郭 花,劉蓮勤,張 平,顧俊蓮,王 玥,劉亞男,李 揚(吉林大學基礎醫(yī)學院病理生理學教研室,吉林長春130021)
Endostatin對小鼠巨噬細胞極化的影響及機制研究
郭花,劉蓮勤,張平,顧俊蓮,王玥,劉亞男,李揚△
(吉林大學基礎醫(yī)學院病理生理學教研室,吉林長春130021)
目的:觀察endostatin對小鼠巨噬細胞極化的影響。方法: Endostatin轉染RAW264.7細胞和小鼠骨髓巨噬細胞(BMDMs) ; RT-PCR、ELISA、HE染色和MTT檢測其對RAW264.7細胞的影響;流式細胞術、ELISA、real-time PCR、Western blot和螢光素酶報告基因檢測巨噬細胞極化標記物和NF-κB轉錄活性。結果:表達質(zhì)粒能使RAW264.7細胞和BMDMs高表達endostatin; HE染色和MTT發(fā)現(xiàn)endostatin使RAW264.7細胞的形態(tài)發(fā)生變化并抑制其增殖;流式細胞術、ELISA和real-time PCR發(fā)現(xiàn),endostatin能使RAW264.7細胞和BMDMs高表達NOS2、IL-6和IL-12p40(M1型巨噬細胞標志物),同時使CD206、IL-10和Arg-1(M2型巨噬細胞標志物)表達下降或不變;螢光素酶報告基因發(fā)現(xiàn)endostatin使NF-κB的轉錄活性增加; Western blot發(fā)現(xiàn)p-IκBα、p-p65和p-Stat1表達增加,而p-Stat3表達下降。結論: Endostatin可能通過調(diào)節(jié)NF-κB通路使小鼠巨噬細胞向M1型發(fā)生極化。
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