周興安，達(dá)林泰，烏蘭其其格 (內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院口腔科，內(nèi)蒙古呼和浩特010010)

0 引言

口腔鱗狀細(xì)胞癌是口腔頜面部腫瘤中常見(jiàn)的惡性腫瘤，局部浸潤(rùn)性強(qiáng)、易發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移［1］等為其最顯著的特性.在口腔頜面部惡性腫瘤中，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響預(yù)后的重要因素［2］.口腔癌的局部侵襲及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜且多因素相互調(diào)控的過(guò)程.腫瘤細(xì)胞通過(guò)多方面因素的共同參與、相互作用從而完成腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移.在口腔癌的發(fā)生及發(fā)展的研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)某些基因或蛋白質(zhì)分子具有顯著的調(diào)控作用，其可通過(guò)調(diào)節(jié)自身的表達(dá)進(jìn)而影響腫瘤的發(fā)生及發(fā)展，分子標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)及研究對(duì)于進(jìn)一步了解腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移機(jī)制起著積極的作用，也為預(yù)測(cè)腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移提供了一種新的方式及平臺(tái).這對(duì)于研究腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素、監(jiān)測(cè)腫瘤的發(fā)展以及調(diào)整治療方案均起著重要的推動(dòng)作用.近年來(lái)分子標(biāo)記物在OSCC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的研究領(lǐng)域已成為熱門研究方向，同時(shí)也取得了一定的成就，對(duì)進(jìn)一步了解OSCC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移機(jī)制起到積極的促進(jìn)作用，本研究將對(duì)于近幾年口腔癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)分子標(biāo)記物的研究進(jìn)展做一綜述.

1 原癌基因

腫瘤的形成是一個(gè)多因素作用的產(chǎn)物，而基因在其調(diào)控、轉(zhuǎn)錄、表達(dá)等過(guò)程的異常表達(dá)又是腫瘤形成的基礎(chǔ).當(dāng)今學(xué)者們公認(rèn)的與腫瘤發(fā)生相關(guān)的兩大基因分類為癌基因和抑癌基因.國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究也發(fā)現(xiàn)了許多常見(jiàn)的癌基因家族，它們通過(guò)與DNA結(jié)合調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子、其產(chǎn)物通過(guò)對(duì)改變細(xì)胞的蛋白酶水平或調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)因子等方面促進(jìn)腫瘤的形成.如當(dāng)Ras基因被異?；罨?，其編碼p21ras蛋白持續(xù)地保持活化狀態(tài)，激活下游信號(hào)分子，造成細(xì)胞生長(zhǎng)失控從而無(wú)限制地增殖，從而引起腫瘤［3］.Ras基因家族是一類重要的癌基因，主要分為3類:H-Ras、K-Ras和N-Ras，其中K-Ras的突變最為常見(jiàn).多項(xiàng)研究證實(shí)，Ras基因在胰腺癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起著重要的作用［4］.胰腺上皮內(nèi)瘤變的分級(jí)和K-Ras的突變率呈正相關(guān)［5］.國(guó)外學(xué)者也在研究中發(fā)現(xiàn)［6］，K-Ras基因在胰腺導(dǎo)管癌和壺腹癌中均存在高表達(dá).另有一些研究也提示，RasGTP酶活化蛋白R(shí)asGAPs(GTPase-activating proteins，RasGAPs)的功能缺失可能會(huì)使Ras活性異常增高，繼而導(dǎo)致腫瘤發(fā)生及發(fā)展［7］.RasGAPs成員中的 RASAL1在鼻咽癌、乳腺癌、肺癌、肝癌、食管癌、淋巴瘤等6種腫瘤細(xì)胞株以及鼻咽癌、口腔鱗癌腫瘤組織中的表達(dá)均有不同程度的下調(diào)［8］.癌基因中另外一個(gè)重要的家族成員是Scr家族，其是一類由許多細(xì)胞外信號(hào)分子激活的非受體蛋白酪氨酸激酶.Src對(duì)維持機(jī)體正常生理功能具有重要作用，在正常細(xì)胞和組織中，它的活化狀態(tài)是短暫而且被精確調(diào)控.而與正常細(xì)胞相比，在許多腫瘤細(xì)胞中由于失去了精確的負(fù)性調(diào)控，Src不僅高表達(dá)且在腫瘤細(xì)胞或者間質(zhì)中持續(xù)活化，從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展.有研究發(fā)現(xiàn)［9］，在乳腺癌組織中，Src蛋白活性明顯增高，另有研究者發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組織中，c-Src蛋白激酶活性有一定程度的提高，而c-Src蛋白激活和c-Src蛋白的高表達(dá)并不總能引起癌細(xì)胞的增殖，在某些乳腺癌細(xì)胞組織中，Src蛋白激活的結(jié)果僅是減弱胞間粘連，并不引起細(xì)胞的增殖，因此c-Src蛋白是否能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖需進(jìn)一步研究［10］.Myc家族是原癌基因家族的一個(gè)重要的組成部分，其主要在促進(jìn)細(xì)胞增殖、抑制細(xì)胞分化、調(diào)節(jié)細(xì)胞周期等方面發(fā)揮功效，而Myc基因表達(dá)水平增高對(duì)于細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化和腫瘤的形成起著促進(jìn)作用，約70%腫瘤患者發(fā)現(xiàn)C-Myc基因的突變以及其相關(guān)蛋白表達(dá)失調(diào)［11］.有相關(guān)研究報(bào)道［12］，在宮頸癌的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中，c-Src基因的陽(yáng)性表達(dá)率與宮頸病變的發(fā)展階段呈正相關(guān).另有研究報(bào)道［13］，Myc基因在肝癌、彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤等腫瘤的發(fā)展及預(yù)后中均有著一定的作用.但在口腔癌方面，Myc基因相關(guān)的報(bào)道仍甚少，這也是今后需要進(jìn)一步研究及探討的方向.

2 抑癌基因

抑癌基因指能夠抑制細(xì)胞癌基因活性的一類基因，其功能是抑制細(xì)胞周期、阻止細(xì)胞擴(kuò)增以促使細(xì)胞凋亡.因此，抑癌基因的失活在腫瘤的形成過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用，其抑癌能力的失調(diào)是腫瘤形成的基礎(chǔ).過(guò)往的大量研究認(rèn)為抑癌基因失活主要有兩條途徑:基因突變和雜合性缺失(loss of heterozygosity，LOH)等基因結(jié)構(gòu)改變.近些年的很多研究發(fā)現(xiàn)，DNA甲基化(DNA methylation)可能是腫瘤抑癌基因失活的第三種機(jī)制，并且在某些情況下是抑癌基因失活的唯一機(jī)制.DNA甲基化可通過(guò)直接抑制轉(zhuǎn)錄因子和其所識(shí)別區(qū)域的DNA連接或形成甲基胞嘧啶連接蛋白(methylcytosine binding proteins，MBPs)復(fù)合物間接抑制轉(zhuǎn)錄因子與DNA的連接，以此來(lái)調(diào)節(jié)基因的表達(dá).DNA甲基化早于細(xì)胞的惡性增生，因此，DNA甲基化的診斷對(duì)于腫瘤早期預(yù)測(cè)具有重要意義.有相關(guān)的研究報(bào)道［14］，抑癌基因的高甲基化在甲狀腺腫瘤、乳腺癌、肺癌及直腸癌的腫瘤形成及發(fā)展過(guò)程均起著重要的作用.如對(duì)比正常甲狀腺組織和甲狀腺腫瘤組織，顯示正常組織約有13%發(fā)生P16啟動(dòng)子區(qū)高甲基化，而甲狀腺腫瘤組織高甲基化超過(guò)40%，并且伴有P16蛋白表達(dá)缺失，因此推測(cè)P16啟動(dòng)子區(qū)高甲基化可能是與甲狀腺腫瘤的形成有關(guān)［15］.而P16不僅在甲狀腺腫瘤發(fā)生中起著重要的作用，近來(lái)越來(lái)越多的研究報(bào)道，其對(duì)于口腔癌的形成也起著重要的促進(jìn)作用.國(guó)外學(xué)者在文獻(xiàn)中報(bào)道［16］，通過(guò)口腔頜面部惡性腫瘤進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)p16基因具有較高的甲基化率，推測(cè)其P16基因的甲基化與口腔頜面部惡性腫瘤的形成有一定的關(guān)聯(lián)性.有研究報(bào)道［17］，在癌旁組織中P16基因的蛋白陽(yáng)性表達(dá)率也要明顯高于正常組織，推測(cè)其在腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移等方面起著一定的作用.另外MINT(munc-18-interacting protein-1)是細(xì)胞接合體分子蛋白，主要參與細(xì)胞膜構(gòu)建和物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)，最初是在結(jié)腸癌中發(fā)現(xiàn)有甲基化.國(guó)外相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)［18］，MINT1和MINT31在口腔癌中也有較高的甲基化，并且甲基化率與腫瘤的TNM分期和低生存率有關(guān)，預(yù)后差者M(jìn)INT1甲基化率高.近年來(lái)多項(xiàng)研究報(bào)道［19］，抑癌基因P53與癌基因Ras在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展的過(guò)程中有著密切的聯(lián)系，p53通路不僅可以調(diào)控Ras，同時(shí)也可以接受Ras信號(hào)通路的調(diào)控，并且二者可以共同對(duì)某些目的基因進(jìn)行調(diào)控，p53對(duì) Ras的調(diào)控可以通過(guò)ATF3、BTG2以及NF-KB和microRNA-34a等來(lái)實(shí)現(xiàn)，而KRas通過(guò)snail對(duì)p53的抑制正是Ras調(diào)控p53的一個(gè)證據(jù).正常情況下，p53與Ras相互調(diào)控，各自處于維持機(jī)體穩(wěn)態(tài)的最佳水平，任何一方發(fā)生基因異常(突變或缺失)或表達(dá)量的改變，通過(guò)直接或間接的調(diào)控作用，最終會(huì)造成另一方的基因異常或表達(dá)量的改變.而抑癌基因P53和Ras基因均在大量的研究報(bào)道中證實(shí)其對(duì)腫瘤形成及發(fā)展的過(guò)程起著重要的作用，而其互相間相互協(xié)調(diào)作用的研究仍較少.因此我們推測(cè)在一種或幾種腫瘤細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)過(guò)程發(fā)現(xiàn)兩者之間的相互協(xié)調(diào)作用將會(huì)影響腫瘤的發(fā)生及發(fā)展，這種機(jī)制在其他腫瘤上能否同樣實(shí)現(xiàn)，這將是未來(lái)一個(gè)研究熱點(diǎn)，而其在口腔癌上的研究領(lǐng)域仍處于空白階段，這就為我們?cè)诳谇话┮职┗蚺c癌基因之間協(xié)調(diào)作用對(duì)于口腔癌的形成及發(fā)展的關(guān)聯(lián)提出了疑問(wèn)，也為我們的研究提供了一個(gè)新的方向.

3 細(xì)胞間黏附力分子

細(xì)胞黏附分子(cellular adhesive molecular，CAM)是一種糖蛋白，其具有調(diào)節(jié)細(xì)胞與細(xì)胞之間、細(xì)胞與間質(zhì)之間的黏附能力的功能，對(duì)于OSCC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有重要的調(diào)節(jié)作用.基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)是目前已知的一類重要細(xì)胞黏附分子，在OSCC的侵襲及轉(zhuǎn)移中起著重要的作用，其通過(guò)調(diào)節(jié)基質(zhì)的降解能力從而增強(qiáng)對(duì)基底膜及細(xì)胞外基質(zhì)屏障的突破能力，提高癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移及侵襲能力.有研究發(fā)現(xiàn)［20］，MMP-7在高分化的口腔鱗癌組織中表達(dá)高，在低分化的口腔鱗癌組織中表達(dá)低，因此MMP-7具備成為新的分子標(biāo)記物的潛質(zhì).國(guó)外學(xué)者在研究中發(fā)現(xiàn)［21］，MMP-2在正常組織中與癌組織中的表達(dá)未見(jiàn)明顯變化，但淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織中MMP-2相較于未轉(zhuǎn)移患者有明顯的增高，推測(cè)其可能在腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過(guò)程中起著一定的作用.另有文獻(xiàn)報(bào)道［22］，在 OSCC中 MMP-9通過(guò)激活 FAK/PI3K/AKT這一信號(hào)通路促使OSCC患者的侵襲和轉(zhuǎn)移，并推測(cè)MMP-9是具有OSCC轉(zhuǎn)移潛能的一個(gè)標(biāo)記物.另外CD44是目前尚未歸類的細(xì)胞黏附分子，其屬于透明質(zhì)酸受類，主要參與調(diào)控細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間的黏附能力，其表達(dá)對(duì)于腫瘤細(xì)胞與周圍組織的黏附作用以及其轉(zhuǎn)移及侵襲能力的提高具有重要的意義，同時(shí)CD44在腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)灶，形成同質(zhì)瘤栓以及突破血管轉(zhuǎn)移的侵襲過(guò)程中發(fā)揮著非常重要的作用.有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道［23］，癌組織中CD44V的表達(dá)明顯高于正常組織，所以推測(cè)CD44V的表達(dá)水平與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及預(yù)后治療的關(guān)系密切.有研究報(bào)道［24］，通過(guò)免疫組化法研究CD44的表達(dá)與乳腺癌發(fā)生及發(fā)展的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CD44在正常乳腺組織幾乎不表達(dá)，而在乳腺癌中高表達(dá)，且在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性率差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明CD44同乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān).有研究發(fā)現(xiàn)［25］，CD44在OSCC中存在高表達(dá)，且其在正?？谇唤M織及OSCC中的表達(dá)不因口腔上皮部位的不同而不同，推測(cè)CD44對(duì)于口腔鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生及發(fā)展具有重要意義，但其在OSCC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用尚處于探索階段，具有重要的研究?jī)r(jià)值.

4 腫瘤淋巴管及血管生成相關(guān)因子

淋巴道轉(zhuǎn)移是口腔鱗癌轉(zhuǎn)移的主要途徑，也是影響患者預(yù)后的重要因素之一.因此，研究口腔癌淋巴管生成情況對(duì)于探討腫瘤轉(zhuǎn)移的機(jī)制及對(duì)腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的治療和愈后具有重要意義.而目前已知對(duì)于促腫瘤周圍組織淋巴管及血管生成因子中最重要的當(dāng)屬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF).VEGF通過(guò)與淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞上的特異受體相結(jié)合，繼而激活多條細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路，誘導(dǎo)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖，或者通過(guò)降低淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞間的黏附，提高淋巴管的通透性，從而促進(jìn)腫瘤淋巴管生成和淋巴道轉(zhuǎn)移.有研究報(bào)道［26］，對(duì)比OSCC組織與正常人體組織，VEGF在OSCC組的陽(yáng)性表達(dá)率是約為正常組織10倍.有學(xué)者在研究中發(fā)現(xiàn)［27］，口腔癌VEGF-C及其受體與癌周淋巴管生成及淋巴道轉(zhuǎn)移的關(guān)系，結(jié)果顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的VEGF-C表達(dá)率明顯高于非轉(zhuǎn)移組，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組比無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的血管和淋巴管密度均明顯增加，提示VEGF-C促進(jìn)了口腔癌周淋巴管和血管的增生.另外有文獻(xiàn)報(bào)道［28］，利用VEGFR-3的一種抑制劑SAR131675對(duì)多種惡性腫瘤的動(dòng)物模型進(jìn)行干預(yù)，發(fā)現(xiàn)其對(duì)惡性腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移起到明顯的抑制作用，尤其是在對(duì)乳腺癌鼠模型中，其抑制率達(dá)50%，提示VEGFR-3增強(qiáng)腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的能力.另外還有一些促淋巴管生成因子如血小板衍生性生長(zhǎng)因子(platelet-derived growth factor，PDGF)、透明質(zhì)酸(Hyaluronan，HA)、突足膜蛋白(Podoplanin)等均對(duì)腫瘤淋巴管生成以及淋巴道轉(zhuǎn)移起著一定的促進(jìn)作用.例如有學(xué)者在研究中發(fā)現(xiàn)［29］，淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞透明質(zhì)酸受體-1(lymphatic vessel endothe hyaluronic acid receptor-1.LYVE-1)與CD44具有同源性，HA與之結(jié)合可促進(jìn)腫瘤淋巴管的生成.近些年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了一些新型的OSCC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分子標(biāo)記物，這些標(biāo)記物包括:Prox-1［30］、淋巴管內(nèi)皮受體-1以及 VEGF-3等.但目前已知的的這些標(biāo)記物仍存在著例如敏感性不高、檢測(cè)手段復(fù)雜等多方面的不利因素，使其仍處于實(shí)驗(yàn)室研究階段，因此尋找高效且檢測(cè)便宜的分子標(biāo)記物仍需學(xué)者們的進(jìn)一步探索.

5 上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)因子

上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(enithelial-mesenehymal transition，EMT)是指連接緊密、不能運(yùn)動(dòng)的上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化為連接疏松、具有遷移活動(dòng)性的間質(zhì)組織.近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，EMT在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中扮演著重要的角色.EMT能夠大大增強(qiáng)了腫瘤細(xì)胞從腫瘤的原發(fā)部位游離并向遠(yuǎn)處侵襲和擴(kuò)散的能力.而EMT主要通過(guò)上皮鈣黏蛋白(epithelial-cadherin，E-cadherin)表達(dá)的下調(diào)及神經(jīng)鈣黏蛋白(nervecadherin，N-cadherin)表達(dá)的上調(diào)，導(dǎo)致癌細(xì)胞間的同型黏附的下調(diào)，而由N-cadherin介導(dǎo)的與間質(zhì)細(xì)胞的黏附能力的增強(qiáng)，在大量的實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)，在EMT過(guò)程中，眾多轉(zhuǎn)錄因子(Snail，Slug，Twist，ZEB1 和 ZEB2 等)表達(dá)的升高，而這些轉(zhuǎn)錄因子均可以入核直接與E-cadherin基因啟動(dòng)子區(qū)域的 E-box結(jié)合，從而抑制其轉(zhuǎn)錄，因此，E-cadherin表達(dá)的缺失是EMT發(fā)生的重要標(biāo)志之一，其與OSCC侵襲及轉(zhuǎn)移存在密切關(guān)系［31］.有相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)［32］，Akt信號(hào)通路的抑制劑可以通過(guò)Akt/PKB信號(hào)通路降低 Snail和 Slug的表達(dá)進(jìn)而恢復(fù)E-cadherin的表達(dá)，并推斷Akt信號(hào)通路的抑制劑可以作為治療OSCC的治療靶點(diǎn).近來(lái)有研究報(bào)道［33］，ILK可以在 OSCC中上調(diào) N-cadherin和 Snail，下調(diào)E-cadherin，從而促進(jìn)EMT的發(fā)生且促進(jìn)了OSCC的侵襲和轉(zhuǎn)移.有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道［34］，口腔鱗癌中其他的上皮標(biāo)記物α-catenin、β-catenin膜表達(dá)量減少，并且推測(cè)其與OSCC區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān).另外有研究報(bào)道［35］，TGF-β(transforming growth factor-β，TGF-β)家族成員可以在許多病理情況下啟動(dòng)和維持EMT，尤其是通過(guò)重要信號(hào)通路的激活，由此推測(cè)TGF-β家族成員對(duì)于EMT啟動(dòng)及維持有著重要的意義.因此，EMT對(duì)于增強(qiáng)腫瘤侵襲及轉(zhuǎn)移能力起著重要的作用，也為尋找新的分子標(biāo)記物提供了一種新的思路及方向.

6 總結(jié)

綜上所述，口腔癌的侵襲和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響口腔癌患者預(yù)后及生存質(zhì)量的重要因素.口腔癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)分子標(biāo)記物的研究對(duì)于進(jìn)一步了解腫瘤的形成及轉(zhuǎn)移機(jī)制有著重要推動(dòng)作用.隨著基因組學(xué)的完善以及新的科研研究技術(shù)的不斷進(jìn)展，我們?cè)诳谇话┝馨徒Y(jié)轉(zhuǎn)移的方面已經(jīng)取得了一些進(jìn)展，但不可否認(rèn)的是分子標(biāo)記物的研究仍是目前轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的急需被解決的問(wèn)題之一.尋找一個(gè)穩(wěn)定、特異性程度高且便于檢測(cè)的分子標(biāo)記物仍是一個(gè)需要進(jìn)一步探討及研究的問(wèn)題.但可以確定的一點(diǎn)是隨著研究的進(jìn)一步深入，更多新型分子標(biāo)記物將會(huì)被發(fā)現(xiàn)、被了解，這些都將為我們研究及攻克癌癥提供有力的依據(jù)及保障.

［1］張 舒，王 博，周 旋，等.趨化因子CXC亞家族受體4調(diào)控口腔鱗狀細(xì)胞癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化介導(dǎo)淋巴轉(zhuǎn)移的體外實(shí)驗(yàn)［J］.中華口腔醫(yī)學(xué)雜志，2014，49(3):171-176.

［2］Ong W，Zhao R，Lui B，et al.Prognostic significance of lymph node density in squamous cell carcinoma of the tongue［J］.Head Neck，2015，dio:10.1002/head 24113.

［3］Huff LP，DeCristo MJ，Cox AD.Effector recruitment method to study spatially regulated activation of Ras and Rho GTPases［J］.Methods Mol Biol，2014，1120:263-283.

［4］Lee S，Heinrich EL，Lu J，et al.Epidermal growth factor receptor signaling to the mitogen activated protein kinase pathway bypasses ras in pancreatic cancer cells［J］.Pancreas，2015，dio:10.1097/MPA.0000000000000379.

［5］Fernandez C，Chetaille B，Tasei AM，et al.From pancreatic intraepithelial neoplasia to cancer:a dramatic progression with K-ras status analysis［J］.Gastroenterol Clin Biol，2005，29(4):465-468.

［6］Kinugasa H，Nouso K，Miyahara K，et al.Detection of K-ras gene mutation by liquid biopsy in patients with pancreatic cancer［J］.Cancer，2015，dio:10.1002/cncr.29364.

［7］Ohta M，Seto M，Ijichi H，et al.Decreased expression of the RAS-GTPase activating protein RASAL1 is associated with colorectal tumor progression［J］.Gastroenterology，2009，136(1):206-216.

［8］Grewal T，Koese M，Tebar F，et al.Differential Regulation of RasGAPs in Cancer［J］.Genes Cancer，2011，2(3):288-297.

［9］Vasanthakumar A，Moro K，Xin A，et al.The transcriptional regulators IRF4，BATF and IL-33 orchestrate development and maintenance of adipose tissue-resident regulatory T cells［J］.Nat Immunol，2015，16(3):276-285.

［10］Frame MC.Src in cancer:deregulation and consequences for cell behaviour［J］.Biochim Biophys Acta，2002，1602(2):114-130.

［11］Gordan JD，Thompson CB，Simon MC.HIF and c-Myc:sibling rivals for control of cancer cell metabolism and proliferation［J］.Cancer Cell，2007，12(2):108-113.

［12］Hou T，Xiao J，Zhang H，et al.Phosphorylated c-Src is a novel predictor for recurrence in cervical squamous cell cancer patients［J］.Int J Clin Exp Pathol，2013，6(6):1121-1127.

［13］Cui J，Dong BW，Liang P，et al.Effect of c-myc，Ki-67，MMP-2 and VEGF expression on prognosis of hepatocellular carcinoma patients undergoing tumor resection［J］.World J Gastroenterol，2004，10(10):1533-1536.

［14］Karlsson A，Jonsson M，Lauss M，et al.Genome-wide DNA methylation analysis of lung carcinoma reveals one neuroendocrine and four adenocarcinoma epitypes associated with patient outcome［J］.Clin Cancer Res，2014，20(23):6127-6140.

［15］Mancikova V，Buj R，Castelblanco E，et al.DNA methylation profiling of well-differentiated thyroid cancer uncovers markers of recurrence free survival［J］.Int J Cancer，2014，135(3):598-610.

［16］Liu H，Liu XW，Dong G，et al.P16 Methylation as an Early Predictor for cancer development from oral epithelial dysplasia:A double-blind multicentre prospective study［J］.EBioMedicine，2015，2(5):432-437.

［17］Schulz P，Scholz A，Rexin A，et al.Inducible re-expression of p16 in an orthotopic mouse modelofpancreatic cancerinhibits lymphangiogenesis and lymphatic metastasis［J］.Br J Cancer，2008，99(1):110-117.

［18］Du Z，Ma K，Sun X，et al.Methylation of RASSF1A gene promoter and the correlation with DNMT1 expression that may contribute to esophageal squamous cell carcinoma［J］.World J Surg Oncol，2015，13(1):141.

［19］Donninger H，Calvisi DF，Barnoud T，et al.NORE1A is a Ras senescence effector that controls the apoptotic/senescent balance of p53 via HIPK2［J］.J Cell Biol，2015，208(6):777-789.

［20］Li TJ，Cui J.COX-2，MMP-7 expression in oral lichen planus and oral squamous cell carcinoma［J］.Asian Pac J Trop Med，2013，6(8):640-643.

［21］Lawal AO，Adisa AO，Kolude B，et al.Immunohistochemical expression of MMP-2 and MMP-8 in oral squamous cell carcinoma［J］.J Clin Exp Dent，2015，7(2):e203-e207.

［22］Fan HX，Wang S，Zhao H，et al.Sonic hedgehog signaling may promote invasion and metastasis of oral squamous cell carcinoma by activating MMP-9 and E-cadherin expression［J］.Med Oncol，2014，31(7):41.

［23］Zeilstra J，Joosten SP，van Andel H，et al.Stem cell CD44v isoforms promote intestinal cancer formation in Apc(min)mice downstream of Wnt signaling［J］.Oncogene，2014，33(5):665-670.

［24］Wang F，Yang Y.Suppression of the xCT-CD44v antiporter system sensitizes triple-negative breast cancer cells to doxorubicin［J］.Breast Cancer Res Treat，2014，147(1):203-210.

［25］Oliveira LR，Castilho-Fernandes A，Oliveira-Costa JP，et al.CD44+/CD133+ immunophenotype and matrix metalloproteinase-9:Influence on prognosis in early-stage oral squamous cell carcinoma［J］.Head Neck，2014，36(12):1718-1726.

［26］Kammerer PW，Al-Nawas B，Kalkan S，et al.Angiogenesis-related prognosis in patients with oral squamous cell carcinoma-role of the VEGF+936 C/T polymorphism［J］.J Oral Pathol Med，2015，44(6):429-436.

［27］Morita Y，Hata K，Nakanishi M，et al.Cellular fibronectin 1 promotes VEGF-C expression，lymphangiogenesis and lymph node metastasis associated with human oral squamous cell carcinoma［J］.Clin Exp Metastasis，2015.

［28］Espagnolle N，Barron P，Mandron M，et al.Specific Inhibition of the VEGFR-3 tyrosine kinase by SAR131675 reduces peripheral and tumor associated immunosuppressive myeloid cells［J］.Cancers(Basel)，2014，6(1):472-490.

［29］Ozmen F，Ozmen MM，Ozdemir E，et al.Relationship between LYVE-1，VEGFR-3 and CD44 gene expressions and lymphatic metastasis in gastric cancer［J］.World J Gastroenterol，2011，17(27):3220-3228.

［30］Mouta CC，Nasser SM，di Tomaso E，et al.LYVE-1 is not restricted to the lymph vessels:expression in normal liver blood sinusoids and down-regulation in human liver cancer and cirrhosis［J］.Cancer Res，2001，61(22):8079-8084.

［31］Chaw SY，Majeed AA，Dalley AJ，et al.Epithelial to mesenchymal transition(EMT)biomarkers--E-cadherin，beta-catenin，APC and Vimentin--in oral squamous cell carcinogenesis and transformation［J］.Oral Oncol，2012，48(10):997-1006.

［32］Hong KO，Kim JH，Hong JS，et al.Inhibition of Akt activity inducesthe mesenchymal-to-epithelialreverting transition with restoring E-cadherin expression in KB and KOSCC-25B oral squamous cell carcinoma cells［J］.J Exp Clin Cancer Res，2009，28:28.

［33］Zheng K，Wang G，Li C，et al.Knockdown of ILK inhibits glioma development via upregulation of E-cadherin and downregulation of cyclin D1［J］.Oncol Rep，2015，34(1):272-278.

［34］Ravindran G，Sawant SS，Hague A，et al.Association of differential beta-catenin expression with Oct-4 and Nanog in oral squamous cell carcinoma and their correlation with clinicopathological factors and prognosis［J］.Head Neck，2015，37(7):982-993.

［35］Yu H，Shen Y，Hong J，et al.The contribution of TGF-beta in Epithelial-Mesenchymal Transition(EMT):Down-regulation of E-cadherin via snail［J］.Neoplasma，2015，62(1):1-15.