牛銀萍

人巨細胞病毒感染母嬰傳播與母乳喂養(yǎng)

牛銀萍

目的分析人巨細胞病毒感染（HCMV）母嬰傳播與母乳喂養(yǎng)的關系。方法100例疑似為人巨細胞病毒感染患兒， 采用應該熒光定量PCR（FQ-PCR）方法檢測患兒及母親的HCMV-DNA含量。結果母乳HCMV-DNA陽性率為72%， 陰性率為28%。母乳HCMV-DNA陽性與患兒血HCMV-PP65抗原數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）， 但母乳HCMV-DNA陽性、陰性與患兒血HCMV-DNA配對差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結論HCMV傳播可通過母乳喂養(yǎng)導致嬰兒HCMV感染， 是其主要獲得性途徑。

人巨細胞病毒感染；母嬰傳播；母乳喂養(yǎng)

人巨細胞病毒（HCMV）是導致嬰幼兒發(fā)生多系統(tǒng)疾病的最為常見且主要的病原體［1］， 嬰幼兒在HCMV感染后，輕者腹瀉， 重者肝功能異常、血液系統(tǒng)疾病， 甚至死亡。通常HCMV感染嬰幼兒會發(fā)生消化、血液、呼吸等系統(tǒng)疾病，積極預防HCMV感染， 認識HCMV感染傳播知識是十分重要的。因此， 本文采用FQ-PCR檢測母乳中HCMV， 探討HCMV母嬰傳播與母乳喂養(yǎng)的關系， 分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本組100例研究對象均選自本院2012年3月～2013年10月收治的疑似為HCMV感染患兒， 同時收納患兒母親；患兒年齡1 d～6個月， 母親年齡20～34歲。

1.2 檢測方法 母親均于產(chǎn)后第2 d或就診第2 d采集乳汁標本， 母親先清潔乳頭， 后自我擠壓乳頭， 分數(shù)次擠出乳汁3～5 ml， 置入無菌管管中， 立即送檢。同時分別抽取1 ml和3 ml患兒靜脈血， 注入EDTA抗凝劑的無菌管中， 搖晃均勻，立即送檢。

利用FQ-PCR法對標本DNA含量進行檢測。乳汁檢測時，對其進行5 min 12000 r/min離心， 沉淀， 取內含不溶于水物質的50 μl提取液進行打勻， 在吸取標本時， 若吸頭嘴太細無法吸取， 或取樣后吸頭堵塞， 可剪掉吸頭嘴一截再進行吸取。在100℃環(huán)境中靜置10 min， 必要時可再次在4℃環(huán)境中靜置8～12 h， 使病毒顆粒裂解充分， 然后對其行5 min 12000 r/min離心， 取5 μl上清液進行PCR擴增。

在血標本檢測時， 在1 ml靜脈血的離心管中添加1 ml生理鹽水， 并輕微混勻， 順著試管壁將2 ml混合血液緩慢倒入2 ml淋巴細胞分離液試管中， 靜置行15 min 2500 r/min離心， 吸取中間細胞層置入離心管中， 行5 min 10000 r/min離心， 沉淀后取DNA50 μl提取液后打勻。在100℃環(huán)境中靜置10 min， 后行5 min 12000 r/min離心， 取5 ml含病毒DNA上清液行PCR擴增。

在擴增時， 取若干反應管， 分別加入上清液各5 μl， 行1 min 6000 r/min離心。按照對應順序， 設置陰性質控品及陽性定理孔參考平梯度。

1.3 評判標準［2］使用熒光顯微鏡， 對標本進行400X 倍數(shù)分析， 陽性：細胞熒光呈蘋果綠， 陽性細胞數(shù)超過1個。

1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 母乳標本檢測分析 100份母乳標本通過檢測， HCMVDNA陽性率為72%（72/100）， 陰性率為28%（28/100）。72例HCMV-DNA陽性標本中， HCMV-DNA拷貝數(shù)在1.0×103～6.4×106 ml， 平均為2.0×105 ml。

2.2 母乳HCMV-DNA與配對患兒血HCMV-PP65抗原關系72例母乳HCMV-DNA陽性標本經(jīng)與患兒血HCMV-PP64抗原進行配對， 陽性率為90.3%（65/72）， 陰性率為9.7%（7/72）；28例母乳HCMV-DNA陰性標本與患兒血HCMV-PP65抗原進行配對， 陽性率為67.9%（19/28）， 陰性率為32.1%（9/28）。數(shù)據(jù)間對比， 差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

2.3 拷貝數(shù)對比 母乳HCMV-DNA陽性與患兒血HCMVDNA拷貝數(shù)值在2.3×103～6.4×106ml， 平均為4.1×105ml；母乳HCMV-DNA陰性標本與患兒拷貝數(shù)值是在1.0×103～4.3×106ml， 平均為2.4×105ml。差異數(shù)據(jù)無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

3 討論

HCMV廣泛分布在人群中， 其感染多呈隱性特征， 但對于免疫功能低下， 或存在嚴重疾病患者來說， HCMV感染會誘發(fā)嚴重系統(tǒng)性并發(fā)癥， 對患者生命安全造成威脅。通常大部分育齡期女性曾HCMV感染， 若孕婦為HCMV隱性感染，在妊娠期間受到激素和生理變化的刺激， 會激活HCMV， 并逐漸增加， 乳汁是存在HCMV感染重要地方， 屬于重要傳染源。HCMV感染患兒在吸允排毒母乳或接觸感染母親的體液等都會獲得HCMV感染， 嬰幼兒在HCMV感染后， 會對嬰幼兒成長發(fā)育、視力聽力等均帶來嚴重損害［3］。因此加強分析母乳喂養(yǎng)對HCMV感染傳播的關系， 對預防嬰幼兒HCMV感染起到顯著意義。母乳中含有促進嬰幼兒生長發(fā)育的諸多重要營養(yǎng)物質， 并包含各種抗病物質， 但母乳是母親體液重要組成部分， 會對病原體傳播提供快捷條件， 通過母乳喂養(yǎng)可促進傳染病的傳播， 為此對母乳HCMV-DNA檢測， 能夠及時掌握產(chǎn)婦感染情況及對新生兒的預防及治療情況。在本組研究中， 母乳HCMV-DNA陽性率為72%， 陰性率為28%。由此可見， HCMV感染患兒中， 母親乳汁HCMV具有較高的陽性率。而部分患兒可通過接觸母親活動性體液， 如產(chǎn)道分泌物、體液、飛沫等， 造成HCMV感染。HCMV-DNA陽性與患兒血HCMV-PP65抗原數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。由結果可以看出， 嬰幼兒可以通過母乳喂養(yǎng)而出現(xiàn)HCMV感染。但母乳HCMV-DNA陽性、陰性與患兒血HCMV-DNA配對無明顯差異（P＞0.05）。說明HCMV感染與母乳喂養(yǎng)無較大關聯(lián)性， HCMV本身致病強弱及嬰幼兒個體差異等因素，均是造成HCMV感染的重要因素。

總之， HCMV傳播可通過母乳喂養(yǎng)， 導致嬰兒HCMV感染， 是其主要獲得性途徑［4］。對于母乳喂養(yǎng)， 對于足月成熟嬰幼兒來說， 若HCMV感染母乳， 建議采用母乳喂養(yǎng)， 其中營養(yǎng)物質及免疫物質豐富， 且存在HCMV感染抗體， 使正常嬰幼兒形成天然自動-被動聯(lián)合免疫效應。對于早產(chǎn)兒或免疫缺陷患兒來說， 應停止HCMV感染母乳喂養(yǎng)， 或將其消毒后再進行食用。

［1］ 陳倩， 鐘天鷹， 張其華.熒光定量PCR法檢測母乳巨細胞病毒感染和母嬰傳播.中國優(yōu)生與遺傳雜志， 2005， 13（11）:42-43.

［2］ 夏秀蘭， 張啞欽， 李輝.山西農(nóng)村耍幼兒智能發(fā)育狀況分析.中國婦幼保健， 2009， 24（20）:2795-2797.

［3］ 賴源， 朱純華， 覃亞斌， 等.人巨細胞病毒感染母嬰傳播與母乳喂養(yǎng).實用預防醫(yī)學， 2012， 19（9）:1406-1408.

［4］ 余鐘聲， 鄭季彥， 陳黎勤， 等.嬰兒人巨細胞病毒感染病原學和臨床分析.中華傳染病雜志， 2006， 24（5）:333-337.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.07.197

2014-11-03］

473000 河南省南陽市第二人民醫(yī)院兒二科