宋捷

哈藥集團(tuán)生物工程有限公司

注射用奧美拉唑鈉有關(guān)物質(zhì)的方法建立

宋捷

哈藥集團(tuán)生物工程有限公司

目的：建立注射用奧美拉唑鈉有關(guān)物質(zhì)檢查方法。方法：采用高效液相色譜法，色譜柱為C18，流動相為硫酸氫四丁基溶液（取硫酸氫四丁基銨6.78g與氫氧化鈉0.8g，加磷酸鹽緩沖液（PH 7.4）溶解并稀釋至1000m l）-磷酸鹽緩沖液（PH 7.4）（磷酸二氫鈉與磷酸氫二鈉，加水溶解并稀釋至1000m l，調(diào)節(jié)PH值至7.4）-乙腈（5：69：26），流速為1.0m/m in，檢測波長為280nm。結(jié)果：奧美拉唑鈉主峰與包括降解產(chǎn)物奧美拉唑磺酰化物（5-甲氧基-2-｛［（4-甲氧基-3，5-二甲基-2-吡啶基）-甲基］-磺酰基｝1H-苯并咪唑）在內(nèi)的其他雜質(zhì)均可有效分離，峰純度符合規(guī)定，物料平衡。結(jié)論：建立的方法準(zhǔn)確可行，適用于注射用奧美拉唑鈉的質(zhì)量控制。

注射用奧美拉唑鈉；有關(guān)物質(zhì)；高效液相色譜法

奧美拉唑是一對活性旋光對映體的消旋混合物，籍由高目標(biāo)性的作用機制來降低胃酸的分泌，是胃壁細(xì)胞中酸泵的特殊抑制劑。奧美拉唑鈉為抗酸及治療消化道潰瘍類藥物，作為第一代質(zhì)子泵抑制劑，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床，并且取得公認(rèn)的療效。可用于反流性食管炎，消化性潰瘍，消化性潰瘍伴幽門螺桿菌感染，急性胃黏膜病變，Zollinger-Elison綜合征的治療。大量的臨床數(shù)據(jù)表明，其治療效果優(yōu)于H2受體拮抗劑，且耐受性好，不良反應(yīng)小，可以被廣泛應(yīng)用【1】。

1 試驗材料

注射用奧美拉唑鈉、奧美拉唑磺?；?。溶劑：去乙腈200ml，加磷酸鹽緩沖液（PH11.0）（取磷酸鈉0.34g與磷酸氫二鈉0.627g，加水溶解并稀釋至1000m l調(diào)節(jié)PH值至11.0）稀釋至1000ml。色譜柱：C18（5μm×4.6mm×250mm），Angilent1260型高效液相色譜儀（紫外檢測器）

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

采用高效液相色譜法，色譜柱為C18（5μm×4.6mm×250mm），流動相為硫酸氫四丁基溶液（取硫酸氫四丁基銨與氫氧化鈉，加磷酸鹽緩沖液PH7溶解并稀釋至1000m l）-磷酸鹽緩沖液（PH7.4）（磷酸二氫鈉與磷酸氫二鈉，加水溶解并稀釋至1000m l，調(diào)節(jié)PH值至7.4）-乙腈（5：69：26），流速為1.0m l/min，檢測波長為280nm。

2.2 溶液制備

稱取奧美拉唑磺?；锛s6mg，精密稱定，至100ml容量瓶中，加乙腈5m l使溶解，加溶劑稀釋至刻度，搖勻；精密量取上述溶液1ml,至另一個100ml容量瓶中，加溶劑使成0.6μg/ml的溶液，作為雜質(zhì)對照品溶液。取注射用奧美拉唑鈉適量，用溶劑稀釋制成每1m l中約含奧美拉唑0.1mg的溶液，作為供試品溶液。取上述供試品溶液1m l，至100m l容量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，作為對照溶液;稱取奧美拉唑?qū)φ掌芳皧W美拉唑磺?；飳φ掌愤m量，置于同一100ml容量瓶中，加溶劑稀釋成濃度分別奧美拉唑0.1mg/ml、奧美拉唑磺酰化物0.6μg/ml的溶液，作為系統(tǒng)適用性溶液。

2.3 方法驗證

相對保留時間的確定：分別取奧美拉唑?qū)φ掌芳半s質(zhì)奧美拉唑磺酰化物對照品適量，用溶劑分別稀釋制成加溶劑制成0.6μg/ ml的溶液，分別取20μl，注入液相色譜儀，相對保留時間分別為23.41、21.62.取系統(tǒng)適用性溶液20μl按照設(shè)定好的方法進(jìn)樣，連續(xù)進(jìn)六針，雜質(zhì)及主峰均得到良好的分離，分離度大于1.5，計算雜質(zhì)封面積RSD為1.5%，保留時間的RSD為0.6%，塔板數(shù)大于5000，可繼續(xù)對方法進(jìn)行詳細(xì)驗證。

溶液穩(wěn)定性試驗：取同一份注射用奧美拉唑鈉供試品溶液，分別于0、2、4、6、8小時進(jìn)樣，記錄色譜圖，結(jié)果主峰峰面積的RSD為1.5%，說明供試品溶液在8小時內(nèi)穩(wěn)定。

耐用性試驗：更換三根不同的色譜柱（三根不同廠家的C18色譜柱），流動相比例（乙腈比例變化±2%），柱溫及流速，考察各參數(shù)變化對有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果的影響，同時考察奧美拉唑磺?；锱c奧美拉唑塔板數(shù)及二者分離度的影響，結(jié)果表明，各參數(shù)變化對有關(guān)物質(zhì)結(jié)果無明顯影響，奧美拉唑磺酰化物與奧美拉唑的塔板數(shù)及二者分離度均在規(guī)定范圍內(nèi)。耐用性試驗符合規(guī)定。在各種色譜條件下，對稱因子在0.8-1.2之間，塔板數(shù)均大于5000.

專屬性：使用紫外檢測器，對供試品進(jìn)行酸、堿、氧化、高溫及強光破壞實驗，各破環(huán)條件下主峰均有下降，比較在波長260nm、270nm、280nm、290nm、300nm下測定的雜質(zhì)情況，在280nm下測定的響應(yīng)值最大，確定檢測波長為280nm。在破環(huán)條件下，檢測的各相鄰雜質(zhì)峰與主峰均可良好分離，分離度符合規(guī)定，方法專屬性好。

2.4 樣品檢查

取注射用奧美拉唑鈉，依據(jù)2.2中方法分別制備雜質(zhì)對照品溶液、供試品溶液、對照溶液，按照既定檢測方法進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢測，精密量取對照溶液20μl，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)儀器靈敏度，使主成份色譜峰的峰高約為滿量程的20%-25%，準(zhǔn)確量取對照溶液、供試品溶液、雜質(zhì)對照品溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成份峰保留時間的2.5倍，結(jié)果供試品溶液的色譜圖中單個雜質(zhì)峰面積均小于對照溶液色譜圖中的主峰面積；奧美拉唑黃酰化物的峰面積小于對照溶液中主峰面積的0.3倍；各雜質(zhì)峰面積的和小于對照溶液主峰面積的1.5倍。

3 結(jié)論

注射用奧美拉唑鈉有關(guān)物質(zhì)檢測，需要將奧美拉唑主峰、已知雜質(zhì)奧美拉唑黃?；锛捌渌s質(zhì)峰有效分離，按照所確定的方法進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢測，方法學(xué)研究表明，所確立的方法可以達(dá)到準(zhǔn)確檢測、對注射用奧美拉唑鈉產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行正確評價的目地，方法準(zhǔn)確可行，靈敏度高，耐用性好。

[1]遇蘇寧，張三奇，楊春娥等。質(zhì)子泵的研究進(jìn)展［J］。中國新藥與臨床雜志，2002.21（11）：680-682.

宋捷（1988-），女，黑龍江省哈爾濱市，本科，哈藥集團(tuán)生物工程有限公司，化驗員。