胡 玲

乙型肝炎病毒DNA與血清標志物的關系

胡 玲

目的 分析研究乙型肝炎病毒(HBV)脫氧核糖核酸(DNA)與血清標志物(HBV-M)的關系。方法 HBV感染患者血清中HBV-DNA含量采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(PCR)檢測, HBV血清標志物采用酶聯(lián)免疫吸附法測定。結果 乙型肝炎e抗原(HbeAg)(+)標本HBV-DNA陽性率為100.0%,明顯高于(HbeAg)(-), 比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結論 患者的HBV-DNA陽性率與HBV-M之間存在相關性, 采用實時熒光定量聚合酶鏈反應法檢測HBV-DNA, 可清晰準確顯示患者體內病毒復制情況, 之后為臨床預防治療提供可參考的依據(jù)。

乙型肝炎病毒；脫氧核糖核酸；血清標志物

乙型肝炎為一種嚴重危及人們生命健康的傳染性疾病,隨著慢性乙肝疾病的發(fā)展, 會逐步惡化為肝硬化, 甚至形成肝癌［1］。因此, 及時診斷乙肝疾病, 提供及時有效的預后治療, 對于提高患者生命質量, 效果顯著。本次研究中, 分析研究乙型肝炎病毒DNA和血清標志物之間的關系, 對之后臨床診斷治療提供可參考的依據(jù), 總結如下。

1 材料與方法

1.1 實驗材料 選取本院2013年1～12月住院以及門診收治的500份乙肝患者的血清標本, 男200例, 女300例, 年齡10～72歲, 平均年齡(41.1±8.0)歲。

1.2 試劑 HBV-DNA檢測所需的試劑以及HBV-M所需的試劑盒, 均由江蘇默樂生物科技有限公司所提供。

1.3 儀器 本次檢測中所需使用的儀器為實時熒光PCR擴增儀, DNA29620洗衣板, DNM29602GM酶標儀。

1.4 檢測方法 HBV-DNA含量采用實時熒光定量PCR檢測, HBV-M采用酶聯(lián)免疫吸附法測定。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差( x-±s)表示, 實施t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示, 實施χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

乙型肝炎e抗原(HbeAg)(+)標本(第1～2組)共190例, HBV-DNA陽性率為100.0%, HbeAg(-)標本(第3～13組)共310例, HBV-DNA陽性率為22.9%。HBsAg(+)標本(第1～6組)共329例, HBV-DNA陽性率為79.3%, HBsAg(-)標本(第7～13組)共171例, HBV-DNA陽性率為0。

HBeAg(+)標本與HBeAg(-)標本對比, 差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05), 兩者HBV-DNA平均含量比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。HBsAg(+)標本與HBsAg(-)標本對比, 差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05), 兩者的HBV-DNA平均含量對比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表1。

3 討論

乙型肝炎病毒感染為一種世界范圍流行的疾病, 我國是HBV的高發(fā)地區(qū), 目前該疾病已成為一個嚴重的社會安全問題。臨床及時明確診斷患者疾病, 對于提高臨床預后治療效果顯著。HBV感染的病原學診斷依據(jù)是根據(jù)免疫血清學方法檢測HBV-M以及分子生物學方法檢查HBV-DNA。HBV-M主要用于評價HBV免疫情況, 而HBV-DNA則為最直接和可靠的病毒復制標志, 也可作為直接判斷HBV感染的重要依據(jù)［2］。

HBsAg為臨床診斷HBV感染最常用的、敏感性最高的血清學標志物。HBV-DNA與HbeAg具有較高的相關性, 為判定HBV復制的一個有效指標, 其中HBV-DNA檢出率最高, 檢出率為100.0%, 且具有較高的測定均值。HBV-DNA與HBeAg之間呈正相關性, 表明病毒復制活躍, 具有較強的傳染性, 同時也表明HBeAg為HBC復制活躍的一個重要標志［3］。小三陽組患者的HBeAg雖為陰性, 但病毒未停止復制, 僅表現(xiàn)為復制有所減少或部分患者有病毒基因變異發(fā)生。這樣出現(xiàn)的感染對患者造成的傷害更為嚴重, 甚至會惡化為肝癌或肝硬化。HBsAg陽性而HBcAb陽性的HBV感染患者中, 分析HBV-DNA檢出陽性, 可能是因HBV前C信號肽裂解位點發(fā)生變異后會HBeAg的翻譯產(chǎn)生影響后加重, 導致細胞中蓄積大量的HBeAg前體, 分析這可能是HBV感染患者血清HBeAg顯示為陰性的主要原因［4］。第5組中, HBsAg以及HBsAb顯示陽性的5例患者中, 1例HBV-DNA顯示為陽性, 檢出率為20.0%, 分析該情況發(fā)生的原因可能是因其他血清標志物濃度太低, 采用免疫法不能準確的檢出。第6組中HBsAg陽性4例, 其中僅有1例HBV-DNA顯示為陽性,檢出率為25.0%, 分析可能是因HBV處于活躍早期, 血清中尚未出現(xiàn)其他標志物, 因此也存在感染發(fā)生的可能性。在第7～8組中, 均無HBV-DNA被檢出, 分析可能是因注射乙肝醫(yī)療或既往感染而導致, HBV復制受到嚴重的抑制, 無明顯的傳染性。在第9～13組中, 也未檢出HBV-DNA, 分析可能是因樣本檢測方法、檢測儀器或試劑差異或樣本數(shù)量太少等原因影響檢出結果。

綜上所述, 臨床通過定量測定HBV-DNA, 可明確機體病毒復制狀況下最特異、最敏感指標, 而通過測定HBV-M則可反映病毒感染發(fā)生后機體免疫應答情況以及轉歸過程。臨床在診斷乙型肝炎疾病時, 應綜合檢測血清學指標以及HBV-DNA, 結合采用實時熒光定量聚合酶鏈反應法, 可顯著提高臨床診斷準確性, 為之后的臨床治療提供可參考的依據(jù)。

［1］ 趙克開.乙型肝炎病毒DNA定量檢測臨床應用的若干問題與思考.中華傳染病雜志, 2014, 32(6):321.

［2］ 郭曉紅.恩替卡韋對乙型肝炎病毒DNA陽性肺結核患者肝功能干預的作用.中國醫(yī)院藥學雜志, 2014, 34(3):226.

［3］ 許達峰.乙型肝炎病毒DNA與肝癌轉移復發(fā)的關系及外科干預策略.中華外科雜志, 2013, 51(10):928.

［4］ 康文.原發(fā)性肝癌患者圍手術期乙型肝炎病毒DNA的變化及其影響因素.中華肝膽外科雜志, 2013, 19(9):681.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.22.023

2014-10-30］

450000 河南省中醫(yī)藥研究院附院化驗室