何斌，陸征，陳潔，付書林，陳夏冰

摘要：為研究阿莫西林在肉雞體內的藥物動力學特征，為獸醫(yī)臨床用藥提供依據(jù)，試驗選取12羽成年三黃肉雞，阿莫西林口中灌服給藥，利用高效液相色譜法測定血漿中藥物濃度。結果表明，阿莫西林口灌給藥（15 mg/kg.BW） 后，其主要藥動學參數(shù)：t1/2α為（0.627±0.071） h，t1/2ka為（0.139±0.011） h，t1/2β為（1.800±0.181） h，AUC為（6.005±0.641） μg/（mL·h），Tmax為（0.476±0.049） h，Cmax為（2.293±0.152） μg/mL。說明阿莫西林口灌給藥后，在成年三黃雞體內吸收迅速，消除較快。

關鍵詞：阿莫西林;高效液相色譜;肉雞;藥物動力學

中圖分類號：R969.1;R978.1 ? ? ? ?文獻標識碼：A ? ? ? ?文章編號：0439-8114（2014）23-5813-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.23.048

阿莫西林（Amoxicillin）又稱羥氨芐青霉素，人工半合成β-內酰胺類抗菌藥物，為氨芐西林同系物[1]。性質穩(wěn)定、耐酸，在胃酸中較穩(wěn)定、吸收迅速、分布廣泛，被WHO推薦為首選口服抗生素[2-4];同時其有殺菌作用較強、副作用少、劑型多樣、與其他藥物聯(lián)用方便和價格便宜等優(yōu)點，現(xiàn)已廣泛用于獸醫(yī)臨床，用于防治各種敏感菌所引起的家禽消化、呼吸、生殖系統(tǒng)以及全身感染性疾病[5-8]。本研究就阿莫西林在肉雞體內的藥物動力學進行了研究，旨在為家禽養(yǎng)殖合理用藥提供理論指導，對家禽養(yǎng)殖業(yè)中細菌性疾病的防控具有重要意義。

1 ?材料與方法

1.1 ?試驗材料

美國Agilent 1100型高效液相色譜儀，紫外檢測器，Agilent ZORBAX SB-Aq柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）;原料藥品由四川華蜀動物藥業(yè)有限公司提供，阿莫西林原料藥，批號：20100522，含量98.2%;阿莫西林對照品，中國藥品生物制品檢定所提供，批號：0409-9706，含量86.2%;乙腈為色譜純，其他試劑為分析純。

1.2 ?試驗方法

1.2.1 ?藥物動力學試驗設計 ?試驗前將12羽成年三黃肉雞適應飼喂7 d，給藥前禁食12 h，阿莫西林以15 mg/kg體重的劑量口灌給藥。

口灌給藥后，分別于0.083、0.167、0.25、0.50、0.75、1、2、4、6、8、12 h采血2 mL左右，置于已添加肝素鈉的聚丙烯離心管中，以2 000 r/min離心15 min，取上清液于-20 ℃冷凍保存，待測定。

1.2.2 ?色譜條件 ?色譜柱為Agilent ZORBAX SB-Aq柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）;檢測波長為210 nm;流動相為乙腈∶0.02 mol/L KH2PO4（pH 2.5）=5∶95;流速為1.0 mL/min;進樣量為20 μL;柱溫為（30±0.1）℃[9，10]。

1.2.3 ?血漿樣品處理 ?準確吸取血漿樣品0.5 mL，加入1.5 mL乙腈沉淀蛋白，渦旋振蕩1 min，3 000 r/min離心10 min;取上清液于10 mL離心管中，再加入3 mL二氯甲烷，渦旋振蕩1 min，3 000 r/min離心10 min，取上清液20 μL進樣分析，記錄色譜圖[11-13]。

1.2.4 ?血漿標準曲線的建立 ?向9支5 mL聚丙烯離心管中各加入0.5 mL空白血漿，留一支作空白對照，然后依次加入阿莫西林對照品標準工作液，得到藥物濃度依次為0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、2.50、5.00、10.00 μg/mL的血漿樣品。分別按照“1.2.3”的方法處理后，進樣分析。以測得的阿莫西林的峰面積（A）為橫坐標，藥物濃度（C）為縱坐標，建立標準曲線，求得阿莫西林的回歸方程為C= 0.027 4A+0.017 6，r=0.999 7。

1.2.5 ?方法學驗證 ?取空白血漿0.5 mL，添加適量阿莫西林對照品標準工作液，使其濃度分別為10.00、1.00、0.10 μg/mL，按照“1.2.3”的方法處理，并進行HPLC檢測，每個濃度設置5個平行，測定結果為日內變異系數(shù)在5%以內;重復檢測5 d，測定結果為日間變異系數(shù)在10%以內。阿莫西林的血漿萃取回收率為90.52%～97.62%;最低檢測限（LOD）、最低定量限（LOQ）分別為0.01、0.04 μg/mL。

1.2.6 ?數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析 ?方法學驗證考察數(shù)據(jù)采用SPSS軟件分析處理;藥-時曲線圖和消除動態(tài)圖采用Excel軟件繪制;藥物動力學模型擬合及參數(shù)計算均采用3P97藥動學軟件分析，藥物動力學參數(shù)可根據(jù)公式進行計算。

2 ?結果與分析

2.1 ?色譜行為

通過反復多次試驗所建立的色譜條件，基線平穩(wěn)，藥物峰形對良好，樣品中阿莫西林在色譜條件下均能與雜質峰良好分離（圖1、圖2）。結果表明，本測定方法簡便，穩(wěn)定，檢測效率高，色譜峰良好。

2.2 ?藥物動力學數(shù)據(jù)

按照試驗設定方案進行給藥和樣品處理，經(jīng)高效液相色譜分析檢測、軟件分析計算，肉雞口灌阿莫西林后各時間點體內血藥濃度見表1，藥物動力學參數(shù)見表2。由表1、表2可見，肉雞口灌阿莫西林后，在體內吸收迅速，達峰時間快，達峰濃度較高，藥-時曲線（圖3）符合有吸收二室開放模型，其藥-時方程為C=1.568 1 e-1.106 3 t + 2.045 9e-0.385 1 t - 3.614 0e-4.988 3 t。

3 ?小結與討論

本試驗中，建立了阿莫西林的高效液相色譜檢測方法，該方法簡單、快速。試驗中選擇210 nm作為檢測波長，有效地提高了檢測的靈敏度，使藥物與雜質得到了有效分離。

阿莫西林口灌后，藥-時曲線符合有吸收二室開放模型，與Hernandez等[14]報道的在鴿體內的藥動學模型相符，Hernandez等[14]報道阿莫西林在鴿體內的t1/2β為1.22 h，與本試驗結果相似，這可能是由于兩者同屬禽類，所以阿莫西林在其體內的半衰期相近;與曾振靈等[15]報道的阿莫西林在豬體內的t1/2β為3.28 h相比較短，這可能是由于禽類的體溫高，對藥物代謝快所致。而阿莫西林在豬體內Tmax為0.53 h、在鴿體內Tmax為0.33 h，均與肉雞體內的達峰時間相近，這說明阿莫西林在這些動物體內的吸收速度基本相近，雞體內肌胃對阿莫西林的吸收沒有影響。阿莫西林的藥動學數(shù)據(jù)表明，阿莫西林在肉雞體內吸收迅速、達峰時間短，消除較快。

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