劉時(shí)武，王喜玉，馬建林，李 斌

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H型高血壓患者血漿炎性細(xì)胞因子水平變化及與頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度相關(guān)性研究

劉時(shí)武，王喜玉，馬建林，李 斌

目的 探討H型高血壓患者血漿超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)、可溶性血管細(xì)胞間黏附分子1(sICAM-1)、一氧化氮(NO)與6-酮-前列腺素F1α(6-K-PGF1α)水平以及與頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度(IMT)的相關(guān)性。方法 選取2012年2月—2013年1月海南省人民醫(yī)院門診及住院的原發(fā)性高血壓病患者167例，根據(jù)血漿Hcy水平分為H型高血壓組(Hcy≥10.00 μmol/L，n=85)和對(duì)照組(Hcy<10.00 μmol/L，n=82)。兩組患者均抽取肘靜脈血10 ml，測(cè)定hs-CRP、MCP-1、sICAM-1、NO和6-K-PGF1α水平，并采用經(jīng)顱多普勒超聲測(cè)定兩組患者頸動(dòng)脈IMT。結(jié)果 H型高血壓組Hcy、hs-CRP、MCP-1、sICAM-1及IMT均高于對(duì)照組(P<0.05)，6-K-PGF1α和NO均低于對(duì)照組(P<0.05)。Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，H型高血壓患者h(yuǎn)s-CRP、MCP-1、sICAM-1與IMT呈正相關(guān)(P<0.05)；NO、6-K-PGF1α與IMT呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。H型高血壓患者h(yuǎn)s-CRP、MCP-1、sICAM-1與NO、6-K-PGF1α均呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論 H型高血壓患者存在炎性反應(yīng)和血管內(nèi)皮功能障礙，參與動(dòng)脈粥樣硬化形成，并可能導(dǎo)致心腦血管事件發(fā)生，應(yīng)采取措施積極干預(yù)。

高血壓；同型半胱氨酸；超敏C反應(yīng)蛋白；趨化因子CCL2；可溶性血管細(xì)胞間黏附分子1；一氧化氮；6-酮-前列腺素F1α；頸動(dòng)脈內(nèi)膜中膜厚度

劉時(shí)武，王喜玉，馬建林，等.H型高血壓患者血漿炎性細(xì)胞因子水平變化及與頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度相關(guān)性研究[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2015，18(11)：1236-1239.[www.chinagp.net]

Liu SW，Wang XY，Ma JL，et al.Correlation between the changes of plasma inflammatory cytokines levels and carotid intima-media thickness in patients with H-type hypertension[J].Chinese General Practice，2015，18(11)：1236-1239.

有研究提示，H型高血壓是缺血性腦卒中一個(gè)重要危險(xiǎn)因素，高血壓和高血漿同型半胱氨酸(Hcy)共存，并相互影響，導(dǎo)致缺血性腦卒中發(fā)生[1-3]。一項(xiàng)6城市研究數(shù)據(jù)顯示，我國(guó)成年高血壓伴有高Hcy血癥者約占75.5%[4]。本研究探討H型高血壓患者黏附因子和血管內(nèi)皮功能的變化，進(jìn)一步探討H型高血壓易發(fā)生心腦血管疾病的機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年2月—2013年1月海南省人民醫(yī)院門診及住院的原發(fā)性高血壓病患者167例，其中男78例，女89例；年齡39～74歲，平均(61.2±5.9)歲。患者均已行常規(guī)降壓藥物治療，如鈣離子拮抗劑、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑、血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑及β受體阻滯劑。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合1999年世界衛(wèi)生組織制定的原發(fā)性高血壓病診斷標(biāo)準(zhǔn)，收縮壓(SBP)≥140 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)和/或舒張壓(DBP)≥90 mm Hg；(2)紐約心功能分級(jí)(NYHA)≤Ⅱ級(jí)，肝腎功能正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)繼發(fā)性高血壓、結(jié)締組織病及其他嚴(yán)重內(nèi)科及精神疾?。?2)正在口服他汀類調(diào)脂藥物。根據(jù)血漿Hcy水平[4]，將患者分為H型高血壓組(Hcy≥10.00 μmol/L，n=85)和對(duì)照組(Hcy<10.00 μmol/L，n=82)。兩組患者性別、年齡、病程比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見(jiàn)表1)。

表1 兩組患者一般資料比較

注：*為χ2值

1.2 研究方法

1.2.1 血壓測(cè)量方法 兩組患者采用右上臂佩戴美國(guó)AMB04型無(wú)創(chuàng)便攜式動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測(cè)儀進(jìn)行24 h動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測(cè)。血壓測(cè)量8：00～22：00，1次/15 min；22：00～次日8：00，1次/30 min，記錄兩組24 h動(dòng)態(tài)血壓均值。

1.2.2 黏附因子測(cè)定 兩組患者在空腹12 h后于清晨抽取肘靜脈血10 ml，采用EDTA抗凝管放置，以3 000 r/min離心5 min，離心半徑10 cm，分離血漿后，立即-20 ℃凍存，1周后-80 ℃凍存。Hcy檢測(cè)應(yīng)用酶法使用Olympus AU5500測(cè)定。超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)檢測(cè)應(yīng)用免疫增強(qiáng)比濁法。單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)和可溶性血管細(xì)胞間黏附分子1(sICAM-1)測(cè)定采用ELISA法，均由檢驗(yàn)專業(yè)人員嚴(yán)格按照試驗(yàn)說(shuō)明完成檢測(cè)。

1.2.3 一氧化氮(NO)和6-酮-前列腺素F1α(6-K-PGF1α)測(cè)定 取血后置于含有1/10體積2%EDTANa2的試管中，以3 000 r/min離心5 min，離心半徑10 cm，分離血漿，-70 ℃保存?zhèn)溆谩Ｓ冒灰?2 ml將6-K-PGF1α稀釋，除空白管外，酶標(biāo)反應(yīng)的各孔注入200 μl，4 ℃，過(guò)夜。傾棄包被液，各孔注入0.3%明膠(包被液配制)300 μl，4 ℃，過(guò)夜。用含0.05%Teen-20的磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌3次，室溫下晾干后置低溫冰箱保存。NO測(cè)定采用南京聚力生物醫(yī)學(xué)工程研究所提供的藥盒進(jìn)行，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作檢測(cè)。采用蘇州醫(yī)學(xué)院血栓室提供的藥盒酶聯(lián)免疫法測(cè)定6-K-PGF1α含量。

1.2.4 頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度(IMT)測(cè)定 采用美國(guó)SEQUOIA512型彩色經(jīng)顱多普勒超聲測(cè)量?jī)山M患者IMT，具體測(cè)量方法：多普勒超聲掃查頸總動(dòng)脈全程、頸內(nèi)外動(dòng)脈長(zhǎng)軸及短軸切面，并在右側(cè)頸動(dòng)脈分叉近端下方1 cm處，于心室舒張期(心電圖R波處)測(cè)量血管長(zhǎng)軸切面最厚處的IMT(管腔內(nèi)膜交界面至中膜與外膜交界面之間的回聲距離即為IMT)。每例患者分別測(cè)量3個(gè)心動(dòng)周期，取其平均值作為IMT。

2 結(jié)果

2.1 兩組Hcy、hs-CRP、MCP-1、sICAM-1及IMT比較 H型高血壓組Hcy、hs-CRP、MCP-1、sICAM-1及IMT均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表2)。

2.2 兩組NO和6-K-PGF1α比較 H型高血壓組NO和6-K-PGF1α水平均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表3)。

Table 2 Comparison of Hcy，hs-CRP，MCP-1，sICAM-1 and IMT between the two groups

組別例數(shù)Hcy(μmol/L)hs-CRP(mg/L)MCP-1(ng/L)sICAM-1(ng/L)IMT(mm)對(duì)照組82 7.41±0.69 2.20±0.8923.8±3.92520.7±547.10.8±0.3H型高血壓組8513.25±0.814.75±1.0227.3±4.12873.7±612.31.1±0.3t值-9.516-4.269-8.267-6.234-2.234P值0.0030.0080.0040.0050.040

注：Hcy=同型半胱氨酸，hs-CRP=超敏C反應(yīng)蛋白，MCP-1=單核細(xì)胞趨化蛋白1，sICAM-1=可溶性血管細(xì)胞間黏附分子1，IMT=頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度

表3 兩組患者NO和6-K-PGF1α水平比較

注：NO=一氧化氮，6-K-PGF1α=6-酮-前列腺素F1α

2.3 相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，H型高血壓患者h(yuǎn)s-CRP、MCP-1、sICAM-1與IMT呈正相關(guān)(P<0.05)；NO、6-K-PGF1α與IMT呈負(fù)相關(guān)(P<0.05，見(jiàn)表4)。H型高血壓患者h(yuǎn)s-CRP、MCP-1、sICAM-1與NO、6-K-PGF1α均呈負(fù)相關(guān)(P<0.05，見(jiàn)表5)。

表4 H型高血壓患者h(yuǎn)s-CRP、MCP-1、sICAM-1、NO及6-K-PGF1α與IMT相關(guān)性分析

Table 4 Correlation between plasma hs-CRP，MCP-1，sICAM-1，NO，6-K-PGF1α and IMT in patients with H-type hypertension

相關(guān)系數(shù)hs-CRPMCP-1sICAM-1NO6-K-PGF1αr值0.3270.3460.264-0.285-0.332P值0.0020.0070.004 0.021 0.032

表5 H型高血壓患者h(yuǎn)s-CRP、MCP-1、sICAM-1與NO和6-K-PGF1α相關(guān)性分析

Table 5 Correlation between plasma hs-CRP，MCP-1，sICAM-1 and NO，6-K-PGF1α in patients with H-type hypertension

指標(biāo)hs-CRPr值 P值MCP-1r值 P值sICAM-1r值 P值NO-0.3310.011-0.2940.023-0.2380.0276-K-PGF1α-0.3410.014-0.3570.025-0.2730.034

3 討論

高血壓合并高Hcy血癥是腦卒中最重要的危險(xiǎn)因素，發(fā)生機(jī)制是多方面的，炎性反應(yīng)可能是其中之一。hs-CRP是在感染和組織損傷時(shí)升高的急性期蛋白，是動(dòng)脈粥樣硬化的重要炎性因子。已有研究證明炎性細(xì)胞因子在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中起重要作用，本研究結(jié)果表明H型高血壓組hs-CRP水平明顯高于對(duì)照組，表明H型高血壓組較對(duì)照組存在更明顯的炎性反應(yīng)，可能是H型高血壓患者易患心腦血管疾病機(jī)制之一。

MCP-1能誘導(dǎo)單核細(xì)胞轉(zhuǎn)化為巨噬細(xì)胞，吞噬脂質(zhì)轉(zhuǎn)變成泡沫細(xì)胞，而形成泡沫細(xì)胞是動(dòng)脈粥樣硬化的病變基礎(chǔ)和關(guān)鍵，因此MCP-1是此過(guò)程中重要的炎性因子之一。sICAM-1是由細(xì)胞表面ICAM-1經(jīng)蛋白酶裂解使細(xì)胞外成分脫落而來(lái)，動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂，血管通透性升高，內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)大量細(xì)胞因子和sICAM-1產(chǎn)生炎性反應(yīng)，吸引單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞黏附、遷移至內(nèi)皮下并攝取脂質(zhì)形成泡沫細(xì)胞[5]。Zhang等[6]研究提示，高血壓合并代謝異常患者sICAM-1明顯升高，炎性反應(yīng)可能是高血壓和代謝異常的共同病理生理基礎(chǔ)。本研究結(jié)果表明，H型高血壓組MCP-1和sICAM-1水平明顯高于對(duì)照組，表明炎性反應(yīng)可能是H型高血壓患者易患腦卒中機(jī)制之一。

近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，血管內(nèi)皮細(xì)胞除分泌生物活性物質(zhì)在調(diào)節(jié)血管張力、凝血、纖溶等方面起重要作用，血管內(nèi)皮功能失調(diào)存在于動(dòng)脈粥樣硬化病變進(jìn)展的全過(guò)程[7-8]。本研究結(jié)果顯示，H型高血壓患者血漿NO、6-K-PGF1α水平明顯降低。NO作為內(nèi)皮源性舒張因子(EDRF)，而6-K-PGF1α則是前列環(huán)素2(PGI2)的穩(wěn)定代謝產(chǎn)物，其水平降低說(shuō)明血管內(nèi)皮細(xì)胞合成及分泌NO、PGI2減少，最終導(dǎo)致血小板黏附、聚集，促發(fā)動(dòng)脈痙攣，直至動(dòng)脈內(nèi)血栓形成。

IMT是評(píng)價(jià)動(dòng)脈粥樣硬化的敏感指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)，H型高血壓組IMT顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明H型高血壓患者已經(jīng)存在動(dòng)脈粥樣硬化。另外本研究發(fā)現(xiàn)，H型高血壓患者h(yuǎn)s-CRP、MCP-1及sICAM-1水平均與IMT呈正相關(guān)，而NO和6-K-PGF1α與IMT呈負(fù)相關(guān)，進(jìn)一步證實(shí)炎性反應(yīng)和血管內(nèi)皮功能障礙可能是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展機(jī)制之一，也證實(shí)炎性反應(yīng)和血管內(nèi)皮功能障礙是H型高血壓患者易患腦卒中機(jī)制之一。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，hs-CRP、MCP-1及sICAM-1分別與NO和6-K-PGF1α呈負(fù)相關(guān)，表明炎性細(xì)胞因子影響血管內(nèi)皮功能，造成血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌NO和6-K-PGF1α減少，造成血管內(nèi)皮功能障礙，二者相互影響促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展。

綜上所述，hs-CRP、MCP-1及sICAM-1等炎性細(xì)胞因子參與H型高血壓患者動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過(guò)程，也是H型高血壓患者易患心腦血管疾病機(jī)制之一。H型高血壓患者存在血管內(nèi)皮功能障礙，可能也是H型高血壓患者易患心腦血管疾病機(jī)制之一。預(yù)防H型高血壓患者心腦血管并發(fā)癥，不僅要降壓治療，而且需要抗感染和改善血管內(nèi)皮功能。

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(本文編輯：賈萌萌)

Correlation Between the Changes of Plasma Inflammatory Cytokines Levels and Carotid Intima-media Thickness in Patients With H-type Hypertension

LIUShi-wu，WANGXi-yu，MAJian-lin，etal.

DepartmentofCardiology，HainanProvincialPeople′sHospital，Haikou570311，China

Objective To evaluate the changes of plasma hs-CRP，MCP-1，sICAM-1，NO and 6-K-PGF1α and their correlation with IMT in patients with H-type hypertension.Methods 167 cases of outpatients and inpatients with essential hypertension in Hainan Provincial People′s Hospital between February，2012 and January，2013 were selected as the research subjects who were,according to the plasma Hcy level，divided into the H-type hypertension group(Hcy≥10.00 μmol/L，n=85)and the control group(Hcy<10.00 μmol/L，n=82).10 ml elbow vein blood was drawn in both groups to determine the level of plasma hs-CRP，MCP-1，sICAM-1，NO and 6-K-PGF1α and transcranial doppler was used for carotid intima-media thickness(IMT).Results The levels of Hcy，hs-CRP，MCP-1，sICAM-1 and IMT in H-type hypertension group were all higher than those in the control group and the NO and 6-K-PGF1α levels in H-type hypertension group were lower than those in the control group with significance(P<0.05).Pearson correlation analysis showed plasma hs-CRP，MCP-1，sICAM-1 of patients with H-type hypertension were positively related with IMT(P<0.05)，but NO and 6-K-PGF1α were negatively related with IMT(P<0.05).The plasma hs-CRP，MCP-1，sICAM-1 were negatively related with NO and 6-K-PGF1α(P<0.05).Conclusion Patients with H-type hypertension suffer inflammatory reaction and vascular endothelial dysfunction and play an important role in the development of atherosclerosis，which may be correlated to cardiovascular and cerebrovascular events.Positive intervention measures should be taken.

Hypertension；Homocysteine;High-sensitivity C-reactive protein；Chemokine CCL2 ；Soluble vascular cell adhesion molecules-1；NO；6-K-PGF1α；Carotid intima-media thickness

海南省自然基金指導(dǎo)性計(jì)劃項(xiàng)目課題(806109)

570311海南省海口市，海南省人民醫(yī)院心內(nèi)科(劉時(shí)武，馬建林，李斌)，腫瘤內(nèi)科(王喜玉)

王喜玉，570311海南省?？谑?，海南省人民醫(yī)院腫瘤內(nèi)科；E-mail：liushiwu168@163.com

R 544.1

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2015.11.003

2014-11-25；

2015-02-10)