方雪琴

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院藥劑科，上海200032)

黃連解毒湯方出《肘后方》卷二，名見《外臺(tái)》卷一引《崔氏方》。其組成為黃連9 g，黃柏6 g，黃芩6 g，梔子14 枚。功效為泄火解毒，主治為一切實(shí)熱火毒之證，三焦熱盛。癥見大熱煩躁，口燥咽干，目赤睛痛，錯(cuò)語不眠;或熱病吐血、衄血、便血，甚或發(fā)斑;外科癰疽瘡瘍?，F(xiàn)亦用于膽道感染、膿皰瘡、濕疹等屬于實(shí)熱火毒壅盛者。近年來隨著醫(yī)藥科學(xué)的發(fā)展，人們對(duì)黃連解毒湯藥理的研究也越來越深入，其作用及臨床適應(yīng)證更為廣泛。

1 對(duì)心血管系統(tǒng)的作用

1.1 降血脂，抗動(dòng)脈粥樣硬化 張揚(yáng)等［1］研究了黃連解毒湯對(duì)高脂血癥模型大鼠血脂指標(biāo)及氧自由基代謝的影響。將50 只SD 大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、立普妥組(0.2 mg/kg)，黃連解毒湯低、高劑量組(6、12 g/kg)，除正常對(duì)照組外，其他組大鼠喂飼高脂飼料建立高脂血癥模型，連續(xù)灌服8 周后，測(cè)定血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平，以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化酶 (GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)水平，并觀察肝組織病理學(xué)改變。結(jié)果顯示各劑量組的黃連解毒湯能顯著降低實(shí)驗(yàn)大鼠血清膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白以及丙二醛的水平，并且可顯著提高血清高密度脂蛋白水平和SOD、GSH-Px 活性，能減輕肝細(xì)胞脂肪變性。說明黃連解毒湯能有效調(diào)節(jié)高脂血癥大鼠血脂代謝，提高機(jī)體抗氧化能力，改善肝組織病理損害。

李國(guó)強(qiáng)等［2］探討黃連解毒湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血清中細(xì)胞間黏附分子-1 (ICAM-1)和血管細(xì)胞黏附分子-1(VCAM-1)水平的影響及其作用機(jī)制。將雄性SD 大鼠分成正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、黃連解毒湯低中高3 個(gè)劑量組及阿托伐他汀組，除正常對(duì)照組喂普通飼料外，其余喂以高脂飼料，同時(shí)定期灌服維生素D3(60 萬U/次，第2、4、6 周)造模8 周，從第6 周開始每天灌胃給藥1 次，黃連解毒湯低劑量組2.7 g/kg、中劑量組5.3 g/kg、高劑量組10.6 g/kg、阿托伐他汀鈣片組1.8 mg/kg，正常對(duì)照組灌服等量蒸餾水，連續(xù)4 周，結(jié)果黃連解毒湯中劑量組、高劑量組及阿托伐他汀組對(duì)ICAM-1、VCAM-1 表達(dá)均比模型對(duì)照組低(P ＜0.05)。說明黃連解毒湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化起到一定的預(yù)防和治療作用，作用機(jī)理可能與抑制炎癥反應(yīng)有關(guān)。付春生［3］研究認(rèn)為，黃連解毒湯對(duì)導(dǎo)管球囊損傷大耳白兔頸總動(dòng)脈并喂飼高脂飼料的動(dòng)脈粥樣硬化模型動(dòng)物，可降低其血脂水平，并且顯著降低其血清和頸總動(dòng)脈斑塊組織的超敏C 反應(yīng)蛋白(hs-CRP)水平，改善頸總動(dòng)脈病理學(xué)形態(tài)。

1.2 保護(hù)心肌細(xì)胞，抗心律失常 付曉春等［4］通過實(shí)驗(yàn)觀察黃連解毒湯對(duì)在體大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)心律失常的影響，并探討其作用機(jī)制。采用SD 大鼠心肌I/R 模型，將56 只SD 大鼠隨機(jī)等分為假手術(shù)組、心肌I/R 組、溶劑(1% CMC-Na)對(duì)照組、黃連解毒湯低劑量組、黃連解毒湯中劑量組、黃連解毒湯高劑量組、復(fù)方丹參組，連續(xù)給藥7 d，末次給藥24 h 后復(fù)制大鼠心肌I/R 損傷模型(開胸結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支30 min，再灌注40 min)。觀察缺血/再灌注后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室性心動(dòng)過速 (VT)、室顫(VF)的發(fā)生率和死亡率;同時(shí)測(cè)定左心室心肌組織SOD及MDA 水平。結(jié)果再灌注40 min 后，實(shí)驗(yàn)組較I/R 組VT及VF 發(fā)生率及死亡率均明顯降低(P ＜0.01);實(shí)驗(yàn)組L/R 組的SOD 活力提高(P ＜0.05)，而MDA 生成量明顯減少(P ＜0.01)。說明心肌I/R 可導(dǎo)致缺血心肌進(jìn)一步損傷，黃連解毒湯具有抗大鼠I/R 心律失常作用，可能與抑制I/R 氧自由基的產(chǎn)生有關(guān);進(jìn)一步研究認(rèn)為［5-6］，黃連解毒湯可以明顯降低I/R 模型大鼠心肌細(xì)胞的TNF-α、IL-1β、CK、NF-κB 水平，梗死范圍明顯縮小。

1.3 降血壓作用 張志偉等［7］觀察黃連解毒湯對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rats，SHR)血栓前狀態(tài)(prothrombotic state，PTS)的影響。將24 只12 周齡雄性SHR 隨機(jī)分為黃連解毒湯組(15 g/kg)、卡托普利組(0.017 5 g/kg)和模型組3 組，8 只同齡雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠為空白對(duì)照組，通過BP-6 動(dòng)物無創(chuàng)血壓測(cè)試儀測(cè)定各組治療前血壓，連續(xù)灌胃給藥6 周，每日1 次，第1、2、4、6 周的第7 天下午定時(shí)測(cè)量各組血壓，6 周后由腹主動(dòng)脈取血，檢測(cè)血清血栓素A2(TXA2)、6-酮前列環(huán)素(6-K-PG)、一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素-1 (ET-1)、纖溶系統(tǒng)激活劑(t-PA)、纖溶系統(tǒng)抑制因子(PAI-1)、同型半胱氨酸(Hcy)和血管性血友病因子(vWF)。結(jié)果顯示黃連解毒湯可控制SHR 血壓，降低TXA2、ET-1、Hcy 和vWF (P ＜0.05 或P ＜0.01)，增加6-K-PG 和NO (P ＜0.05 或P ＜0.01)。說明黃連解毒湯可降低SHR 的血壓，改善其PTS。張楠、高藝文等［8-9］的研究認(rèn)為給予幼齡的自發(fā)性高血壓大鼠灌服5.4 g/kg 的黃連解毒湯，連續(xù)6 周，可使SHR 大鼠胸主動(dòng)脈血管內(nèi)皮超微結(jié)構(gòu)得以顯著改善，并且使血清NO 濃度下降，上調(diào)動(dòng)脈血管eNOS mRNA 表達(dá)，起到擴(kuò)血管作用。

1.4 抗血栓作用 付曉春等［10］以450、900、1 800 mg/kg劑量的黃連解毒湯提取物，連續(xù)對(duì)小鼠灌胃3 d，末次給藥1 h 后能顯著延長(zhǎng)小鼠體外凝血時(shí)間。家兔灌胃150、300、600 mg/kg 劑量的黃連解毒湯，連續(xù)給藥3 d，末次給藥1 h后能明顯延長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物凝血酶時(shí)間、血漿凝血酶原時(shí)間、白陶土活化部分凝血活酶時(shí)間，并顯著抑制ADP 所致的血小板聚集。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示黃連解毒湯具有對(duì)抗血栓形成的作用。

2 保護(hù)腦神經(jīng)元作用

錢智磊等［11］研究黃連解毒湯中指標(biāo)性成分在火熱證腦缺血損傷模型大鼠的時(shí)量關(guān)系與抗火熱證腦缺血效應(yīng)的相關(guān)性。以火熱證電凝法建立局灶性腦缺血模型、給藥組、假手術(shù)組。給藥組大鼠復(fù)制火熱證腦缺血模型成功后灌胃給予黃連解毒湯，按0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、12、24 h 時(shí)間點(diǎn)取血，測(cè)定各指標(biāo)性成分在大鼠體內(nèi)的藥時(shí)變化，繪制藥-時(shí)曲線;取模型組、給藥組、假手術(shù)組0.083、0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、12、24 h時(shí)間點(diǎn)的腦組織，測(cè)定腦組織中自細(xì)胞介素(IL-6)，腫瘤壞死因子(TNF-α)的變化，繪制時(shí)-效曲線;藥效實(shí)驗(yàn)表明3 種指標(biāo)性成分的起效時(shí)間不同，持續(xù)時(shí)間亦不相同;上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明黃連解毒湯全方能對(duì)火熱證缺血性腦損傷模型發(fā)揮保護(hù)作用，其作用的強(qiáng)弱與方中主要指標(biāo)性成分的血藥濃度呈正相關(guān)，且各主要指標(biāo)性成分發(fā)揮效應(yīng)的時(shí)效存在差異。黃連解毒湯對(duì)火熱證腦缺血模型的保護(hù)作用機(jī)制可能與其抗炎作用有關(guān)，這一點(diǎn)與傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為的黃連解毒湯有清熱解毒功效相一致。

方青等［12］對(duì)黃連解毒湯治療老年性癡呆(AD)及其對(duì)細(xì)胞因子水平的影響進(jìn)行藥效學(xué)研究。對(duì)注射β-淀粉蛋白(Aβ)誘導(dǎo)的AD 大鼠模型，進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn)以測(cè)試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶能力;并檢測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的TNF-α、干擾素-γ (INF-γ)、白介素-2 (IL-2)等實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的變化。結(jié)果顯示給予黃連解毒湯后，動(dòng)物逃避的平均潛伏期縮短，進(jìn)入盲端的錯(cuò)誤次數(shù)減少，學(xué)習(xí)記憶能力顯著改善(P ＜0.01);并且TNF-α、INF-γ、IL-2 水平也明顯降低(P ＜0.01)。說明黃連解毒湯能通過調(diào)整老年癡呆癥模型大鼠的免疫功能、抗炎作用而提高其學(xué)習(xí)記憶能力。

劉曉強(qiáng)等［13］采用免疫組織化學(xué)SP 法對(duì)正常大鼠、感染大腸埃希菌大鼠和黃連解毒湯預(yù)防大鼠腦組織中的Toll樣受體9 (TLR9)表達(dá)及相關(guān)因子的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行了研究，以闡明TLR9 及相關(guān)炎癥因子在腦損傷中的調(diào)節(jié)機(jī)制。正常對(duì)照組大鼠腹腔注射生理鹽水0.5 mL/只，試驗(yàn)組大鼠腹腔注射大腸埃希菌菌液0.5 mL/只(2.4 ×109CFU/mL)，12.6 mL/kg 劑量的黃連解毒湯預(yù)防組大鼠每只按提前6 d 灌服黃連解毒湯，處理當(dāng)天再分別腹腔注射大腸埃希菌菌液0.5 mL/只(2.4 ×109CFU/mL)。分別于處理后的3、6、9、12、18、24 h 對(duì)各組動(dòng)物進(jìn)行免疫組化指標(biāo)檢測(cè)，觀察腦組織TLR9 及相關(guān)因子的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在大鼠正常生理狀態(tài)下TLR9 有少量表達(dá)，感染大腸埃希菌后，TLR9 表達(dá)則出現(xiàn)顯著變化，且這種變化隨著時(shí)間的推移而更加明顯。在感染后3 h 時(shí)TLR9 表達(dá)量較正常生理狀態(tài)下顯著增加(P ＜0.05)，在6 h 時(shí)開始增加更明顯，12 h 時(shí)達(dá)到高峰;與正常對(duì)照組和試驗(yàn)組相比，均有極顯著差異(P ＜0.01)。預(yù)防組與正常對(duì)照組比較則無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05)。該研究結(jié)果顯示黃連解毒湯可通過抑制腦組織TLR9 的表達(dá)而保護(hù)由細(xì)菌所致的腦損傷。

給永久性大腦中動(dòng)脈栓塞模型大鼠灌服黃連解毒湯水提取物(800 mg/kg)、總生物堿(44 mg/kg)、總黃酮(50 mg/kg)、總環(huán)烯醚萜(80 mg/kg)等有效部位，連續(xù)7 d，黃連解毒湯水提取物及3 個(gè)有效部位均可增加腦缺血大鼠缺血半暗帶區(qū)神經(jīng)元數(shù)目，降低缺血半暗帶區(qū)GFAP、Cx43 基因和蛋白的表達(dá)［14］;黃連解毒湯水提取物和總黃酮可提高海馬神經(jīng)元NeuN 表達(dá)，總黃酮、總生物堿和總環(huán)烯醚萜可增強(qiáng)大鼠海馬CA1 區(qū)VEGF 表達(dá)，總黃酮還可顯著上調(diào)尾殼核VEGF 表達(dá)［15］。對(duì)大腦中動(dòng)脈梗塞模型的大鼠灌服5.39 g 生藥/kg、10.78 g 生藥/kg 劑量的黃連解毒湯，可顯著降低腦梗塞急性期模型大鼠第4、第7 天血漿胃動(dòng)素、血管活性腸肽的水平，且效應(yīng)與劑量有關(guān)［16］。

3 對(duì)肝臟的保護(hù)作用

馬雅鑾等［17］觀察黃連解毒湯對(duì)高脂飲食導(dǎo)致的載脂蛋白E (apolipoprotein E，ApoE)基因敲除(ApoE-/-)小鼠肝臟損傷的保護(hù)作用。野生型小鼠分為野生普食組、野生高脂組，ApoE-/-小鼠分為ApoE-/-普食組、ApoE-/-高脂組、ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組，分別給予普食和高脂飲食，連續(xù)4 周，ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組同時(shí)給予黃連解毒湯5 g/(kg·d)灌胃。檢測(cè)小鼠血漿TC、TG 和LDL-C 水平，HE 染色觀察肝臟病理組織變化，流式細(xì)胞儀檢測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝臟巨噬細(xì)胞及其亞型比例和巨噬細(xì)胞表面受體CD36、CD206 的表達(dá)水平。結(jié)果ApoE-/-高脂組小鼠肝臟組織呈典型單純性脂肪肝病理變化，TC、TG、LDL-C 升高，巨噬細(xì)胞比例增多，巨噬細(xì)胞表面受體CD206 表達(dá)水平降低，與ApoE-/-普食組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.01、P ＜0.05);CD206 +替代活化型(alternatively activated macrophages，M2 型)巨噬細(xì)胞比例較野生普食組顯著減少(P ＜0.05);CD36 表達(dá)水平無明顯變化。黃連解毒湯干預(yù)4 周后血脂無明顯改善，但肝臟CD206 +M2 型巨噬細(xì)胞比例較ApoE-/-高脂組顯著提高(P ＜0.05)，肝臟脂肪肝病理變化顯著減輕。說明黃連解毒湯的肝臟保護(hù)功能可能與M2 型巨噬細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)、修復(fù)損傷組織有關(guān)，其免疫調(diào)節(jié)作用和肝臟保護(hù)作用獨(dú)立于降脂作用。黃琳等［18］研究黃連解毒湯對(duì)胰島素抵抗大鼠氧自由基所致肝臟線粒體損傷的保護(hù)作用，并探討其作用機(jī)制。以高脂飼料喂養(yǎng)Wistar 大鼠，建立胰島素抵抗模型;造模成功后隨機(jī)分為黃連解毒湯組、小檗堿組、硫辛酸組和模型組，各組以相應(yīng)的藥物干預(yù)6 周;測(cè)定肝臟線粒體ATP 酶、琥珀酸脫氫酶(SDH)、細(xì)胞色素C 氧化酶(CCO)活性及ATP 水平以觀察線粒體功能及能量代謝活性;測(cè)定SOD、GSH-Px 活性及MDA 水平以觀察線粒體抗氧化能力。黃連解毒湯能提高胰島素抵抗大鼠肝臟線粒體中GSH-Px、SOD、ATP 酶活力，抑制MDA 生成，促進(jìn)能量生成代謝，增強(qiáng)SDH 和CCO 活力。說明黃連解毒湯可以改善線粒體功能及能量代謝，增強(qiáng)線粒體抗氧化能力，對(duì)胰島素抵抗大鼠肝臟線粒體損傷有明顯保護(hù)作用，其機(jī)制可能與清除氧自由基、抑制脂質(zhì)過氧化有關(guān)。對(duì)酒精性肝損傷模型小鼠灌胃給予0.61、1.22、2.44 g 生藥/kg 的黃連解毒湯，6 周后可顯著改善模型動(dòng)物的體質(zhì)量、肝臟指數(shù)，降低血清血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性和TG 水平，并且可減輕肝臟細(xì)胞病變，降低腸黏膜通透性［19］。周海云等［20］采用腹腔注射氯化鋰-匹羅卡品制備癲癇大鼠模型。比較未用藥、單用SVA 及聯(lián)合用藥對(duì)大鼠行為學(xué)，ALT、AST，GSH-Px 活性和MDA 水平以及肝臟組織學(xué)變化的影響，同時(shí)監(jiān)測(cè)SVA 血藥濃度。結(jié)果SVA 聯(lián)合黃連解毒湯能減少大鼠的癲癇行為，拮抗癲癇大鼠服用SVA 導(dǎo)致的ALT、AST 活性升高(P ＜0.01)、GSH-Px 活性下降(P ＜0.01)和肝組織病理改變，并同時(shí)降低SVA 血藥濃度(P ＜0.01)。說明黃連解毒湯能增強(qiáng)SVA 的抗癲癇作用，并降低其肝毒性。

4 降血糖，改善糖尿病并發(fā)癥

肖雁凌等［21］觀察了黃連解毒湯對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠血管內(nèi)皮功能的影響，以及對(duì)Ⅱ型糖尿病模型動(dòng)物血管并發(fā)癥的防治及其作用機(jī)制。對(duì)大鼠尾靜脈注射小劑量鏈脲佐菌聯(lián)合高糖高熱量飼料喂養(yǎng)的方法建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型，連續(xù)給藥9 周后，各組動(dòng)物進(jìn)行糖耐量檢測(cè)(OGTT);10周后，測(cè)定各組動(dòng)物體質(zhì)量變化情況并檢測(cè)各組動(dòng)物的空腹血糖 (FBG)、TC、TG、HDL-C、空腹血清胰島素(FINS)值及血清NO、血漿內(nèi)皮素(ET)、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)水平，以及vWF 的表達(dá)水平。結(jié)果黃連解毒湯組的OGTT 得以顯著改善，動(dòng)物體質(zhì)量、血清TC、TG、ET值均低于模型組(P ＜0.05)，HDL-C 和NO 值高于模型組(P ＜0.05);FBG、FINS、AngⅡ、vWF 值均顯著低于模型組(P ＜0.01);與陽性藥物阿司匹林相比，黃連解毒湯降低FBG 作用更顯著 (P ＜0.05)，對(duì)TG、HDL-C、NO、AngⅡ、vWF 的改善情況也優(yōu)于阿司匹林，但無顯著性差異(P ＞0.05)。說明黃連解毒湯能保護(hù)Ⅱ型糖尿病模型動(dòng)物早期出現(xiàn)的血管內(nèi)皮損傷，作用機(jī)理與黃連解毒湯具有降血糖、降血脂、抗炎、改善胰島素抵抗及內(nèi)皮依賴性的舒張血管等作用有關(guān)。

冷三華等［22］探討黃連解毒湯對(duì)實(shí)驗(yàn)性Ⅱ型糖尿病大鼠的血糖、血脂代謝的影響，并探討其作用機(jī)理。觀察黃連解毒湯對(duì)實(shí)驗(yàn)性2 型糖尿病大鼠TC、TG、HDL-C、載脂蛋白AI (APOA I)、載脂蛋白B (APOB)、OGTT、FBG、血清INS、進(jìn)食及體質(zhì)量的影響。結(jié)果，黃連解毒湯能降低Ⅱ型糖尿病模型大鼠的血清TC、TG、APOB、FBG 水平，HDL-C、APOA I 水平則顯著增高，OGTT 得以改善，動(dòng)物體質(zhì)量有所減輕。說明黃連解毒湯具有降糖、降脂等作用，其作用機(jī)理可能與增強(qiáng)胰島素敏感性及促進(jìn)胰島素釋放等環(huán)節(jié)密切相關(guān)。灌胃給予5.4 g/kg 劑量的黃連解毒湯，連續(xù)6 周，可顯著改善Ⅱ型糖尿病模型大鼠腹主動(dòng)脈內(nèi)皮血管形態(tài)，并且腹主動(dòng)脈HIF-1α 陽性細(xì)胞表達(dá)明顯降低［23］。

楊永霞等［24］采用核磁共振氫譜(1H-NMR)代謝組學(xué)的方法研究黃連解毒湯對(duì)高果糖誘導(dǎo)的胰島素抵抗模型大鼠的作用，對(duì)大鼠棕色脂肪組織提取液進(jìn)行PCA 分析，黃連解毒湯可降低乳酸、膽堿、磷脂膽堿/甘油磷脂膽堿、肌酸/肌酸酐、牛磺酸和肌苷的水平，且升高肌醇水平。

5 抗炎作用

馬雅鑾等［25］觀察黃連解毒湯對(duì)高脂飲食喂養(yǎng)的apoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠全身和主動(dòng)脈血管局部免疫反應(yīng)的影響，以8 只野生型C57BL6 小鼠為野生普食組，24 只ApoE-/-小鼠隨機(jī)分為ApoE-/-普食組、ApoE-/-高脂組、ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組，普食組與高脂組分別給予普食和高脂飲食，連續(xù)4 周，ApoE-/-高脂加中藥組同時(shí)給予黃連解毒湯5 g/(kg·d)灌胃，其他小鼠采用等量純凈水灌胃，4 周后檢測(cè)血脂水平、外周血單核細(xì)胞比例及其表面Toll 樣受體4 (Toll-like receptor 4，TLR4)和清道夫受體CD36 的表達(dá)，檢測(cè)主動(dòng)脈病理變化和主動(dòng)脈血管局部細(xì)胞因子表達(dá)水平，進(jìn)一步采用脂多糖 (Lipopolysaccharide，LPS)刺激檢測(cè)血漿細(xì)胞因子的水平。結(jié)果:(1)與野生普食組比較，ApoE-/-普食組血漿TC、TG 和LDL 白水平顯著升高 (P ＜0.05、P ＜0.01);與ApoE-/-普食組比較，ApoE-/-高脂組血漿TC 和LDL 水平也顯著增高(P ＜0.05);ApoE-/-高脂組與ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組各項(xiàng)血脂水平指標(biāo)比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P ＞0.05);(2)與野生普食組比較，ApoE-/-普食組外周血單核細(xì)胞百分比無明顯變化，但TLR4 表達(dá)水平顯著增多(P ＜0.05);與ApoE-/-普食組比較，ApoE-/-高脂組小鼠外周血單核細(xì)胞百分比及TLR4表達(dá)水平均顯著增多(P ＜0.05);與ApoE-/-高脂組比較，ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組外周血單核細(xì)胞百分比及其表面TLR4 表達(dá)顯著降低，CD36 表達(dá)水平亦顯著降低(P ＜0.05);(3)給予脂多糖刺激3 h 后，與野生普食組比較，ApoE-/-普食組血漿IL-10 和TNF-α 水平顯著提高(P ＜0.05);與ApoE-/-普食組比較，ApoE-/-高脂組小鼠血漿IL-10、IL-12、TNF-α 和MCP-1 水平有所增加，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P ＞0.05);給予黃連解毒湯4 周后，與ApoE-/-高脂組比較，ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組MCP-1 表達(dá)下調(diào)明顯，而IL-10 水平則顯著上升(P ＜0.05);(4)與野生普食組比較，ApoE-/-普食組主動(dòng)脈血管壁炎癥因子IFN -γ、MCP-1、TNF-α 和IL-1β mRNA 水平顯著升高，抑炎因子IL-10 亦顯著升高(P ＜0.05，P ＜0.01);與ApoE-/-普食組比較，ApoE-/-高脂組主動(dòng)脈血管壁不僅IL -1β、IFN -γ、MCP-1 和TNF-α 水平升高，且抑炎因子IL-10、IL -12 和TGF-β 水平亦顯著升高(P ＜0.05、P ＜0.01);給予黃連解毒湯4 周后，與ApoE-/-高脂組比較，ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組主動(dòng)脈血管壁炎癥因子IL -12、IL -1β、MCP-1和TNF-α 顯著降低(P ＜0.05、P ＜0.01)。高脂飲食可引發(fā)ApoE-/-小鼠全身性炎癥反應(yīng)和血管局部炎癥反應(yīng)，血管局部炎癥反應(yīng)程度超過全身性炎癥反應(yīng)，黃連解毒湯干預(yù)后能夠減輕炎癥反應(yīng)，并且對(duì)血管局部的作用更為顯著，同時(shí)增強(qiáng)全身抗炎反應(yīng)。

朱小明等［26］研究黃連解毒湯抗銅綠假單胞菌牛物被膜及與阿奇霉素協(xié)同抗菌作用。以微量倍比稀釋法測(cè)定黃連解毒湯對(duì)銅綠假單胞菌的最小抑菌濃度(MIC)，棋盤稀釋法測(cè)定黃連解毒湯和阿奇霉素協(xié)同抗菌作用，MTT 法測(cè)定黃連解毒湯對(duì)銅綠假單胞菌生物被膜的最小抑膜濃度(SMIC)，同時(shí)顯微鏡下觀察黃連解毒湯對(duì)生物膜形態(tài)的影響。結(jié)果顯示黃連解毒湯對(duì)銅綠假單胞菌的MIC 100 g/L，阿奇霉素200 mg/L，兩藥聯(lián)合后MIC 分別為25 g/L 和25 mg/L，抑菌分級(jí)指數(shù)(FIC)為0.187 5，提示黃連解毒湯和阿奇霉素聯(lián)合使用，具有協(xié)同抑制銅綠假單胞菌的作用。黃連解毒湯對(duì)銅綠假單胞菌生物被膜的SMIC501，3 d 為15.6 g/L，7 d 為31.25 g/L;SMIC801，3、7 d 均為250 g/L，形態(tài)觀察提示黃連解毒湯SMIC80 濃度對(duì)銅綠假單胞菌生物被膜的抑制作用明顯。說明黃連解毒湯具有抗銅綠假單胞菌生物被膜作用，與阿奇霉素有協(xié)同抗菌作用。

李永偉等［27］采用紙片法篩選產(chǎn)超廣譜β -內(nèi)酰胺酶大腸桿菌，確定黃連解毒湯的最低抑菌質(zhì)量濃度，選取低于最低抑菌濃度的黃連解毒湯培養(yǎng)超廣譜β -內(nèi)酰胺酶大腸桿菌，以確定最佳逆轉(zhuǎn)效果的培養(yǎng)時(shí)間和藥物濃度，并測(cè)定逆轉(zhuǎn)率。檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，黃連解毒湯對(duì)ATCC8099 型大腸桿菌的最低抑菌濃度為0.6 g/L，逆轉(zhuǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸桿菌的最佳培養(yǎng)時(shí)間為30 h，最佳質(zhì)量濃度為0.3 g/L，對(duì)氨芐西林藥敏逆轉(zhuǎn)率為60.0%、頭孢他啶藥敏逆轉(zhuǎn)率為66.7%、頭孢美唑藥敏逆轉(zhuǎn)率為75.0%，頭孢曲松藥敏逆轉(zhuǎn)率為66.7%，說明黃連解毒湯對(duì)耐藥性大腸桿菌逆轉(zhuǎn)作用確切，可作為逆轉(zhuǎn)耐藥性大腸桿菌一種途徑。趙保勝等［28］以傷寒-副傷寒甲-副傷寒乙三聯(lián)菌苗制備家兔發(fā)熱模型，觀察黃連解毒湯對(duì)發(fā)熱家兔體溫的影響，觀察該方對(duì)葡萄球菌致小鼠死亡率的影響以及觀察該方對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響。黃連解毒湯可顯著降低由傷寒-副傷寒甲-副傷寒乙三聯(lián)菌苗所致發(fā)熱家兔的體溫，對(duì)抗金黃色葡萄球菌引起的小鼠感染;抑制二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹。說明黃連解毒湯具有較好的解熱、抗菌、抗炎作用，與傳統(tǒng)中醫(yī)藥對(duì)黃連解毒湯的論述相符，并且也為其現(xiàn)代臨床治療感染性疾病提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

6 抗氧化作用

宋玨等［29］研究黃連解毒湯及其單味藥對(duì)細(xì)胞氧化損傷保護(hù)作用的藥效動(dòng)力學(xué)，并對(duì)其血清藥理學(xué)方法進(jìn)行探討。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌服黃芩、黃連、黃連解毒湯等受試藥物以分別制得含藥血清，檢測(cè)含藥血清對(duì)由H2O2所致PC12 細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷保護(hù)作用的時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系;并研究黃芩、黃連、黃連解毒湯提取物和黃芩苷、小檗堿純品對(duì)氧化損傷保護(hù)作用的量效關(guān)系。結(jié)果顯示各單味藥以及黃連解毒湯的含藥血清均可對(duì)抗細(xì)胞氧化損傷，黃連解毒湯作用最強(qiáng)，黃芩和黃芩苷次之，黃連最弱，在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，黃連解毒湯和黃芩提取物對(duì)氧化損傷細(xì)胞的保護(hù)作用呈劑量依賴性關(guān)系，而黃連沒有保護(hù)作用;在0.15 ～10 μg/mL 濃度范圍內(nèi)，黃芩苷對(duì)細(xì)胞模型有保護(hù)作用，且呈劑量依賴性。0.15 ～10 μg/mL 濃度范圍內(nèi)，小檗堿則沒有明顯的保護(hù)作用。說明黃連解毒湯抗氧化作用強(qiáng)于各單味藥;黃芩苷可能是黃芩及其含藥血清中的抗氧化成份之一，而小檗堿與含藥血清的抗氧化作用無關(guān)。黃連解毒湯及其組方中各單味藥含藥血清保護(hù)細(xì)胞氧化應(yīng)激的作用呈時(shí)間和劑量的依賴關(guān)系。

王利津等［30］以紅細(xì)胞溶血、肝勻漿MDA 生成及羥自由基生成等方法造成體外氧化損傷模型，體外給予黃連解毒湯后能明顯抑制紅細(xì)胞自氧化及H2O2所致的紅細(xì)胞溶血，并抑制小鼠肝勻漿自發(fā)性或Fe2+-VitC 誘發(fā)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)。直接清除由H2O2所誘導(dǎo)的羥自由基產(chǎn)生。說明黃連解毒湯對(duì)血細(xì)胞和組織細(xì)胞具有膜保護(hù)作用。

7. 抗腫瘤作用

孫燕等［31］研究黃連解毒湯體內(nèi)抗腫瘤作用，對(duì)小鼠灌服22.0、11.0、5.5 g/kg 劑量的黃連解毒湯，對(duì)S180 肉瘤模型小鼠，22.0 g/kg 劑量的黃連解毒湯可顯著抑制小鼠腫瘤的生長(zhǎng)(P ＜0.05)，延長(zhǎng)荷瘤小鼠壽命，改善生存質(zhì)量，但各劑量的黃連解毒湯對(duì)動(dòng)物脾臟、胸腺指數(shù)無顯著影響。細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察顯示各劑量的黃連解毒湯可使腫瘤細(xì)胞明顯變形，22.0、11.0 g/kg 劑量組小鼠生存率明顯高于對(duì)照組。孫健等［32］采用HPLC 梯度洗脫的研究方法分析對(duì)比黃連解毒湯及其含藥血清中有效成分的共同性和差異性，并以MTT 方法檢測(cè)比較黃連解毒湯及其含藥血清對(duì)人肝癌Bel-7402、人小細(xì)胞肺癌NCI-H446 2 種瘤株的抑制作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)10 個(gè)來源于黃連解毒湯復(fù)方的原型成分，若干個(gè)代謝產(chǎn)物，同時(shí)發(fā)現(xiàn)一些原復(fù)方中的主要化學(xué)成分并未在血清中測(cè)得。黃連解毒湯及其含藥血清對(duì)2 種瘤株都有顯著的抑制增殖作用，并呈量效依賴關(guān)系，但抑制程度有所差異。黃連解毒湯對(duì)抗人肝癌Bel-7402 細(xì)胞增殖作用相對(duì)更敏感(Bel-7402 的IC50為185.34 mg/L，NCI-H446的IC50為264.68 mg/L)，黃連解毒湯含藥血清各劑量組對(duì)2 種瘤株的抑制程度非常相似。說明黃連解毒湯及其含藥血清對(duì)2 種瘤株抑制程度變化的原因可能是黃連解毒湯中各有效或指標(biāo)成分吸收進(jìn)入血液循環(huán)后其水平發(fā)生了變化的結(jié)果，黃連解毒湯進(jìn)一步的藥代動(dòng)力學(xué)研究，也有助于闡明黃連解毒湯抗腫瘤的有效成分及作用機(jī)制。

8 小結(jié)

綜上可知，黃連解毒湯除了抗炎作用，現(xiàn)代在心血管系統(tǒng)，保護(hù)腦神經(jīng)，保護(hù)肝臟，抗氧化，抗血栓，降血糖，降血脂，降血壓，抗腫瘤等方面都應(yīng)用廣泛。隨著對(duì)黃連解毒湯的研究不斷深入，越來越多的功能被人們所發(fā)現(xiàn)，在臨床上的應(yīng)用也越來越多。但其有效性、安全性的研究還很落后，相應(yīng)的毒理研究亦很少，有待于進(jìn)一步深化。

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