馬玉華，陳佳琦，鄔繼文，胡正飛，呂龍寶（中國科學(xué)院昆明動物研究所實(shí)驗(yàn)動物中心，云南昆明650223）

樹鼩妊娠后期剖腹取胎術(shù)

馬玉華，陳佳琦，鄔繼文，胡正飛，呂龍寶
（中國科學(xué)院昆明動物研究所實(shí)驗(yàn)動物中心，云南昆明650223）

樹鼩（Tupaia belangeri chinensis，tree shrew），攀鼩目（Scandentia）樹鼩科（Tupaiidae），是一種外形酷似松鼠的哺乳動物，其解剖學(xué)與生物學(xué)特性較其他除靈長類外的實(shí)驗(yàn)動物更接近人類被稱之為靈長類的近親，且因繁殖快和體型小而易控制，管理方便和成本低廉易于飼養(yǎng)管理而被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究，特別是人類疾病動物模型的建立。

在生產(chǎn)實(shí)踐中剖腹取胎術(shù)有兩種：一種為子宮切開術(shù)，主要應(yīng)用于人、大動物和珍稀野生動物，另一種為子宮摘除術(shù)，廣泛應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)動物的研究中[1]。妊娠樹鼩發(fā)生難產(chǎn)（產(chǎn)程超過6 h）經(jīng)藥物或人工助產(chǎn)無效和出現(xiàn)死胎稽留（分娩延遲0～15 d，產(chǎn)出的胎兒腐爛變形），產(chǎn)程超過12 h，母樹鼩精神委靡、體溫下降時(shí)，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行剖腹手術(shù)。因科研需要對妊娠樹鼩的子宮、胎兒進(jìn)行活體采樣時(shí)，也可實(shí)施剖腹取胎術(shù)。操作方法如下。

1　材料與方法

1.1材料器械：滅菌手術(shù)刀、手術(shù)剪、鑷子、滅菌止血鉗、持針鉗、小號圓針、小號棱針、創(chuàng)巾、紗布、棉球、絲線、剃毛刀。

圖1　簡單實(shí)用的樹鼩繁育籠

試劑：氨芐西林鈉粉劑、醫(yī)用碘伏、75%酒精、生理鹽水、醫(yī)用羊腸線、鹽酸氯胺酮注射液、甲苯噻嗪、鹽酸腎上腺素。

1.2實(shí)驗(yàn)動物樹鼩來自于中國科學(xué)院昆明動物研究所實(shí)驗(yàn)動物中心自繁F1代樹鼩54只，其中雄性18只，雌雄36只。飼養(yǎng)和配對籠具為簡單實(shí)用的樹鼩繁育籠（圖1，專利號：ZL 2013 20264271.9），單籠飼養(yǎng)，雄樹鼩位于每層的中間，試驗(yàn)第一天與同層一側(cè)籠樹鼩進(jìn)行合籠交配，20天后進(jìn)行妊娠檢查，同時(shí)將雄性樹鼩與同層另一側(cè)籠樹鼩進(jìn)行合籠配對，如此循環(huán)。將判斷為已懷孕的6只樹鼩隔離飼養(yǎng)至妊娠后期。

1.3方法

1.3.1妊娠檢查采用“觸診法”判斷樹鼩預(yù)產(chǎn)期。具體方法是：檢查時(shí)左手保定樹鼩使樹鼩腹部向上，右手大拇指和食指輕輕撫摸樹鼩腹部子宮位置。若觸及子宮內(nèi)有滑塊狀物判斷樹鼩已懷孕。

1.3.2臨產(chǎn)期判斷妊娠檢查時(shí)根據(jù)所摸到的胚胎大小估計(jì)預(yù)產(chǎn)期。若胚胎似豌豆粒大小懷孕約15 d左右，若滑塊似蠶豆粒大小懷孕約20 d左右。依據(jù)樹鼩生物學(xué)及生產(chǎn)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)樹鼩的妊娠期為41～45 d[2]，30～45 d為妊娠后期。

1.3.3剖腹取胎術(shù)

1.3.3.1動物麻醉采用鹽酸氯胺酮注射液400 μL、甲苯噻嗪50 μL（20 mg/mL），用PBS或生理鹽水稀釋至1mL配制成麻醉劑。按照5 μL/g體重劑量給樹鼩肌肉注射，仰側(cè)臥保定在手術(shù)臺上。

1.3.3.2手術(shù)部位處理術(shù)前5 min，腹側(cè)壁術(shù)前常規(guī)處理（剃毛、醫(yī)用碘伏消毒、安置創(chuàng)巾）。

1.3.3.3切開腹壁沿腹側(cè)壁切開腹壁，切口3～5 cm鈍性分離，而后用鑷子提起腹膜用手術(shù)剪剪開，注意動作緩和避免傷及子宮，此過程若有出血則用高壓滅菌紗布塊壓迫止血。

1.3.3.4取出胚胎用大拇指和食指輕輕擠壓樹鼩腹部首先擠出一個(gè)子宮角而后順序?qū)⒘硪粋€(gè)子宮角以及子宮體擠出于創(chuàng)巾上。于子宮體上切一小口順序?qū)蓚€(gè)子宮角胎兒取出，而后用溫生理鹽水對子宮內(nèi)壁進(jìn)行清洗并用滅菌紗布吸干。

1.3.3.5縫合子宮用小號圓針和醫(yī)用羊腸線對子宮體切口進(jìn)行縫合，注意第一針打結(jié)后并全層連續(xù)縫合至最后一針再次打結(jié)，縫合完畢用溫生理鹽水清洗子宮外壁并緩緩還原回腹腔并于腹腔內(nèi)散布少許氨芐西林鈉粉劑。

1.3.3.6縫合腹壁腹壁分兩層縫合，第一層用絲線圓針全層連續(xù)縫合腹膜和肌肉，注意第一針和最后一針打結(jié)，第二層用絲線棱針結(jié)節(jié)縫合，每針2～3結(jié)；縫合完畢用手術(shù)刀柄對傷口進(jìn)行輕輕刮拭，而后移開創(chuàng)巾，用醫(yī)用碘伏對傷口進(jìn)行消毒處理。

1.3.4術(shù)后護(hù)理術(shù)后將樹鼩轉(zhuǎn)至消毒后的動物房內(nèi)，房間溫度應(yīng)保持在25℃～28℃范圍內(nèi)。于籠內(nèi)鋪墊經(jīng)高壓滅菌消毒毛毯，提供柔軟易消化食物，術(shù)后3 d食物中加入頭孢噻肟鈉（0.025 g/只）。

2　結(jié)果

2.1本次試驗(yàn)中6只樹鼩，手術(shù)1 h后死亡1只（解剖未發(fā)現(xiàn)異常），其余5只存活，于第7天拆線，體況和精神狀況良好，無并發(fā)癥。

2.2本次所用麻醉藥物以及劑量的控制對應(yīng)激性極強(qiáng)的樹鼩實(shí)驗(yàn)是可行的，對新型的實(shí)驗(yàn)動物樹鼩于今后的科研實(shí)驗(yàn)中奠定了基礎(chǔ)。

3　討論

3.1手術(shù)過程中嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作且取出子宮的手法、力度、節(jié)奏感均勻緩和，取出胎兒及時(shí)用

無菌紗布擦去幼仔身上以及鼻腔黏液和保溫。

3.2術(shù)后護(hù)理對母樹鼩的康復(fù)至關(guān)重要，術(shù)后3～5 d母樹鼩飼養(yǎng)于25℃～28℃飼育室、窩箱內(nèi)墊經(jīng)高壓滅菌毛毯或柔軟物質(zhì)且給予流質(zhì)易消化食物并于食物中投予抗生素預(yù)防感染，因樹鼩與人類、非人靈長類獼猴相似及易感染，之后轉(zhuǎn)入常規(guī)飼喂。

3.3麻醉藥物的選擇和劑量是樹鼩剖腹取胎術(shù)成功與否的關(guān)鍵因素，此次所用的麻醉藥物以及劑量相對于手術(shù)過程以及術(shù)后母體的狀況來說是比較理想的。

3.4樹鼩妊娠后期剖腹取胎術(shù)，為相關(guān)的動物實(shí)驗(yàn)樹鼩在科研工作中奠定了基礎(chǔ)以及保護(hù)樹鼩種質(zhì)資源、建立凈化種群，減少因剖腹取胎術(shù)引起母體的死亡均有一定的參考價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

[1]陳系古，黃冰，邱國光.剖腹產(chǎn)技術(shù)在標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動物擴(kuò)大生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].北京實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)與管理，1994，11（1）：53-54.

[2]鄒如金，季維智，沙臨力.樹鼩（Tupaia belangeri chinensis）的繁殖[J].動物學(xué)研究.1987，8（3）：231-237.

[3]徐林，張?jiān)疲罕?，?實(shí)驗(yàn)動物樹鼩和人類疾病的樹鼩模型[J].動物學(xué)研究，2013，34（2）：59-69.

[4]鵬燕章，葉智彰，樹鼩生物學(xué)[M].昆明：云南科技出版社，1991：76.

[5]張玲莉，盧忠遠(yuǎn)，何明會.難產(chǎn)黑葉猴的剖腹產(chǎn)手術(shù)治療[J] .貴州畜牧獸醫(yī)，2007，31（4）：28-28.

通訊作者：呂龍寶，E-mail：lvlb2006@163.com

作者簡介：馬玉華（1981-）,男，工程師，本科，從事實(shí)驗(yàn)動物學(xué)研究，E-mail：mama_00@163.com

收稿日期：2014-09-19

中圖分類號：Q955

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號：0529- 6005（2015）10- 0082- 02