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        脂聯(lián)素基因多態(tài)性與妊娠期糖耐量受損相關(guān)性研究

        2015-02-24 03:43:23欒媛媛郭曉輝楊俊紅
        中國實驗診斷學(xué) 2015年7期
        關(guān)鍵詞:妊娠期相關(guān)性

        欒媛媛,郭曉輝,楊俊紅

        (1.唐山市婦幼保健院 婦產(chǎn)科,河北 唐山063000;2.唐山市第二醫(yī)院)

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        脂聯(lián)素基因多態(tài)性與妊娠期糖耐量受損相關(guān)性研究

        欒媛媛1,郭曉輝2,楊俊紅1

        (1.唐山市婦幼保健院 婦產(chǎn)科,河北 唐山063000;2.唐山市第二醫(yī)院)

        摘要:目的探討脂聯(lián)素基因多態(tài)性與妊娠期糖耐量受損相關(guān)性。方法選取2013年2月-2014年2月我院收治的妊娠期糖尿病患者共60例,以及選取同期我院體檢糖耐量正常的孕婦共60例,采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)技術(shù)分析脂聯(lián)素基因多態(tài)性位點(+276G/T、+45T/G、-3971A/G)。結(jié)果脂聯(lián)素基因、276、+45位點的等位基因頻率經(jīng)過Hardy-Weinberg遺傳平衡定律檢驗指出各基因頻率已達遺傳平衡(P>0.05)。兩組的脂聯(lián)素基因+276G/T等位基因、基因型頻率分布對比,均不存在顯著性差異(P>0.05)。受損組患者的G等位基因頻率明顯低于正常組(P<0.05)。兩組的脂聯(lián)素基因+45T/G基因型頻率分布對比,均不存在顯著性差異(P>0.05)。兩組的脂聯(lián)素基因-3971的G、A等位基因、基因型頻率分布對比,均存在顯著性差異(P<0.05)。結(jié)論本文推測脂聯(lián)素基因多態(tài)性+45T/G可能是妊娠糖尿病發(fā)病的易感位點之一,-3971位點A等位基因可能為妊娠糖尿病的一個危險原因,因此監(jiān)測孕婦此位點能預(yù)測妊娠期糖尿病的發(fā)生,從而及早積極處理多種危險因素,從而有助于早期預(yù)防妊娠期糖尿病,降低遠期并發(fā)癥發(fā)生及對于胎兒不佳的影響。

        (ChinJLabDiagn,2015,19:1093)

        妊娠期糖尿病(GDM)為妊娠期一種常見的并發(fā)癥,大概占妊娠孕婦的4%。妊娠期糖尿病給孕婦和胎兒帶來嚴重的影響,對孕婦和嬰兒的危害均極大。近年資料顯示,血清脂聯(lián)素水平的減少和胰島素抵抗(IR)與妊娠期糖尿病發(fā)生存在著密切的關(guān)聯(lián)[1,2]。本文選取2013年2月-2014年2月我院收治的妊娠期糖尿病患者共60例,探討脂聯(lián)素基因多態(tài)性與妊娠期糖耐量受損相關(guān)性,現(xiàn)報道如下。

        1資料與方法

        1.1 臨床資料

        選取2013年2月-2014年2月我院收治的GDM患者共60例,年齡21-43歲,平均年齡(30.1±2.5)歲,分娩孕周25-29周,平均孕周(27.6±1.9)周。選取同期我院體檢糖耐量正常的孕婦共60例,年齡22-42歲,平均年齡(29.7±2.3)歲,分娩孕周24-28周,平均孕周(27.2±2.0)周。納入標準:均為單胎初產(chǎn)婦;不存在原發(fā)性高血壓等心血管病、糖尿病、肝腎病等病史;未采用任何的激素類藥物或者降糖藥物。兩組患者在年齡、分娩孕周等方面比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

        1.2 方法

        兩組于產(chǎn)前首次檢查的時候空腹下對體質(zhì)量、身高、血壓進行測量,到孕24-28周行50 g葡萄糖負荷試驗,1 h之后抽取其靜脈血液,若血糖不低于7.8 mmoL/L則7 d后給予100 g葡萄糖耐量試驗,分別在空腹和服糖后1、2、3 h抽取靜脈血4次,血清用來對血糖、血真胰島素進行檢測,而血細胞用來提取基因組DNA。運用己糖激酶法來測定血糖,而以酶聯(lián)免疫吸附法來測定真胰島素。

        采用血液基因組DNA提取試劑盒(北京天根生化科技有限公司)提取基因組DNA。模板為基因組DNA,于反應(yīng)體系50 μl進行聚合酶鏈反應(yīng)。上、下游引物分別為5′GATGGACGGAGTCCTTTGTAGGTC3′、5′CCAAATCACTTCAGGTTGCTTATG3′;F:aatcagagtccgcttggt,R:aacttcctcactgcttgtca,由英駿生物技術(shù)有限公司(上海)合成。聚合酶鏈反應(yīng)條件是:95℃預(yù)變性4 min,95℃變性45 s,55℃退火30 s,72℃延伸60 s,33次循環(huán),72℃末端延伸10 min。由北京華大中生科技發(fā)展有限公司對聚合酶鏈反應(yīng)的產(chǎn)物進行DNA測序,測序的結(jié)果經(jīng)兩名專業(yè)人員進行閱讀并基因型確定。

        1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

        2結(jié)果

        2.1 +276G/T基因與糖耐量受損相關(guān)性

        兩組的脂聯(lián)素基因+276G/T基因與糖耐量受損相關(guān)性見表1。結(jié)果顯示,兩組的脂聯(lián)素基因+276G/T等位基因頻率分布對比,均不存在顯著性差異(P>0.05)。兩組的脂聯(lián)素基因+276G/T基因型頻率分布對比,亦均不存在顯著性差異(P>0.05)。經(jīng)過Hardy-Weinberg平衡檢驗,脂聯(lián)素基因+276G/T基因的等位基因頻率顯示各基因頻率已達遺傳平衡(P>0.05)。

        表1 兩組的脂聯(lián)素基因+276G/T基因與糖耐量受損相關(guān)性(n,%)

        2.2 +45T/G基因與糖耐量受損相關(guān)性

        兩組的脂聯(lián)素基因+45T/G基因與糖耐量受損相關(guān)性見表2。結(jié)果顯示,兩組的脂聯(lián)素基因+45的G等位基因頻率分布對比,存在顯著性差異(P<0.05),受損組患者的G等位基因頻率明顯低于正常組T等位基因頻率明顯高于正常值。兩組的脂聯(lián)素基因+45T/G基因型頻率分布對比,均不存在顯著性差異(P>0.05)。經(jīng)過Hardy-Weinberg平衡檢驗,脂聯(lián)素基因+45T/G基因的等位基因頻率顯示各基因頻率已達遺傳平衡(P>0.05)。

        表2 兩組的脂聯(lián)素基因+45T/G基因與糖耐量受損相關(guān)性(n,%)

        注:與正常組比較,*P<0.05

        2.3 -3971A/G基因與糖耐量受損相關(guān)性

        兩組的脂聯(lián)素基因-397A/G基因與糖耐量受損相關(guān)性見表3。結(jié)果顯示,兩組的脂聯(lián)素基因-3971的G、A等位基因頻率分布對比,均存在顯著性差異(P<0.05),受損組患者的G等位基因頻率明顯低于正常組,而A等位基因頻率明顯高于正常組。兩組的脂聯(lián)素基因的基因型頻率分布對比,均存在顯著性差異(P<0.05)。經(jīng)過Hardy-Weinberg平衡檢驗,脂聯(lián)素基因-3971A/G基因的等位基因頻率顯示各基因頻率已達遺傳平衡(P>0.05)。

        表3 兩組的脂聯(lián)素基因-3971A/G基因與糖耐量受損相關(guān)性(n,%)

        注:與正常組比較,*P<0.05

        3討論

        妊娠期糖尿病的發(fā)病率呈日益上升的趨勢而引起了廣泛的關(guān)注,GDM嚴重地危及到產(chǎn)婦和嬰兒的健康,且跟許多如子癇前期、新生兒低血糖、巨大兒等不良的妊娠結(jié)局有著密切的關(guān)系。GDM的發(fā)病機制與病因較復(fù)雜,普遍被認為與胰島素分泌缺陷及胰島素抵抗等有關(guān),跟2型糖尿病的病理生理機制與遺傳易感性相似。資料表明GDM在妊娠期婦女的發(fā)生率大概是1%-4%,且日益增加,越來越受到了國內(nèi)外婦產(chǎn)科學(xué)者的關(guān)注[3]。脂聯(lián)素為目前發(fā)現(xiàn)的一種特異性蛋白,其由脂肪細胞產(chǎn)生,在脂、糖類代謝以及胰島素抵抗方面發(fā)揮著關(guān)鍵的作用,與GDM有著一定關(guān)聯(lián)[4,5]。

        人體血漿脂聯(lián)素含量大約占血漿總蛋白量0.01%,是5-30 μg/mL。脂聯(lián)素是一種胰島素超敏化激素,為人類脂質(zhì)代謝、血糖穩(wěn)態(tài)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的一個關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,能夠顯著提高胰島素糖元異生,加強骨骼肌細胞的糖吸收與脂肪酸氧化,拮抗肝臟糖形成,影響著糖類和脂肪的代謝,可以直接地對糖代謝以及胰島素的敏感性進行調(diào)節(jié),與2型糖尿病、胰島素抵抗、肥胖等有著密切的關(guān)系[6]。脂聯(lián)素基因存在2個內(nèi)含子以及3個外顯子,全基因組掃描表明脂聯(lián)素基因定位于染色體 3q27,這個區(qū)域存在代謝綜合征以及2型糖尿病的易感位點。

        脂聯(lián)素的水平跟妊娠糖尿病間有著一定關(guān)系,研究發(fā)現(xiàn)GDM跟脂肪組織內(nèi)脂聯(lián)素表達降低,胰島素抵抗水平增加有關(guān)[7]。有資料指出,脂聯(lián)素基因多態(tài)性跟妊娠糖尿病亦有著相關(guān)性。Low等[8]研究了妊娠馬來西亞婦女70例,發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素基因SNP+45T/G跟妊娠糖尿病的發(fā)生與脂聯(lián)素減少關(guān)系顯著。陳震宇等[9]發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素基因 -11426A/G位點多態(tài)性可能跟妊娠糖尿病的發(fā)病相關(guān),妊娠糖尿病孕婦的G等位基因分布頻率上升,而A/G突變可能由于抑制血清脂聯(lián)素水平影響妊娠糖尿病出現(xiàn)。此外,國外學(xué)者通過對比79例妊娠糖尿病病人跟169例健康妊娠孕婦,發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素基因+45T/G、-11377C/G可能跟妊娠糖尿病的發(fā)病有相關(guān)性[10]。

        本研究結(jié)果顯示,脂聯(lián)素基因+276、+45位點的等位基因頻率經(jīng)過Hardy-Weinberg遺傳平衡定律檢驗指出各基因頻率已達遺傳平衡(P>0.05),說明本院受試者的脂聯(lián)素基因+276、+45位點存在T/G單核苷酸多態(tài)性。糖耐量受損組與正常組的+276G/T等位基因和基因型頻率對比,不存在顯著性差異(P>0.05),說明脂聯(lián)素基因單核苷酸多態(tài)性+276G/T跟妊娠糖尿病不存在顯著的相關(guān)性。糖耐量受損組與正常組的+45T/G基因型頻率對比,不存在顯著性差異(P>0.05),但是糖耐量受損組患者的G等位基因頻率明顯比正常組高(P<0.05),說明G等位基因可能是危險因素,跟妊娠糖尿病相關(guān)。此外,本研究結(jié)果顯示脂聯(lián)素基因3971A/G與本院妊娠糖尿病有關(guān),其中A等位基因可能為妊娠糖尿病的一個危險原因。綜上所述,本文推測脂聯(lián)素基因多態(tài)性+45T/G可能是妊娠糖尿病發(fā)病的易感位點之一,-3971位點A等位基因可能為妊娠糖尿病的一個危險原因,因此監(jiān)測孕婦此位點能預(yù)測妊娠期糖尿病的發(fā)生,從而及早積極處理多種危險因素,從而有助于早期預(yù)防妊娠期糖尿病,降低遠期并發(fā)癥發(fā)生及對于胎兒不佳的影響。

        參考文獻:

        [1]秦衛(wèi)勝,楊文東.脂肪細胞因子與妊娠期糖尿病相關(guān)性研究[J].中華臨床醫(yī)師雜志,2012,6(5):162.

        [2]Li S,Shin HJ,Ding EL,et al.Adiponectin levels and Risk of type2 diabetes:a systematic review and meta-analysis[J].The Journal of The American Medical Association,2009,302:179.

        [3]Lambrinoudaki I,SA,Creatsas G.Genetics in gestational diabetes mellitus:association with incidence,severity,pregnancy outcome and response to treatment[J].Curr Diabetes Rev,2010,6(6):393.

        [4]陳雪香,魏碧蓉.脂聯(lián)素基因多態(tài)性與妊娠糖尿病關(guān)系研究進展[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2013,21(7):3.

        [5]林顯麗,張瑛.楊瑩.中國漢族人群2型糖尿病與脂聯(lián)素基因SNP-11377位點相關(guān)性的 Meta分析[J].中國糖尿病雜志,2012,20(8):561.

        [6]范玉平,鄭艷莉.糖代謝異常孕婦血清脂聯(lián)素、C反應(yīng)蛋白水平與圍產(chǎn)兒結(jié)局的關(guān)系[J].標記免疫分析與臨床,2010,17(5):302.

        [7]羅毅平,趙一俏,薛耀明.脂聯(lián)素基因表達與妊娠糖尿病關(guān)系[J].中國公共衛(wèi)生,2010,9(9):1103.

        [8]Low CF,Chong PP,Idris F,et al.Adiponectin SNP45TGis associated with gestational diabetes mellitus[J].Archives of Gynecology and Obstetrics,2011,283:1255.

        [9]陳震宇,杜鵑.脂聯(lián)素基因多態(tài)性與妊娠期糖尿病的相關(guān)性研[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展,2011,20(9):718.

        [10]Gueuvoghlanian-Silva BY,Torloni MR,Mattar R,et al.Profile of inflammatory mediators in gestational diabetesmellitus:phenotype and genotype[J].American Journal of Reproductive Immunology,2012,67(3):241.

        關(guān)鍵詞:脂聯(lián)素基因多態(tài)性;妊娠期;糖耐量受損;相關(guān)性

        Study on the correlation between the amount of damage of adiponectin gene polymorphism with gestational impaired glucose toleranceLUANYuan-yuan,GUOXiao-hui,YANGJun-hong.(DepartmentofObstetricsandGynecology,MaternalandChildHealthHospitalofTangshan,Tangshan063000,China)

        Abstract:ObjectiveTo investigate the association of adiponectin gene polymorphism with gestational impaired glucose tolerance correlation.Methods60 Patients with gestational diabetes from 2013 February -2014 February in our hospital,and 60 Patients in our hospital physical examination of pregnant women with normal glucose tolerance,using polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis of adiponectin gene polymorphism loci Technology (+276G/T,+45T/G,-3971A/G).ResultsAdiponectin gene +276,+45 locus allele frequencies after Hardy-Weinberg law of genetic equilibrium test and points out that each gene frequency has reached genetic equilibrium (P>0.05).The two group of adiponectin gene +276G/T allele,genotype frequency distribution of contrast,there was no significant difference (P>0.05).The damaged group of patients with the G allele frequency was significantly lower than that of normal group (P<0.05).Adiponectin gene +45T/G genotype frequency distributions were compared between the two groups,there was no significant difference (P>0.05).Adiponectin gene -3971 of the two groups of G,A allele and genotype frequency distribution of contrast,there was significant difference (P<0.05).ConclusionThe speculative +45T/G adiponectin gene polymorphisms may be susceptible to pregnancy diabetes loci of -3971,A allele gene may be a risk of gestational diabetes causes,so this site monitoring of pregnant women can predict the incidence of diabetes in pregnancy,thus early active treatment of multiple risk factors,which contribute to the beneficial to early prevention gestational diabetes mellitus,reduce complication and effect on fetal bad.

        Key words:adiponectin gene polymorphisms; pregnancy; impaired glucose tolerance; correlation

        (收稿日期:2014-06-21)

        文獻標識碼:A

        中圖分類號:R587.1

        文章編號:1007-4287(2015)07-1093-04

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