余瑛

卵巢皮質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞增生的免疫組化表達(dá)

余瑛

目的 探討卵巢皮質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞增生的免疫組化表達(dá)并對基因進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測。方法 隨機(jī)選取40例卵巢皮質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞增生伴子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、平滑肌瘤等疾病增生的卵巢皮質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行免疫組織化學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)檢測。另外，觀察內(nèi)膜癌各項(xiàng)癌基因蛋白、腫瘤細(xì)胞增殖的表達(dá)。結(jié)果 良性與惡性腫瘤檢測結(jié)果中超過60%存在C-erbB-2表達(dá)，對合并有惡性腫瘤的卵巢皮質(zhì)增生細(xì)胞Rb進(jìn)行監(jiān)測發(fā)現(xiàn)增生間質(zhì)細(xì)胞有12例表達(dá)，占60%。所有皮質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞增生病例中合并內(nèi)膜癌患者2例且增生間質(zhì)細(xì)胞p53有表達(dá)。另8例患者合并子宮內(nèi)膜癌，癌基因C-erbB-2和Rb有表達(dá)。2例良性腫瘤患者有該2種指標(biāo)的共同表達(dá)。結(jié)論 伴有子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌的卵巢增生的皮質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞C-erbB-2、Rb表達(dá)陽性，在子宮肌瘤等良性病變C-erbB-2和PCNA表達(dá)陽性，p53在增生間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)較少。血E2及P檢測均正常，在子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞各項(xiàng)免疫組化染色多呈陽性。

卵巢；皮質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞增生；免疫組織學(xué)；內(nèi)膜癌；平滑肌瘤

卵巢皮質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞增生易引發(fā)瘤樣病變，以發(fā)生增生的間質(zhì)細(xì)胞呈漩渦狀排列結(jié)節(jié)或卵巢全皮層增厚且卵巢內(nèi)濾泡發(fā)育停止為主要表現(xiàn)[1-2]?；颊咭坏┌l(fā)病多表現(xiàn)為雄激素水平過高或乳腺癌等發(fā)病率升高。本文將探究卵巢皮質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞增生相關(guān)基因的表達(dá)，并對伴發(fā)癌的癌基因與抑癌基因進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年12月～2013年12月江西省贛州市腫瘤醫(yī)院婦科手術(shù)全切子宮及附件患者標(biāo)本共40例?；颊吣挲g26～64歲，平均年齡（45.3±19.2）歲。所有患者均有不同程度陰道出血、腹部包塊等。其中20例患者為卵巢皮質(zhì)增生伴有子宮內(nèi)膜癌及卵巢癌；20例患者伴子宮平滑肌瘤、月經(jīng)紊亂及內(nèi)膜息肉。所有患者入院時(shí)一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 方法 取雙側(cè)卵巢及子宮標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)切片HE染色，觀察其形態(tài)學(xué)改變。卵巢增生的間質(zhì)細(xì)胞及子宮內(nèi)膜癌標(biāo)本進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測[3-4]。S-P試劑盒按照實(shí)驗(yàn)步驟逐步完成。進(jìn)行血清雌二醇、孕酮放射免疫檢測。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 對本組研究的數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計(jì)數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 免疫組織化學(xué)染色 見表1。

2.2 血液學(xué)檢測 在手術(shù)治療后3d內(nèi)，所有患者E2及P水平均在正常指標(biāo)范圍內(nèi)。

表1 良性與惡性腫瘤檢測結(jié)果(n)

3 討論

本次試驗(yàn)對發(fā)生卵巢皮質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞增生合并良性及惡性疾病的患者其卵巢皮質(zhì)增生間質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)對比。結(jié)果顯示，伴有惡性腫瘤的增生間質(zhì)細(xì)胞主要以C-erb-2和Rb癌基因?yàn)橹?，伴有良性腫瘤發(fā)生增生間質(zhì)細(xì)胞主要以Rb和PCNA表達(dá)為主。PCNA（增殖細(xì)胞核抗原）在腫瘤組織中分布較正常組織中分布更為廣泛，是判斷各種惡性腫瘤細(xì)胞增殖及惡性程度的重要指標(biāo)，同時(shí)還能夠在一定程度上對預(yù)測腫瘤細(xì)胞分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及化療效果發(fā)揮作用。另外，它參與細(xì)胞DNA損傷修復(fù)、細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換調(diào)控、染色體重組及DNA甲基化等，能夠反映腫瘤細(xì)胞的代謝和DNA、RNA的合成狀態(tài)，與多種腫瘤的分化、浸潤、淋巴結(jié)或臟器轉(zhuǎn)移、腫瘤復(fù)發(fā)等有關(guān)。合并內(nèi)膜癌、卵巢癌惡性腫瘤細(xì)胞C-erb-2、Rb及p53均為過度表達(dá)。Rb基因是遺傳性呈視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤中發(fā)現(xiàn)的抑癌基因。該基因位于13q14區(qū)，是G1期Gyclin/CDK復(fù)合物介導(dǎo)的磷酸化作用共同的限速底物，其發(fā)生突變或某些DNA病毒基因的產(chǎn)物可結(jié)合去臨滑狀態(tài)的Rb，導(dǎo)致細(xì)胞過度增殖。它的突變有可能與卵巢癌的發(fā)生和早期行為有關(guān)。對絕經(jīng)后卵巢間質(zhì)細(xì)胞增生婦女進(jìn)行檢查發(fā)現(xiàn)其睪酮水平僅在卵巢靜脈中有所增高。本次試驗(yàn)中對雌激素、孕酮等指標(biāo)進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)血中雌激素水平未有明顯變化。發(fā)生腫瘤樣病變多由于間質(zhì)增生細(xì)胞導(dǎo)致雌性激素紊亂所引起。C-erB-2與表皮生長因子受體EGFr同源[5-6]。不同腫瘤的發(fā)生與發(fā)展均與該指標(biāo)擴(kuò)增及基因表達(dá)有關(guān)。P53基因是與人類腫瘤關(guān)系最密切的腫瘤相關(guān)基因，也是約半數(shù)惡性腫瘤的代表性抑癌基因，具有調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄、抑制細(xì)胞生長、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。當(dāng)細(xì)胞DNA損傷、發(fā)生腫瘤時(shí)，該基因蛋白積聚，可通過PCR或免疫組化法檢測出突變型P53,因此，P53在正常子宮內(nèi)膜和增殖型子宮內(nèi)膜中無表達(dá)，但在子宮內(nèi)膜癌中有陽性表達(dá)。該基因在子宮內(nèi)膜癌發(fā)病過程中陽性表達(dá)率約為17%～75%。本次試驗(yàn)結(jié)果顯示，良性與惡性腫瘤檢測結(jié)果中超過60%存在C-erbB-2表達(dá)。P53和Rb基因?qū)儆谝职┗?，具有生長負(fù)調(diào)節(jié)作用，可有效抑制細(xì)胞惡性生長[7-9]。當(dāng)抑癌基因結(jié)構(gòu)遭到破壞時(shí)會(huì)導(dǎo)致突變且不表達(dá)正常產(chǎn)物；或在蛋白水平抑制抑癌基因產(chǎn)物的活性導(dǎo)致細(xì)胞生長負(fù)調(diào)節(jié)基因作用失常，導(dǎo)致細(xì)胞惡性生長。本實(shí)驗(yàn)對合并有惡性腫瘤的卵巢皮質(zhì)增生細(xì)胞Rb進(jìn)行監(jiān)測發(fā)現(xiàn)增生間質(zhì)細(xì)胞有12例表達(dá)，占60%。所有病例中僅有2例合并內(nèi)膜癌患者增生間質(zhì)細(xì)胞P53有表達(dá)。8例合并有子宮內(nèi)膜癌病C-erbB-2和Rb 2種癌基因在增生的間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)；伴有良性腫瘤僅有2例兩種癌基因共同表達(dá)。

Milde在對子宮內(nèi)膜癌Rb研究中發(fā)現(xiàn)正常內(nèi)膜上皮細(xì)胞，增生內(nèi)膜上皮細(xì)胞及內(nèi)膜癌細(xì)胞均呈陽性表達(dá)。而Li在研究中發(fā)現(xiàn)在不同細(xì)胞周期p53和Rb可表現(xiàn)為弱表達(dá)和不表達(dá)。本次試驗(yàn)中惡性腫瘤病例癌細(xì)胞C-erbB-2、Rb、p53和PCNA均為過度表達(dá)，與其他研究報(bào)道相一致。說明癌基因和抑癌基因在子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。

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Objective To investigate the immunohistochemical expression of ovarian stromal cells proliferation and to detect the expression of the gene for immunohistochemistry. Methods 40 cases of stromal cells proliferation with endometrial cancer, Ovarian Cancer, Leiomyoma were selected randomly, immunohistochemistry staining was used to evaluate the cell proliferation. In addition, the expression of oncogene protein and the proliferation of tumor cells were also observed. Results The results showed that the positive rate of C-erbB-2 in both begion and malignant tumor cells are more than 60%, from the cbservation of Rb in malignant tumor with ovary cortex proliferation, the positive rate is 60% with 12 cases shows the expression of cell proliferation. p53 showed only 2 cases expressed from stromal cells proliferation with endometrial cancer patients,furthermore, C-erbB-2 and Rb showed 8 cases expressed from stromal cells proliferation complicated with endometrial cancer patients. For begion tumor cases, only 2 showed C-erbB-2 and Rb gene expressed. Conclusion C-erbB-2 and Rb are positive in proliferating stromal cells in the cases of cell proliferation of ovary cortex complicated with endometrium carcinoma or ovarian carcinoma, C-erbB-2 and PCNA showed positive in begion tumor cases, p53 shows little expressed in proliferating stromal cells. E2 and P test shows normal, immunohistochemical staining of endometrium carcinoma cells are positive.

Ovary; Stromal cell proliferation; Immunohistology; Endometrial carcinoma; Leiomyoma

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.22.008

江西 341000 江西省贛州市腫瘤醫(yī)院 （余瑛）