■李馬成李 杰劉全新 何 輝 徐長(zhǎng)躍陳 雷

(1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，黑龍江哈爾濱150030；2.百興畜牧飼料有限公司，廣東廣州510440)

代謝有機(jī)酸是動(dòng)物代謝產(chǎn)生的一類中間產(chǎn)物，以短鏈酮酸和有機(jī)酸為主，能直接參與體內(nèi)各種生化反應(yīng)，調(diào)節(jié)體內(nèi)代謝平衡，促進(jìn)動(dòng)物健康生長(zhǎng)。資料表明，有機(jī)酸能提高機(jī)體抗氧化能力和免疫力。劉勝軍等發(fā)現(xiàn)，有機(jī)酸能提高斷奶仔豬生長(zhǎng)性能，降低腹瀉率。本實(shí)驗(yàn)室研制出一種由短鏈酮酸為主的新型代謝有機(jī)酸產(chǎn)品，且前期研究發(fā)現(xiàn)，該有機(jī)酸產(chǎn)品能改善畜禽生長(zhǎng)性能，提高機(jī)體抗氧化能力和免疫力，且在育肥豬上最佳劑量是0.4%，然而該劑量在保育豬生產(chǎn)上是否為最佳劑量以及該產(chǎn)品對(duì)保育豬生長(zhǎng)性能、腹瀉率和血液指標(biāo)的影響均未見報(bào)道。本試驗(yàn)以保育豬為研究對(duì)象，觀察不同水平代謝有機(jī)酸對(duì)保育豬生長(zhǎng)性能、血清抗氧化功能和免疫性能的影響，為其在保育豬生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 試驗(yàn)方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用代謝有機(jī)酸產(chǎn)品由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所飼料資源開發(fā)室研制，以米糠粕粉為載體，與代謝有機(jī)酸（短鏈酮酸和少量乳酸）充分混合而成，其中米糠粕粉占70%，有機(jī)酸占30%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取144頭健康、體重相近的長(zhǎng)×大二元斷奶仔豬隨機(jī)分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12頭豬，各組公、母各半。Ⅰ組飼喂基礎(chǔ)日糧，Ⅱ、Ⅲ組分別飼喂加0.4%、0.5%代謝有機(jī)酸的日糧，基礎(chǔ)日糧參照NY/T65—2004配制成玉米-豆粕型全價(jià)日糧，基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)于2014年8月中旬至2014年9月下旬在廣州市從化市萬匯豬場(chǎng)進(jìn)行，采用高床漏縫地板飼養(yǎng)，試驗(yàn)期36 d，試驗(yàn)期間自由采食、自由飲水，每天觀察并記錄豬健康情況，免疫程序按常規(guī)進(jìn)行。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 生化指標(biāo)

試驗(yàn)始末，對(duì)各組保育豬逐頭空腹稱重，計(jì)算日均增重。記錄試驗(yàn)期間各組采食情況，計(jì)算日均采食量和料重比，同時(shí)統(tǒng)計(jì)每天腹瀉率。

腹瀉率(%)=腹瀉豬頭數(shù)/試驗(yàn)豬總頭數(shù)×100。

1.4.2 血樣采集

試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天，各重復(fù)隨機(jī)抽取1頭體重接近平均值的空腹保育豬前腔靜脈采血10 ml，37℃水浴30 min后3 000 r/min離心10 min，取血清，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 指標(biāo)檢測(cè)

1.5.1 抗氧化指標(biāo)

血清凍融后，試劑盒（南京建成生物工程研究所）測(cè)定血清總抗氧化能力(T-AOC)、過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)活性及丙二醛(MDA)含量，試驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.5.2 免疫指標(biāo)

血清免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）送往廣州中山大學(xué)達(dá)安臨床檢驗(yàn)中心檢測(cè)，試劑盒均購于上海慧豐生物技術(shù)有限公司。

1.6 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2007進(jìn)行數(shù)據(jù)整理，SPSS17.0軟件One-Way ANOVA進(jìn)行單因素方差分析，Duncan's法進(jìn)行多重比較，以P＜0.05為差異顯著標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。腹瀉率數(shù)據(jù)經(jīng)反正弦平方根轉(zhuǎn)換后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 代謝有機(jī)酸對(duì)保育豬生長(zhǎng)性能的影響(見表2)

表2 代謝有機(jī)酸對(duì)保育豬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，試驗(yàn)第2周，Ⅱ、Ⅲ組腹瀉率較Ⅰ組分別降低 71.40%(P＜0.01)、77.93%(P＜0.01)；試驗(yàn)第 3周，Ⅱ、Ⅲ組腹瀉率較Ⅰ組分別降低48.50%(P＜0.05)、57.08%(P＜0.05)；試驗(yàn)1～3周，Ⅱ、Ⅲ組腹瀉率相比Ⅰ組分別降低48.99%(P＜0.01)、47.20%(P＜0.01)，但Ⅱ、Ⅲ組之間腹瀉率差異不顯著(P＞0.05)。試驗(yàn)期間，各組日均增重、日均采食量和料重比統(tǒng)計(jì)差異均不顯著(P＞0.05)。

2.2 代謝有機(jī)酸對(duì)保育豬血清抗氧化指標(biāo)的影響(見表3)

由表3可知，與Ⅰ組相比，Ⅱ、Ⅲ組血清T-AOC分別提高 44.44%(P＜0.05)、26.16%(P＞0.05)，Ⅱ組 TAOC較Ⅲ組提高14.48%，差異不顯著(P＞0.05)；Ⅱ、Ⅲ組GSH-Px含量相比Ⅰ組分別提高51.17%和15.07%，差異均不顯著(P＞0.05)；Ⅱ、Ⅲ組血清SOD活性較Ⅰ組呈升高趨勢(shì)，但差異均不顯著(P＞0.05)；Ⅱ、Ⅲ組血清MDA含量較Ⅰ組分別降低11.57%、5.79%，差異均不顯著(P＞0.05)；Ⅱ、Ⅲ組血清CAT活性略低于Ⅰ組，差異不顯著(P＞0.05)。

表3 代謝有機(jī)酸對(duì)保育豬血液抗氧化指標(biāo)的影響

2.3 代謝有機(jī)酸對(duì)保育豬血清免疫指標(biāo)的影響

表4 代謝有機(jī)酸對(duì)保育豬免疫指標(biāo)的影響(g/l)

由表4可知，Ⅱ、Ⅲ組血清IgM相比Ⅰ組分別提高30.30%(P＜0.05)、42.42%(P＜0.05)，Ⅱ、Ⅲ組間血清IgM含量差異不顯著(P＞0.05)；各組 IgA、IgG含量統(tǒng)計(jì)差異均不顯著(P＞0.05)。

3 討論

3.1 代謝有機(jī)酸對(duì)保育豬生長(zhǎng)性能的影響

斷奶初期，由于日糧結(jié)構(gòu)和環(huán)境變化，造成保育豬斷奶應(yīng)激，加上消化道發(fā)育不完善，對(duì)食糜消化能力不足，引起小腸充血、腸黏膜受損并釋放大量炎性因子，易引發(fā)腹瀉，影響保育豬生長(zhǎng)。本試驗(yàn)表明，試驗(yàn)第2、3周，各水平有機(jī)酸均能顯著或極顯著降低保育豬腹瀉率，試驗(yàn)1～3周，各水平有機(jī)酸均極顯著降低保育豬腹瀉率，表明代謝有機(jī)酸能降低斷奶對(duì)保育豬造成的負(fù)面影響，維護(hù)保育豬腸道健康。日糧添加代謝有機(jī)酸，使飼糧系酸力降低，彌補(bǔ)了斷奶仔豬消化道酸度不足的問題，增加腸道消化酶活性和對(duì)食糜的消化程度，減少了食糜顆粒對(duì)腸黏膜的損傷，從而降低腹瀉率。此外，有機(jī)酸還能改善斷奶仔豬腸黏膜形態(tài)，抑制大腸桿菌等有害菌數(shù)量，而不影響乳酸菌等有益菌生長(zhǎng)，減少有害代謝產(chǎn)物對(duì)腸道損傷，降低腹瀉率。本次試驗(yàn)各試驗(yàn)組生長(zhǎng)性能略低于對(duì)照組，但統(tǒng)計(jì)差異不顯著，與栗敏研究結(jié)果不一致，可能是代謝有機(jī)酸飼喂時(shí)間不夠長(zhǎng)，在保育豬體內(nèi)不能形成累積效應(yīng)，因而對(duì)生長(zhǎng)性能無影響。

3.2 代謝有機(jī)酸對(duì)保育豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，不同水平代謝有機(jī)酸均能提高保育豬血清T-AOC、GSH-Px和SOD活性。關(guān)于有機(jī)酸的抗氧化作用，國(guó)內(nèi)外已有眾多研究人員進(jìn)行報(bào)道。研究發(fā)現(xiàn)，不同水平代謝有機(jī)酸均能降低機(jī)體MDA含量，且以5‰效果最好。據(jù)報(bào)道，α-酮戊二酸能提高斷奶仔豬血液SOD活性，同時(shí)降低血液MDA含量，且以1.0%效果最佳。資料表明，丙酮酸能增加心肌收縮力，提高心肌還原性谷胱甘肽含量。以上研究結(jié)果與本試驗(yàn)基本一致，原因在于外源性添加代謝有機(jī)酸能增加檸檬酸循環(huán)，額外產(chǎn)生的檸檬酸可抑制磷酸果糖激酶進(jìn)入磷酸戊糖旁路，生成還原性輔酶A，間接提高谷胱甘肽含量，提高抗氧化能力；部分有機(jī)酸的螯合作用減少了SOD活性中心微量元素在體內(nèi)的損失，進(jìn)而提高了SOD活性；同時(shí)，代謝有機(jī)酸在體內(nèi)可直接作為細(xì)胞燃料參與三羧酸循環(huán)，額外產(chǎn)生的能量有助于提升機(jī)體對(duì)自由基清除能力。

3.3 代謝有機(jī)酸對(duì)保育豬免疫能力的影響

體液免疫是機(jī)體重要防線，IgA、IgM和IgG是體液免疫的主要物質(zhì)，兩者在血清中含量的多少往往代表機(jī)體免疫能力的強(qiáng)弱。IgA分為分泌型和血清型兩種，分泌型IgA主要作為局部黏膜“屏障”參與黏膜反應(yīng)，血清型IgA在體內(nèi)主要發(fā)揮抗菌、抗病毒和抗毒素作用。IgM是機(jī)體發(fā)育和免疫應(yīng)答中出現(xiàn)最早的抗體，主要在免疫早期發(fā)揮保護(hù)作用，IgG是體內(nèi)含量最多的抗體，在體液免疫中發(fā)揮主要作用。

本研究表明，各水平代謝有機(jī)酸均能顯著提高保育豬血清IgM含量，提高機(jī)體免疫力，這主要得益于部分有機(jī)酸能抑制生長(zhǎng)抑制素分泌，解除生長(zhǎng)抑制素對(duì)機(jī)體的免疫抑制作用，同時(shí)促進(jìn)機(jī)體合成具有免疫增強(qiáng)作用的生長(zhǎng)素，促進(jìn)機(jī)體免疫細(xì)胞的分化，加強(qiáng)機(jī)體免疫能力。據(jù)報(bào)道，α-酮戊二酸聯(lián)合中草藥能提高斷奶大鼠血清IgM含量，與本研究結(jié)果基本一致，表明日糧添加代謝有機(jī)酸能提高機(jī)體免疫性能。另外，本試驗(yàn)中各組IgA和IgG含量無顯著差異，可能是代謝有機(jī)酸不能刺激相應(yīng)免疫細(xì)胞，促進(jìn)IgA和IgG合成和分泌，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，代謝有機(jī)酸對(duì)保育豬生長(zhǎng)性能無影響，但能極顯著降低1～3周保育豬腹瀉率，提高機(jī)體抗氧化能力和免疫力，且以0.4%添加水平效果最好。

（參考文獻(xiàn)15篇，刊略，需者可函索）