廖 群(重慶市急救醫(yī)療中心輸血科 400014)
在醫(yī)院臨床輸血工作中,常因紅細胞意外抗體導致配血不合,此類情況中,又以因輸血和妊娠引起的混和抗體導致抗體鑒定困難,往往延誤患者治療??沙浞掷每贵w的血清學性質(zhì)進行抗體鑒定,并確定合理的配血方案,及時選擇適合的血液輸注。作者以紅細胞意外混和抗體疑難配血1例為例,介紹在臨床工作中如何利用抗體的血清學性質(zhì)快速準確地進行抗體鑒定,并確定合理的配血方案,保障臨床輸血安全。
1.1 一般資料 女,23歲,因引產(chǎn)手術出血入院急救,配血中發(fā)現(xiàn)抗篩陽性,自述病史,無輸血史,孕3產(chǎn)1。
1.2 試劑與設備 單克隆抗A、抗B(上海血液生物公司);單克隆抗D、抗C、抗c、抗E、抗e、IgG+IgM抗D(上海血液生物公司);抗M、抗N(上海血液生物公司)。反定型標準紅細胞(自制),Ⅰ號、Ⅱ號、Ⅲ號抗體篩選細胞(上海血液生物公司);1%木瓜酶(自制);譜細胞(上海血液生物公司);聚凝胺(珠海Baso);抗人球試劑(上海血液生物公司);抗人球蛋白卡(長春博迅),試劑均在有效期內(nèi)使用。離心機KA-2200(日本九保田);恒溫孵育器和卡式離心機(長春博研)。
1.3 方法 ABO、Rh、MN血型鑒定均參照試劑說明書??贵w篩選和意外抗體鑒定患者血清和抗篩細胞,自身細胞分別在鹽水介質(zhì)、木瓜酶介質(zhì)和抗人球介質(zhì)卡下反應,觀察凝集現(xiàn)象。交叉配血在鹽水介質(zhì),木瓜酶介質(zhì)和抗人球介質(zhì)卡下進行配血試驗,觀察凝集和溶血現(xiàn)象。
2.1 抗體篩查患者血清與3個抗篩細胞反應 血型鑒定患者為O、NN、ccDEE型。患者抗體篩查情況,見表1。鹽水中同Ⅰ號細胞不凝集,Ⅱ號、Ⅲ號均有凝集,抗人球介質(zhì)卡同木瓜酶Ⅱ號、Ⅲ號均有凝集。各種介質(zhì)中自身對照均無凝集?;颊哐逋琌型標準細胞在木瓜酶介質(zhì)中有凝集。由以上結(jié)果推斷,患者血清中可能含有鹽水類抗體、Rh類抗體。
2.2 抗體鑒定 通過抗體篩選結(jié)果,患者血清中可能含有鹽水類抗體、Rh類抗體。從日常最容易出現(xiàn)的抗體并結(jié)合患者自身的紅細胞血型結(jié)果,首先加做MN血型系統(tǒng),該患者MN血型為NN,篩選出MM和NN的純合子細胞5例同患者血清在鹽水介質(zhì)反應,結(jié)果見表2,顯示患者血清中含抗M。再結(jié)合患者的Rh血型分型,篩選出CCDee、ccdee、ccDEE型的細胞,在木瓜酶介質(zhì)中反應,顯示患者血清中含抗Ce或抗C、抗e。與CCDee、ccdee型的細胞吸收后血清特異性鑒定為含抗Ce。
2.3 交叉配血 交叉配血選用O、NN、ccDEE型同患者血型一致的血液,同患者在鹽水介質(zhì)、木瓜酶介質(zhì)和抗人球介質(zhì)卡下進行配血試驗,結(jié)果均無凝集和溶血現(xiàn)象。表明配血相合,患者輸注2U血液后,無不良反應發(fā)生。
表1 患者抗體篩查結(jié)果
表2 患者抗體鑒定結(jié)果
意外抗體是指除ABO系統(tǒng)以外的其他血型抗體,是引起臨床輸血中疑難配血及導致輸血反應的重要因素[1]。臨床最常見由RH血型系統(tǒng)引起的意外抗體,其他血型系統(tǒng)也日益引起重視[2]。人類MNs血型系統(tǒng)是繼ABO血型系統(tǒng)后被檢出的第2個血型系統(tǒng),復雜程度僅次于Rh系統(tǒng)[3]。由MNs血型系統(tǒng)引起的意外抗體致配血不合偶有報道[4-6]。選擇相配合的血液輸注,是保障臨床輸血工作的重要舉措[7]。目前疑難配血中又以混合意外抗體的鑒定最為復雜,因其由于抗體互相影響,造成鑒定結(jié)果難以判斷。文獻報道的混合抗體鑒定通常借助多組譜細胞來實現(xiàn),而在基層臨床輸血工作中,條件比較差,如多組譜細胞不容易得到或不能及時到貨影響血型抗體的鑒定工作[8-9]。臨床急診手術比較緊急,從而對輸血工作造成影響。在此情況下,作者摸索出在臨床工作中利用抗體的血清學性質(zhì)快速準確地進行抗體或混合抗體鑒定的一種模式。保障臨床急救用血,搶救患者的生命。
在充分了解患者的基本資料,如輸血史、妊娠史等,了解患者的血型表型,是否有自身溶血性貧血,患者抗體在不同介質(zhì)下的反應。并且根據(jù)患者的血型分型結(jié)果,對患者可能存在的抗體血清學性質(zhì)和抗體類型進行預判。不同介質(zhì)下的抗體反應有助于判斷出抗體的血清學性質(zhì)。鹽水介質(zhì)有助于IgM血清學性質(zhì)抗體的檢出,但不能檢測出IgG血清學性質(zhì)抗體。凝聚胺介質(zhì)可以檢出IgM和IgG血清學性質(zhì)的抗體,能發(fā)現(xiàn)可引起溶血性輸血反應的大部分意外抗體,但對于Kell系統(tǒng)抗體以及Kidd系統(tǒng)抗體可能造成漏檢。酶介質(zhì)可以促進某些血型抗原與抗體的反應,如Rh和Kidd血型系統(tǒng),也會使某些紅細胞抗原的結(jié)構(gòu)受到破壞或者變形,失去活性,如M、N、S、Fya、Fyb,應用酶介質(zhì)可以檢測出Rh類血清學性質(zhì)抗體[10]??谷饲蛴兄贗gG血清學性質(zhì)抗體的檢出。因此,運用不同介質(zhì)下的抗體檢測方法,了解不同介質(zhì)下的抗體的血清學性質(zhì),可以幫助快速地預判抗體血清學性質(zhì)及所屬的血型系統(tǒng),有的放矢,從而提高工作效率。
從本例試驗結(jié)果可以得知,患者血清存在IgM血清學性質(zhì)抗體和酶血清學性質(zhì)IgG?;颊哐宸磻窬直砻?,患者血清存在酶血清學性質(zhì)Rh類IgG,參考患者本身的Rh血型分型,預測患者可能含有抗Ce或抗C、抗e。該患者在鹽水介質(zhì)中也與混合細胞和篩選細胞有凝集,表明患者血清中也存在鹽水類抗體,綜合分析血型結(jié)果,表明患者血清中含有抗M。該患者血清中含有2種或2種以上的意外抗體。在了解該患者引起配血困難的意外抗體后,先用抗M血清篩選反應陰性的ABO同型供血者血液,并用抗M、抗N血清確定為NN純合子的血液,再用抗C血清篩選反應陰性的供血者血液,反應陰性的血液再加作抗E、抗c,最后從庫存的30多袋O型血液中篩選到O、NN、ccDEE型的供血者血液進行鹽水介質(zhì)、木瓜酶介質(zhì)和抗人球介質(zhì)卡交叉配血,主次側(cè)均無凝集與溶血現(xiàn)象。輸注后患者無不良反應發(fā)生。
為了確保臨床輸血安全,提高輸血質(zhì)量,保障輸血治療的效果,輸血前交叉配血是非常重要的。在引起配血不合的意外抗體中,單特異性抗體比較容易鑒定,并且有較高的概率篩選到。當患者血清中存在2種或2種以上的抗體時,則鑒定難度比較高。在臨床工作中特別是患者急救情況下,血液要求比較急,這就要求輸血科能快速鑒定出意外抗體,及時提供血液。在此情況下,作者摸索出利用不同介質(zhì)下的意外抗體檢測方法,了解不同介質(zhì)下的意外抗體的血清學性質(zhì),預判或預測意外抗體血清學性質(zhì)及所屬的血型系統(tǒng),從而有目的地進行意外抗體的鑒定。大大減少了意外抗體鑒定所需要的時間,有效地解決了臨床急救用血的需求,保障了臨床輸血治療的效果。
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