邵　軍，張擁軍（.新疆石河子大學(xué)實驗動物中心，新疆石河子83000；.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團第七師畜牧獸醫(yī)站，新疆奎屯83300）

豬偽狂犬病病毒和豬副豬嗜血桿菌混合感染的診斷與防制

邵軍1，張擁軍2
（1.新疆石河子大學(xué)實驗動物中心，新疆石河子832000；2.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團第七師畜牧獸醫(yī)站，新疆奎屯833200）

1　發(fā)病情況

2014年6月16日新疆奎屯市某豬場從石河子墾區(qū)某團豬場購進斷奶仔豬180頭，飼喂?jié)饪s料，并在飼料中加入泔水，該豬群曾經(jīng)做過豬瘟、圓環(huán)病毒滅活苗、鏈球菌蜂膠滅活苗和豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗免疫，發(fā)病之前生長良好。8月25日該批豬發(fā)生咳嗽、呼吸困難、犬坐姿勢、跛行、體溫升高、流涎、嘔吐，剖檢：肺臟心葉、尖葉、膈葉均有大理石樣的變化，腎臟表面有針尖大小的出血點，心包內(nèi)有大量纖維素沉著物，呈現(xiàn)絨毛心，肝臟表面有針尖至拇指大小灰白色壞死灶、腦膜尤其是小腦呈現(xiàn)樹枝狀充血、岀血。畜主發(fā)現(xiàn)病情后應(yīng)用華神聯(lián)抗注射液（黃芪多糖）、頭孢重病克注射液（頭孢噻呋鈉）、高熱救牲（板藍根）、青霉素、鏈霉素等藥物進行治療，均無療效，8月30日前來我站就診，經(jīng)過流行病學(xué)、臨床癥狀、實驗室檢驗等綜合確診為豬偽狂犬病病毒和豬副豬嗜血桿菌混合感染，診療過程報告如下。

2　臨床癥狀

患豬精神沉郁，食欲減退或廢絕，體溫在40.5℃～41.5℃之間，病豬喜歡扎堆，眼屎分泌物較多；呼吸困難，咳嗽，喘氣，口吐白色泡沫，呈腹式呼吸，初期鼻孔流少量的黏性分泌物，后期鼻孔流膿性鼻液；嚴重的患豬出現(xiàn)嘔吐，張口呼吸，犬坐姿勢，肌肉震顫，四肢運動不協(xié)調(diào)，臥倒時呈游泳狀；前肢腕關(guān)節(jié)或后肢跗關(guān)節(jié)發(fā)生腫脹，走路跛行,站立不穩(wěn);耳朵、頸部、腹部等處皮膚出現(xiàn)紅紫色，尿液呈深黃色，拉羊糞蛋樣的糞便。最后患豬因衰竭而死。發(fā)病數(shù)為108頭，發(fā)病率為60%，死亡數(shù)為36頭，死亡率為20%，病程為3～5 d。

3　病理剖檢

共計剖檢病死豬6頭，肺臟水腫，肺臟心葉、尖葉、膈葉均有大理石樣的變化，支氣管內(nèi)積有大量泡沫樣的分泌物；心肌冠狀溝附著米黃色膠凍樣沉積物，心包內(nèi)積有淡黃色的積液，心包內(nèi)有大量纖維素沉著物，呈現(xiàn)絨毛心；肝臟表面有針尖至拇指大小灰白色壞死，胸膜表面有干酪樣滲出物附著，腸系膜、腹膜等部位表面沉積大量的纖維素滲出物，盲腸和結(jié)腸粘連成團；脾臟腫大呈紫黑色；腦膜尤其是小腦呈現(xiàn)樹枝狀充血、岀血；腎臟腫大，色蒼白，表面有針尖大小的出血點；關(guān)節(jié)腔內(nèi)有少量的積液；其他臟器均有不同程度的敗血癥變化。

4　實驗室檢驗

4.1涂片鏡檢無菌操作取心包膜滲出物、關(guān)節(jié)腔滲出物、肺、脾臟進行涂片，革蘭染色，鏡檢可見到少量革蘭陰性短小桿菌、短絲狀細菌。

4.2細菌分離培養(yǎng)取病豬的心包膜滲出物、肺、關(guān)節(jié)腔滲出物分別接種于血液瓊脂平板,經(jīng)37℃培養(yǎng)48 h后，可見邊緣整齊、圓形、扁平、灰白色、半透明不溶血的小菌落，將此菌涂片鏡檢，形態(tài)及染色特征與直接涂片一致。

4.3生化試驗將細菌純化培養(yǎng)后，分別接種生化培養(yǎng)基，結(jié)果表明，該菌能發(fā)酵葡萄糖，不發(fā)酵乳糖和甘露醇，M.R.、V-P、醋酸鉛試驗陰性，硝酸鹽還原試驗陽性。證明是副豬嗜血桿菌。

4.4藥敏試驗將細菌純培養(yǎng)物接種于高壓巧克力瓊脂平板，選用含有頭孢噻呋鈉、阿莫西林、丁胺卡那霉素、慶大霉素、林可霉素、青霉素、氟苯尼考等藥物紙片進行體外藥敏試驗（藥敏紙片由杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn)，批號為20140202），37℃培養(yǎng)48 h結(jié)果，該菌對阿莫西林、氟苯尼考高敏；對丁胺卡那霉素、頭孢噻呋鈉中敏；對慶大霉素、林可霉素、青霉素低敏。

4.5血清學(xué)檢測采集10頭份病豬的血液，經(jīng)3 000 r/min離心3 min，分離出血清，使用豬偽狂犬乳膠凝集試劑盒（由武漢科前動物生物制品有限公司生產(chǎn)，批號為20140108），結(jié)果為陽性8頭，陽性率為80%（8/10）。

4.6動物試驗采取乳膠凝集試驗陽性的病豬腦在無菌條件下研磨成糊狀，再加入青霉素80萬IU/ mL、鏈霉素100萬μg/mL及5倍量滅菌生理鹽水，置4℃冰箱24 h。以4 000 r/min離心沉淀10 min，取其上清液，頸部皮下注射健康家兔5只，每只4 mL，注射15 h后，3只兔子開始啃咬注射部位，并出現(xiàn)興奮不安的神經(jīng)癥狀，最后均表現(xiàn)角弓反張，抽搐而死。

5　診斷

根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、病例剖檢、實驗室檢驗，確診該病為豬偽狂犬病病毒和豬副豬嗜血桿菌混合感染。

6　防制措施

6.1深埋死豬，隔離病豬，用2%全無敵﹙山東德州神牛動物藥業(yè)生產(chǎn)，主要成分為戊二醛﹚按1∶500比例噴霧消毒，連用14 d，加強滅鼠工作，杜絕飼喂泔水。

6.2全群緊急注射豬偽狂犬活疫苗﹙武漢科前動物生物制品有限公司生產(chǎn)，批號為140425，含豬偽狂犬病病毒（HB-98株）雙基因缺失株，每頭2 mL。間隔一周全群注射副豬嗜血桿菌滅活疫苗﹙武漢科前動物生物制品有限公司生產(chǎn)，批號為140218﹚，每頭豬2 mL。

6.3注射豬偽狂犬活疫苗24 h后，飼料中加入10%氟苯尼考、10%黃芪多糖粉和多種維生素，連用7 d。6.4注苗24 h后，對患病豬應(yīng)用毒喘至尊注射液（阿莫西林）和神奇注射液（氟苯尼考），分別肌肉注射，每日1次。連用5 d。采取以上措施，經(jīng)過5 d，全群恢復(fù)正常。

7　討論

7.1病因分析飼喂的泔水未加消毒，直接與飼料混在一起,病原有可能由此帶入豬場，另一方面豬場內(nèi)老鼠較多，也有可能攜帶病原傳入豬場。該場未嚴格消毒，外來人員自由出入，也有可能攜帶病原傳入。副豬嗜血桿菌是豬的常在菌，各種應(yīng)激因素均可誘發(fā)和促進本病的發(fā)生和流行。豬偽狂犬病病毒可能造成該批育肥豬機體抵抗力下降給副豬嗜血桿菌病提供發(fā)病的條件，該豬場飼養(yǎng)密度大，空氣流動性差，兩種病原均是通過咳嗽、噴嚏等主要方式傳播該病，造成發(fā)病率較高，臨床癥狀較為嚴重。

7.2豬偽狂犬病的推薦免疫程序豬偽狂犬病抗體陰性仔豬，在出生后1周內(nèi)滴鼻或肌肉注射免疫；具有豬偽狂犬病母源抗體的仔豬在45日齡左右肌肉注射，每頭份2 mL，每6個月注苗1次。經(jīng)產(chǎn)母豬，每4個月免疫1次。后備母豬6月齡左右肌肉注射1次，間隔1個月后加強免疫1次，產(chǎn)前1個月左右再免疫1次。種公豬每年春、秋兩季各免疫1次。

豬副豬嗜血桿菌病的推薦免疫程序：種公豬每半年接種1次，后備母豬在產(chǎn)前8～9周齡首免，3周后二免，以后每胎產(chǎn)前4～5周齡免疫1次。仔豬在14日齡首免，3周后二免，每次肌肉注射1頭份，免疫劑量為2 mL/頭份，不論豬只大小。