討論

FABP是一組能結(jié)合長鏈脂肪酸的低分子量胞質(zhì)蛋白，具有組織分布特異性，分布于哺乳動物的小腸上皮細(xì)胞、心肌細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等組織細(xì)胞中，以其分布而命名[3]。目前發(fā)現(xiàn)的有9種類型。脂肪細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞高表達(dá)的A-FABP，在脂肪酸的攝取、胞內(nèi)轉(zhuǎn)運及代謝調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用[1]。A-FABP能與激素敏感性脂肪酶結(jié)合成復(fù)合物，增強此酶的效率，促進(jìn)脂解作用[2]。脂肪酸和A-FABP二者密切相關(guān)，長鏈脂肪酸濃度增加時，可結(jié)合位于A-FABP基因上游的啟動子區(qū)域的轉(zhuǎn)錄因子過氧化物酶體增生體激活受體(PPAR)的DNA結(jié)合區(qū)，誘導(dǎo)其下游A-FABP靶基因表達(dá)[4]。有研究表明代謝綜合征和糖尿病患者血A-FABP水平升高[5,6]。本研究結(jié)果顯示各型CKD患者的血A-FABP和NEFA水平均升高，分析其原因可能是：①CKD患者體內(nèi)存在脂質(zhì)代謝紊亂，血TG增高和(或)血TC增高，血NEFA增高，NEFA可與A-FABP上游基因PPAR結(jié)合，誘導(dǎo)A-FABP基因表達(dá)；②CKD時，尿蛋白增高，結(jié)合了白蛋白的NEFA可促進(jìn)巨噬細(xì)胞浸潤、細(xì)胞凋亡和皮質(zhì)細(xì)胞增殖，導(dǎo)致腎損傷。Thomas等通過動物試驗研究發(fā)現(xiàn)，白蛋白-NEFA可吸引巨噬細(xì)胞在皮外層浸潤，導(dǎo)致嚴(yán)重的腎小管間質(zhì)損傷[7]；③A-FABP在巨噬細(xì)胞中高表達(dá)，CKD有巨噬細(xì)胞等炎細(xì)胞浸潤。有研究表明敲除載脂蛋白B基因小鼠中A-FABP缺失的巨噬細(xì)胞可明顯防止動脈粥樣硬化的進(jìn)展[8]，提示A-FABP參與調(diào)控脂質(zhì)代謝和炎癥反應(yīng)；④慢性腎臟病時血A-FABP和血NEFA顯著增高，且二者存在直線相關(guān)關(guān)系，推測可能在CKD的進(jìn)展過程中，NEFA和A-FABP二者在基因表達(dá)調(diào)控方面有一定關(guān)系，這有待進(jìn)一步研究。

與傳統(tǒng)CKD診斷指標(biāo)BUN、SCr相比，血A-FABP和NEFA的靈敏度更高。所以本研究認(rèn)為CKD患者血A-FABP和NEFA升高，提示血A-FABP和NEFA測定對其診斷有一定的臨床應(yīng)用價值。

參考文獻(xiàn)：

[1]Makowski L,Brittingham KC,Reynolds JM,et al.The fatty acid-binding protein,aP2,coordinates macrophage cholesterol trafficking and inflammatory activity.Macrophage expression of aP2 impacts peroxisome proliferator-activated receptor gamma and IkappaB kinase activities[J].J Biol Chem,2005,280(13):12888.

[2]Yeung DC,Xu A,Cheung CWS,et al.Serum Adipocyte fatty acid-binding protein levels were Independently associated with carotid atherosclerosis[J].Arteriosclerosis Thrombsis and Vascul Biology,2007,27:1796.

[3]馮愛娟,陳東風(fēng).脂肪酸結(jié)合蛋白研究進(jìn)展[J].世界華人消化雜志,2003,11(9):1457.

[4]Distel RJ,Robinson GS,Spiegelman BM.Fatty acid regulation of gene expression.Transcriptional and post-transcriptional mechanisms[J].J Biol Chem,1992,267(9):5937.

[5]Horakova D,Pastucha D,et al.Adipocyte fatty acid binding protein and C-reactive protein levels as indicators of insulin resistance development[J].Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub,2011,155(4):355.

[6]YE WH1,PENG XH,et al.Relations between serum adipocyte fatty acid-binding protein and type 2 diabetes in a community population[J].Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao,2011,31(3):508.

[7]Thomas ME,Harris KPG,Walls J,et al.Fatty acids exacerbate tubulointerstitial injury in protein-overload proteinuria[J].AJP-Renal Physiology,2002,283:640.

[8]Makowski L,Boord JB,Maeda K,et al.Lack of macrophage fatty-acid-binding protein ap2 protects mice deficient in apolipoprotein E against atherosclerosis[J].Nature Med,2001,7(6):699.

收稿日期：(2014-03-18)

文章編號：1007-4287(2015)04-0619-02