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        植物肽的生理功能及其在飼料中的應(yīng)用研究進(jìn)展

        2015-01-25 20:13:07應(yīng)朝陽林忠寧楊有泉
        中國飼料 2015年12期
        關(guān)鍵詞:多肽斷奶氨基酸

        陸 烝, 應(yīng)朝陽, 鄭 斌,林忠寧,楊有泉

        (福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所,福建福州 350013)

        肽是由氨基酸通過酰胺鍵 (肽鍵)連接而成的、分子質(zhì)量小于常見蛋白質(zhì)的氨基酸聚合物(闞建全,2008)。2個(gè)氨基酸構(gòu)成的肽稱為二肽,3個(gè)氨基酸構(gòu)成的肽稱為三肽,依此類推,若一種肽含有少于10個(gè)氨基酸,則為寡肽或小肽,超過此數(shù)的肽則統(tǒng)稱為多肽。植物肽,即來源于植物的肽類物質(zhì),包括以植物為原料(植物源蛋白或氨基酸),經(jīng)水解和分離純化等過程制備的寡肽或多肽,以及天然存在于植物中的肽類,如谷胱甘肽、環(huán)肽、防御素(植物抗菌肽)等。

        1 植物肽的類別

        根據(jù)植物肽的原料來源不同,可將其分為:大豆(粕)肽、花生(粕)肽、茶蛋白肽、油菜籽粕肽,苜蓿肽、棉籽(粕)肽、大米肽、玉米肽、小麥肽、棕櫚仁粕多肽等。

        按照植物肽所含氨基酸的數(shù)目,可分為:植物寡肽(含2~10個(gè)氨基酸,也稱小肽或低聚肽)和植物多肽(所含氨基酸數(shù)目大于11個(gè),如環(huán)肽)。

        根據(jù)其生理作用可分為:營養(yǎng)肽和功能肽(如降壓肽、抗氧化肽、促生長肽、抗菌肽等)。

        2 植物肽的制備

        植物肽的制備方法主要有酸水解法、化學(xué)(液相或固相合成)法、酶水解法、生物發(fā)酵法、重組DNA技術(shù)合成等(喬偉等,2006)。其中酸水解法工藝簡單、成本低,但因氨基酸受損嚴(yán)重,水解難控制而較少應(yīng)用;液相或固相化學(xué)合成法可制成任意需要的活性肽,但因成本高、副反應(yīng)物及殘留化合物等多因素而制約其發(fā)展;DNA重組技術(shù)制取活性肽尚處于實(shí)驗(yàn)室研究階段 (董文賓等,2005)。酶法及生物發(fā)酵法的安全性高,生產(chǎn)條件溫和,可定位生產(chǎn)特定的肽,成本低,已成為肽生產(chǎn)的最主要方法。

        酶法和生物發(fā)酵法制備植物肽方面已有許多研究和報(bào)道。張曉駟和馮靜波(2004)采用胃蛋白酶和堿性蛋白酶酶解大豆蛋白和谷蛋白,經(jīng)離心、提純、噴霧干燥等工藝制備出功能性蛋白短肽。顧斌等(2011)以白地霉和枯草芽孢桿菌組合發(fā)酵菜籽粕,最佳工藝條件為:料水比1∶1.2、CaCl20.1%、NH4Cl 1.5%,多肽得率最大,達(dá)到12.81%。劉曉艷等(2012)采用混菌(枯草芽孢桿菌和米曲霉)發(fā)酵豆粕,利用分泌的蛋白酶降解基料制備多肽飼料,最終發(fā)酵物中多肽得率達(dá)54.89%,發(fā)酵產(chǎn)物中多肽含量為21.47%。殷臘生等(2009)采用固態(tài)發(fā)酵法生產(chǎn)棕櫚仁粕多肽飼料,以取自馬來西亞的棕櫚仁粕為培養(yǎng)基質(zhì),利用高產(chǎn)纖維素酶的絲狀真菌、高產(chǎn)菌體蛋白的酵母和高產(chǎn)蛋白酶的芽孢桿菌組合發(fā)酵生產(chǎn)出蛋白質(zhì)含量高達(dá)35%~40%、多肽組分含量為80%以上的多肽飼料,并經(jīng)初步小鼠急性毒理試驗(yàn)證明該產(chǎn)品安全無毒。周紹遷等(2011)利用堿溶酸沉法從茶渣中提取蛋白,并選用風(fēng)味蛋白酶對(duì)其進(jìn)行酶解得到多肽類酶解產(chǎn)物,添加到小豬的基礎(chǔ)日糧中,結(jié)果表明該酶解產(chǎn)物可以有效提高豬的生產(chǎn)性能,改善豬的機(jī)體免疫能力以及提高胰臟和十二指腸中消化酶的活性。

        3 植物肽的代謝機(jī)制

        傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)代謝模型認(rèn)為蛋白質(zhì)必須水解成游離氨基酸后才能被吸收利用。蛋白類飼料被動(dòng)物攝取后,在體內(nèi)蛋白酶的作用下形成游離氨基酸和肽類,肽進(jìn)一步在肽酶作用下完全水解為游離氨基酸而進(jìn)入血液循環(huán),即蛋白質(zhì)營養(yǎng)就是氨基酸營養(yǎng)(蔡元麗和謝幼梅,2009)。

        Neway和 Srnyth(1960)研究發(fā)現(xiàn),蛋白質(zhì)在小腸內(nèi)的消化產(chǎn)物除了氨基酸外,還有大量的小肽,而且肽可完整進(jìn)入腸黏膜細(xì)胞。Seal和Parker(1991)研究發(fā)現(xiàn),蛋白質(zhì)在動(dòng)物體內(nèi)不僅以游離氨基酸的形式吸收,同時(shí)也以肽的形式吸收。

        植物肽類主要是采用生物發(fā)酵法或酶解法制得。這些蛋白原料經(jīng)過微生物及酶的體外消化,使得其中的蛋白更易被動(dòng)物利用和吸收,從而減少動(dòng)物的能量消耗,此類肽添加至飼料中,可以適當(dāng)減少日糧能量和蛋白質(zhì)的濃度,而不影響生長速度,可達(dá)到更優(yōu)的增重效果,取得更好的經(jīng)濟(jì)效益(蘇從成,2007)。有研究表明,單胃動(dòng)物可以完整的肽形式大量吸收小肽 (祝平,2007)。無論是哪種動(dòng)物對(duì)肽的吸收均遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于氨基酸的吸收(劉曉艷等,2011)。小肽可以在腸道內(nèi)直接被吸收,而且吸收速度比游離氨基酸和蛋白快2~3倍,這種肽的吸收機(jī)制的提出大大促進(jìn)了肽的研究與開發(fā)(金融和王恬,2006)??梢?,與植物蛋白和氨基酸類飼料相比,植物肽更易被動(dòng)物吸收和代謝。

        4 植物肽的生理功能

        4.1 促進(jìn)蛋白質(zhì)和氨基酸的合成與吸收 肽類由氨基酸組成,分子量小,在動(dòng)物體內(nèi)小肽可以被完整吸收,其可直接參與蛋白質(zhì)的合成,并對(duì)氨基酸或肽的轉(zhuǎn)運(yùn)也有促進(jìn)作用,從而提高了動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)的利用率;小肽還有助于氨基酸的吸收和運(yùn)轉(zhuǎn),從而顯著增加動(dòng)物飼料的消化、利用率。王勇生和程宗佳(2014)報(bào)道大豆肽蛋白飼料具有穩(wěn)定的、一致的消化率。豬真回腸的大豆肽蛋白質(zhì)的消化率為95%,肉雞平均真氨基酸消化率為94.1%,且大豆肽不含有生物胺(如組胺)。不像魚粉易受新鮮度及熱加工品質(zhì)的影響,消化率為80%~95%,變異較大。

        4.2 促進(jìn)飼料中其他營養(yǎng)成分的吸收和利用研究認(rèn)為,植物蛋白中由于植酸、草酸、單寧及多酚等抗?fàn)I養(yǎng)因子的存在,顯著影響了飼料或日糧中 Ca、Zn、Cu、Mg、Fe 的生物利用率 (許金新和陳安國,2003)。而植物蛋白在經(jīng)酶法或發(fā)酵制備成肽的過程中,可以除去可溶性的低分子物質(zhì),從而降低了上述抗?fàn)I養(yǎng)因子的含量。同時(shí),肽分子可與上述礦物質(zhì)的離子形成整合物保證其可溶狀態(tài),而利于機(jī)體的吸收。

        4.3 對(duì)動(dòng)物的促生長作用 植物肽 (特別是小肽)在動(dòng)物消化道內(nèi)可被直接吸收,參與機(jī)體的生理代謝活動(dòng),從而提高其生產(chǎn)性能,促進(jìn)動(dòng)物生長。謝武華(2005)研究了植物活性肽對(duì)哺乳仔豬促生長機(jī)理,結(jié)果表明,日糧中添加植物活性肽可以提高哺乳仔豬消化道內(nèi)酶的活性,降低腹瀉指數(shù),減少仔豬死淘率,增加屠宰率,維持血液濃度,提高血清總蛋白濃度,降低血漿尿素氮濃度,且效果優(yōu)于血漿蛋白粉。初漢平(2011)研究表明,日糧中添加植物小肽可以增強(qiáng)斷奶至2月齡新西蘭兔的生長發(fā)育和免疫性能,添加量以0.06%為宜。李紹章(2004)研究表明,由植物蛋白經(jīng)生物發(fā)酵、特殊加工制成的植物小肽,作為早期斷奶仔豬的蛋白營養(yǎng)源,能使斷奶豬保持良好的生長發(fā)育速度與健康水平。

        4.4 抗菌作用 植物抗菌肽是植物自身合成的能夠防御環(huán)境中微生物侵害的一類小分子多肽,其均為陽離子多肽,有較好的熱穩(wěn)定性,不易被消化酶水解(陳彤彤等,2006)。王瓊和何清君(2000)研究報(bào)道,從化學(xué)結(jié)構(gòu)看,植物抗菌肽主要包括硫堇、植物防御素、脂轉(zhuǎn)移蛋白和橡膠素類等,均表現(xiàn)為抗菌能力強(qiáng),有較好的耐熱性。雖然不同類型抗菌肽的抗菌機(jī)制有所差異,但一般認(rèn)為,抗菌肽主要是通過作用于細(xì)胞膜,破壞其完整性而發(fā)揮抗菌作用,且大多數(shù)抗菌肽對(duì)動(dòng)物細(xì)胞無毒害作用。植物抗菌肽以其獨(dú)特的殺菌機(jī)制,可以降低動(dòng)物腸道內(nèi)有害微生物的繁殖,改善動(dòng)物腸道環(huán)境,避免腹瀉等腸道疾病,且無毒害、無殘留,在飼料中具有廣泛的應(yīng)用前景。

        5 植物肽在飼料及飼料添加劑中的應(yīng)用

        5.1 植物肽在畜禽養(yǎng)殖中的應(yīng)用 張吉鹍(2009)報(bào)道了大豆肽蛋白飼料特別適合在幼齡動(dòng)物(如哺乳期仔豬、斷奶仔豬、保育豬)飼料中使用,且效果很好。景義峰等(2011)研究了肽鉑金對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響及作用機(jī)理,采用固相+液相發(fā)酵法酶解植物蛋白生產(chǎn)的具有強(qiáng)烈誘食效果的植物源功能肽,能顯著緩解仔豬的斷奶應(yīng)激和提高生產(chǎn)性能。汪寶保等(2007)研究發(fā)現(xiàn),哺乳仔豬補(bǔ)飼料中添加植物來源的小肽制劑,有提高斷奶仔豬屠宰率的趨勢(shì)??梢源龠M(jìn)仔豬胃腸道的提早發(fā)育,從而較早地建立對(duì)早期補(bǔ)料的適應(yīng)性,減輕早期斷奶應(yīng)激綜合癥的發(fā)生。鄭云峰和龍洪年(2006)試驗(yàn)表明,仔豬日糧中添加500 mg/kg的發(fā)酵豆粕肽在促進(jìn)仔豬生長、提高飼料轉(zhuǎn)化率、預(yù)防腹瀉、減輕仔豬斷奶應(yīng)激等方面都優(yōu)于抗生素。釗守梅(2014)研究了菌肽蛋白對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能、腸道黏膜免疫功能和腸道菌群的影響,結(jié)果表明,飼喂菌肽蛋白可以明顯提高斷奶仔豬平均日增重,降低料重比和腹瀉率,并可通過增強(qiáng)革蘭氏陽性菌比例,減少革蘭氏陰性菌比例來調(diào)節(jié)腸道菌群結(jié)構(gòu),從而提高對(duì)粗蛋白質(zhì)和粗脂肪消化率,進(jìn)而提高斷奶仔豬生產(chǎn)性能。周萌(2009)研究了植物小肽對(duì)哺乳母豬、育肥豬生產(chǎn)性能和免疫性能的影響,結(jié)果表明,母豬日糧中添加4%的植物小肽降低了母豬進(jìn)食量;日糧中2%的植物小肽使母豬泌乳量提高。植物小肽可以提高育肥豬增重,降低飼料報(bào)酬,提高育肥豬平均采食量。添加4%植物小肽或血球蛋白粉有提高仔豬增重的趨勢(shì)。

        5.2 植物肽在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用 鄧岳松(2004)研究了飼料中添加植物活性小肽對(duì)史氏鱘稚魚生長的影響,結(jié)果表明,在飼料中添加0.05%~0.1%活性小肽效果較好,飼料系數(shù)和相對(duì)增重率及飼料成本均獲得較大幅度改善。試驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn),史氏鱘對(duì)添加活性肽的飼料搶食兇猛,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于不添加活性肽的飼料,這說明添加的活性肽具有一定的誘食作用。李祖華等(2005)研究報(bào)道,高比例魚粉的鰻魚飼料中,大豆多肽可以等量替代3%~5%的紅魚粉,不僅能獲得較好的飼料效率,同時(shí)也能獲得較好的經(jīng)濟(jì)效益。夏薇等(2012)研究表明,建鯉日糧中的魚粉或植物蛋白被等量蛋白肽替代后,可提高生長性能,降低餌料系數(shù),促進(jìn)魚體粗蛋白質(zhì)沉積,降低內(nèi)臟重量,優(yōu)化建鯉形體指標(biāo),并可提高建鯉的非特異性免疫力。同時(shí)可提高試驗(yàn)組建鯉血清溶菌酶、堿性磷酸酶和腸道中蛋白酶的活性。楊啟超等(2010)采用咬球法和攝食生長法相結(jié)合,系統(tǒng)地研究了植物肽、復(fù)合氨基酸,大茴香、蘇葉等中草藥對(duì)鯽魚誘食效果的影響,結(jié)果表明,鯽魚誘食效果最佳的濃度為:大茴香0.05%、蘇葉0.75%、植物肽0.25%、木香0.05%、公丁0.15%、復(fù)合氨基酸為0.35%。

        6 展望

        植物肽有廣闊的資源基礎(chǔ),可配制出優(yōu)質(zhì)的動(dòng)物飼料,且價(jià)格明顯低于優(yōu)質(zhì)動(dòng)物蛋白飼料,其所具備的吸收特性和生理功能,能夠促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體對(duì)蛋白及氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收,提高飼料的安全性和消化率。是一種安全、高效、環(huán)保的營養(yǎng)型飼料添加劑。但目前在動(dòng)物飼料中所使用的植物肽類產(chǎn)品,主要是采用蛋白酶水解粗蛋白質(zhì)獲得的目標(biāo)產(chǎn)物,為化學(xué)成分、結(jié)構(gòu)信息和功能效果模糊的蛋白質(zhì)水解混合物 (李瑞珍等,2011)。市場上銷售的飼料肽產(chǎn)品多數(shù),水解過程中沒有被降解的蛋白質(zhì)和大分子肽也包含在其中,有些產(chǎn)品還加有載體(孫占田等,2007)。因此在植物肽的制備及分離純化方面尚需進(jìn)一步深入研究,以獲得純度更高的植物肽,進(jìn)一步拓展植物肽的利用價(jià)值。

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