馬 超
(哈爾濱市飼料科學研究所 150018)
氣相色譜法測定大豆中戊唑醇的殘留
馬 超
(哈爾濱市飼料科學研究所 150018)
通過建立新的大豆中戊唑醇殘留的氣相色譜檢測方法,將處理過的樣品用丙酮進行提取,在經(jīng)過多次萃取以及層析柱的凈化,最后,采用應用氣相色譜發(fā),使用氮磷檢測器進行檢測。經(jīng)回收率實驗驗證,該方法達到該農(nóng)藥殘留檢測的要求準確度和精密度。使得大豆這一動物飼料重要原料的使用安全更有保障。
大豆;戊唑醇;氣相色譜
大豆是我國飼料生產(chǎn)的重要原料,富含大量的脂肪和蛋白質,是我國北方重要的經(jīng)濟作物之一。在大豆生長的各個階段都會噴灑農(nóng)藥,其中戊唑醇是其中最常用的藥品之一。在噴灑到田間之后,會快速的透過植物的葉子以及植物根被大豆植株吸收,并且會在很短的時間內(nèi),均勻的分布于大豆植株的各個部位,為植株形成一層能夠阻礙細菌生長的薄膜,從而保護大豆植株不受白粉病等常見病害的侵襲。然而由于該農(nóng)藥的分布特性,使得大豆中還會有一部分的殘留,對人畜的健康都有很大的影響,筆者通過大量實驗,建立新的大豆中戊唑醇殘留的氣相色譜檢測方法,獲得了比較滿意的效果。
主要儀器設備:Agilent安捷倫7200A氣相色譜儀,NPD氮磷檢測器。材料:石油醚;戊唑醇標準品:純度≥99.5%;丙酮;正己烷;乙酸乙酯;氯化鈉;無水硫酸鈉;弗羅里硅土等。以上試劑均為分析純。另外,其中無水硫酸鈉要在使用前于150℃高溫爐中烘烤6h以上;弗羅里硅土要在使用前于高溫爐中550℃烘4h以上,等其冷卻后用蒸餾水做脫活處理之后置于干燥器中。
制樣:隨機選用當年產(chǎn)出的東北地產(chǎn)大豆樣品1.5kg。將所選大豆樣品除雜,接著縮分至500g,用錘式旋風磨進行粉碎并使其全部通過20目篩,要求通過率需達到95%以上。合并篩上與篩下物。粉碎后的樣品需避光保存于-15℃以下環(huán)境中冷凍保存,并于48h內(nèi)進行檢測。
萃?。簻蚀_稱取粉碎的大豆籽粒樣品10.00g于50mL具塞磨口三角瓶中,向其中注入80mL丙酮。將其放置于水浴恒溫振蕩器中,勻速振蕩1h。震蕩完成后,使用布氏漏斗進行減壓抽濾,抽濾完成后,使用15mL丙酮沖洗殘渣,將濾液及沖洗液合并,收集于250mL分液漏斗中,加入10%氯化鈉溶液100mL,使用石油醚分萃取3次,每次加入石油醚40mL,萃取完成后,將所有有機相進行,在40℃條件下進行減壓蒸干。
凈化:在層析柱中分層裝入厚度為大約為1cm的無水硫酸鈉,再加入2g弗羅里硅土和以及1g中性氧化鋁最后在裝入厚度大約為1cm的無水硫酸鈉。接著首先使用25mL石油醚進行淋洗,待液面接近頂端無水硫酸鈉層的時侯,開始將萃取液注入層析柱,最后再加入10mL石油醚進行淋洗。接下來用體積分數(shù)為5%的(乙酸乙酯-石油醚)混合液40mL對層析柱進行洗脫,棄去;再用體積分數(shù)為50%的(乙酸乙酯-石油醚)混合液100mL進行洗脫,收集洗脫液,濃縮近干,用正己烷進行定容至2mL,待測。
標準曲線的繪制:準確稱取戊唑醇標準品0.01g,將其溶解于丙酮中,配制成為濃度是1000mg/L的標準儲備液。在進行實驗前將其梯度稀釋配制成0.1mg/L、0.2mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L標準系列溶液,用氣相色譜測定。檢測后將所得數(shù)據(jù)進行線性回歸計算,縱坐標為峰面積,橫坐標為濃度,計算出線性關系,同時得到相關系數(shù)。其線性方程為:y=20.226X+0.483,相關系數(shù)為0.9996,能夠滿足定量要求。
回收率實驗:將戊唑醇標準溶液加入大豆籽粒樣品中,計算回收率。十組不同添加水平的戊唑醇加標回收率及相對標準偏差分別為:添加濃度分添加0.01mg/kg回收率為94.6%,相對標準偏差為4.1%;添加0.02mg/kg回收率為92.2%,相對標準偏差為7.7%;添加0.03mg/kg回收率為98.2%,相對標準偏差為6.3%;添加0.04mg/kg回收率為99.7%,相對標準偏差為2.7%;添加0.05mg/kg回收率為102.6%,相對標準偏差為5.1%;添加0.06mg/kg回收率為103.6%,相對標準偏差為8.7%;添加0.07mg/kg回收率為104.5%,相對標準偏差為7.2%;添加0.08mg/kg回收率為95.8%,相對標準偏差為8.1%;添加0.09mg/kg回收率為102.4%,相對標準偏差為6.3%;添加0.1mg/kg回收率為94.6%,相對標準偏差為3.8%。戊唑醇在大豆籽粒中的平均回收率為92.2%~104.5%,相對標準偏差為2.7%~8.7%,滿足定量分析的精密度要求。