紀(jì)必磊 劉小麗 張 晶

深圳市第三人民醫(yī)院急診科，廣東深圳 518114

泌尿科和男科中前列腺炎是臨床較為常見疾病，且大部分前列腺炎門診患者中，均為慢性非細(xì)菌性前列腺炎[1]，在全世界男性中的患病率為9%～14%[2]。慢性非細(xì)菌性前列腺炎主要臨床表現(xiàn)為尿頻、尿急、尿不盡、排尿困難等，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量及家庭負(fù)擔(dān)。目前，該病在治療臨床上采用了抗生素、α1-受體阻滯劑、非甾體抗炎藥等藥物[3]，但臨床療效不佳，且副作用大，因此現(xiàn)臨床研究熱點(diǎn)為尋找有效防治慢性非細(xì)菌性前列腺炎藥物。原兒茶醛是丹參水溶性成分主要產(chǎn)物之一，研究表明[4]其具有改善微循環(huán)，抗炎、抗氧化、抑制細(xì)胞凋亡等廣泛活性，然而動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明原兒茶醛在體內(nèi)無蓄積作用，并且毒性低，臨床應(yīng)用安全[5]。而近年來大量研究表明炎癥、微循環(huán)障礙及氧化應(yīng)激等參與了慢性非細(xì)菌性前列腺炎的發(fā)生發(fā)展[6-7]。綜上提示原兒茶醛可能對(duì)慢性非細(xì)菌性前列腺炎具有較好的治療作用。目前原兒茶醛對(duì)慢性非細(xì)菌性前列腺炎的研究尚未見報(bào)道，本研究旨在探討原兒茶醛對(duì)慢性非細(xì)菌性前列腺炎的療效及其作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 藥物與試劑

苯甲酸雌二醇注射液（上海通用藥業(yè)股份有限 公 司，H41021503，1mL/支）；前列康（浙江康恩貝制藥股份有限公司，B20020078）；原兒茶醛（SHO310），安耐吉化學(xué)。

1.2 動(dòng)物分組、給藥及實(shí)驗(yàn)方法

SPF 級(jí)雄性SD 大鼠50 只，體重180 ～220g [廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，SCXK（粵）2008-0003]適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周后隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、前列康組、原兒茶醛低、高劑量組，每組10 只，除假手術(shù)組外，其余各組采用魏氏方法造模，具體方法如下：腹腔注射2%戊巴比妥鈉麻醉大鼠， 8% Na2S 下腹部脫毛，75%酒精與碘酊消毒。于陰囊中間行1cm縱行切口，擠出陰囊，在睪丸根部將其切斷、結(jié)扎，縫合，術(shù)后1d 腹腔注射青霉素避免感染，去勢后皮下注射苯甲酸雌二醇0.25mg/（kg·d），連續(xù)30d。建模完成后，連續(xù)灌胃給藥4 周，其中前列康組給藥1.2g/（kg·d），原兒茶醛低、高劑量組分別給藥5mg/（kg·d），15mg/（kg·d），假手術(shù)組、模型組給予等量生理鹽水。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，2%戊巴比妥鈉麻醉大鼠，頸椎脫臼處死，取前列腺稱濕重。部分前列腺組織經(jīng)生理鹽水、組織4μL/mg 的比例，剪碎并混勻。取2mL 試管加入0.38mL 白細(xì)胞稀釋液，準(zhǔn)確吸取20μL 上述制備好標(biāo)本，加入試管并混勻。用低倍鏡計(jì)數(shù)四角4 個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)及卵磷脂小體密度，其中卵磷脂小體密度按臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)分為4 級(jí)，即1/4 視野為+，1/2 視野為++，3/4 視野為+++，滿視野為++++。部分前列腺組織組織與生理鹽水比例1 ∶9 勻漿，按酶聯(lián)免疫法試劑盒方法檢測TNF-α，IL-8 含量。用生理鹽水將剩余前列腺組織漂洗干凈，后于10%中性甲醛溶液中固定，石蠟包埋，蘇木精-伊紅染色，光鏡下觀察。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠前列腺濕重比較

與假手術(shù)組比較，模型組前列腺濕重明顯增加（P ＜0.05）。與模型組比較，原兒茶醛高劑量組前列腺濕重明顯降低（P ＜0.01）。見表1。

表1 各組大鼠的前列腺濕重變化

表1 各組大鼠的前列腺濕重變化

組別 n 前列腺濕重 t P假手術(shù)組 10 0.540±0.046 2.954 0.004模型組 10 0.742±0.055 0.294 1.045前列康組 10 0.699±0.04 0.287 1.020低劑量組 10 0.702±0.072 1.056 0.090高劑量組 10 0.604±0.053 3.008 0.001

2.2 各組大鼠前列腺內(nèi)白細(xì)胞數(shù)及卵磷脂小體密度觀察

各組大鼠前列腺內(nèi)白細(xì)胞數(shù)變化見表2。各組大鼠卵磷脂小體密度變化見表3。

表2 各組大鼠前列腺內(nèi)白細(xì)胞數(shù)的變化（）

表2 各組大鼠前列腺內(nèi)白細(xì)胞數(shù)的變化（）

組別 n 白細(xì)胞計(jì)數(shù)（×109/L） t P假手術(shù)組 10 1.220±0.220 2.668 0.008模型組 10 6.390±0.375前列康組 10 4.350±0.606 2.994 0.003低劑量組 10 4.350±0.606 3.541 0.002高劑量組 10 5.620±0.454 3.42 0.002

表3 各組大鼠前列腺內(nèi)卵磷脂小體密度的變化（）

表3 各組大鼠前列腺內(nèi)卵磷脂小體密度的變化（）

組別 n 卵磷脂小體密度 Z P+ ++ +++ ++++假手術(shù)組 10 0 1 2 7 3.41 0.002模型組 10 8 2 0 0前列康組 10 0 3 6 1 3.28 0.001低劑量組 10 0 3 5 2 3.76 0.001高劑量組 10 0 2 8 0 3.87 0.001

從表2 和表3 結(jié)果可見：與正常組相比，模型組前列腺白細(xì)胞數(shù)明顯增多（P ＜0.01），卵磷脂小體密度降低（P ＜0.01）。與模型組比較，前列康組、原兒茶醛低、高劑量組前列腺白細(xì)胞數(shù)明顯減少（P ＜0.01），卵磷脂小體密度升高（P ＜0.01）。

2.3 各組大鼠前列腺組織勻漿TNF-α和IL-8含量觀察

從表4 結(jié)果可見：與正常組相比，模型組前列腺TNF-α、IL-8 含量明顯升高（P ＜0.01）。與模型組比較，前列康組、原兒茶醛高劑量組前列腺TNF-α、IL-8 含量明顯降低（P ＜0.01）。

2.4 各組大鼠光鏡下的病理學(xué)觀察

假手術(shù)組大鼠前列腺組織結(jié)構(gòu)完整，腹腔存在正常分泌物，間質(zhì)無水腫與炎癥細(xì)胞浸潤，腺泡上皮無增生（圖1-A）。模型組較于假手術(shù)組，大鼠前列腺組織結(jié)構(gòu)異常，表現(xiàn)為纖維增生、間質(zhì)水腫、分泌物過多、血管擴(kuò)張充血、腺泡上皮細(xì)胞呈乳頭狀增生（圖1-B）。與模型組比較，前列康組和原兒茶醛高、低劑量組癥狀明顯減輕，導(dǎo)管與腺體之間有少量充血，間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤減少，而原兒茶醛高劑量組療效最好（圖1-C、D、E）。

表4 各組大鼠前列腺組織勻漿TNF-α和IL-8含量變化（pg/mL）

表4 各組大鼠前列腺組織勻漿TNF-α和IL-8含量變化（pg/mL）

組別 n TNF-α t P IL-8 t P假手術(shù)組 10 3.702±0.53 2.185 0.006 25.808±2.790 2.412 0.005模型組 10 122.209±2.701 108.288±3.415前列康組 10 83.875±4.991 2.245 0.006 99.249±3.010 2.412 0.004原兒茶醛低劑量組 10 92.546±5.086 2.355 0.005 104.263±8.121 2.136 0.006原兒茶醛高劑量組 10 55.342±3.588 2.565 0.003 84.939±6.167 2.289 0.006

圖1 各組大鼠前列腺組織病理觀察

3 討論

原兒茶醛具有抑制炎癥，抑制細(xì)胞凋亡，抗血栓，促進(jìn)微循環(huán)等廣泛藥理活性[8]，目前其對(duì)慢性非細(xì)菌性前列腺炎的研究未見報(bào)道，本研究發(fā)現(xiàn)原兒茶醛降低大鼠慢性非細(xì)菌性前列腺炎前列腺濕重、白細(xì)胞數(shù)和TNF-α、IL-8 含量，升高卵磷脂小體密度，減輕間質(zhì)水腫和炎癥細(xì)胞浸潤，改善慢性非細(xì)菌性前列腺炎癥狀，且呈劑量依賴性，提示原兒茶醛對(duì)慢性非細(xì)菌性前列腺炎具有較好的治療作用，其作用機(jī)制是通過減輕炎癥而改善癥狀，故原兒茶醛很可能可作為一種抗慢性非細(xì)菌性前列腺炎新藥應(yīng)用于臨床。

前列腺炎是男科常見疾病之一，目前西醫(yī)治療該病尚無有效藥物，因此目前臨床研究熱點(diǎn)為尋找防治慢性非細(xì)菌性前列腺藥物。慢性前列腺炎發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，病機(jī)制尚不明確。研究發(fā)現(xiàn)炎癥介質(zhì)參與了其發(fā)病過程，非細(xì)菌性前列腺炎大鼠前列腺勻漿TNF-α 和 IL-8 顯著升高[9-10]。臨床慢性非細(xì)菌性前列腺炎患者的前列腺液和組織中存在大量炎癥細(xì)胞和多種炎癥因子，有研究[11-12]報(bào)道在慢性非細(xì)菌性前列腺炎患者精液中，細(xì)胞因子水平顯著提高，但也有發(fā)現(xiàn)大鼠慢性非細(xì)菌性前列腺炎模型測定在不同時(shí)期IL-1β，IL-6，MIP，COX-2，iNOS 的表達(dá)差異較大[13]。氧化應(yīng)激也與慢性非細(xì)菌性前列腺炎的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，一些研究表明Ⅲa 和Ⅲb 患者的精液及前列腺液中活性氧含量增高[14]。除上述發(fā)病機(jī)制之外，病原體感染、自身免疫、神經(jīng)內(nèi)分泌失常、微循環(huán)障礙等與慢性非細(xì)菌性前列腺炎的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[15]。總之，目前慢性非細(xì)菌性前列腺炎的發(fā)病機(jī)制還不確定，可能是多種病因和發(fā)病機(jī)制相互綜合作用的結(jié)果，其發(fā)病機(jī)制還需進(jìn)一步研究。

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