■樂紅權 許增高 陳紅英 胡方圓 丁珊珊

（無錫華諾威動物保健品有限公司，江蘇無錫 214101）

碘是人們發(fā)現的動物第二種必需微量元素，其主要作用是參與機體甲狀腺素的合成，從而間接影響動物機體的生理功能。動物碘缺乏，可使動物生長受阻、繁殖力下降，而碘用量過大，也可導致高碘甲狀腺腫大，引起動物中毒。因此，準確測定飼料中碘的含量具有十分重要的意義。

目前，飼料添加劑品種目錄（2013）中含碘化合物僅有碘化鉀、碘化鈉、碘酸鉀、碘酸鈣4種。

飼料中碘的測定采用GB/T 13882的方法檢測，但該標準只能測定飼料中的碘離子，即只能測定碘化鉀和碘化鈉，對碘酸鉀和碘酸鈣則不能測定。因此，我們需要一種能測定飼料中總碘的方法。因為碘酸根在酸性條件下具有強氧化性，所以我們采取在稀硫酸條件下，加入過量的偏重亞硫酸鈉，使樣品中的碘全部還原成碘離子，再用離子對色譜法測定溶液中的碘離子。

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀（島津LC-10AT）；超聲波清洗器（JL-180DT型，上海吉理超聲儀器有限公司）；離心機（CT14D型，上海天美科學儀器有限公司）；電子天平（AG285型，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司）；偏重亞硫酸鈉（分析純）；甲醇（色譜純）；四丁基硫酸氫銨（離子對試劑）；碘化鉀（分析純）；硫酸（分析純）；色譜用水為去離子水，符合GB/T 6682.1中一級用水規(guī)定。

1.2 試驗方法

1.2.1 溶液制備

1.2.1.1 稀硫酸：取硫酸57 ml，加水稀釋至1 000 ml，即得。

1.2.1.2 四丁基硫酸氫銨溶液：稱取1.7 g四丁基硫酸氫銨，精確至0.01 g，加入盛有1 000 ml水的燒杯中，攪拌至完全溶解。

1.2.1.3 碘標準貯備溶液(含碘1 mg/ml)：稱取0.130 8 g經120℃干燥2 h、于干燥器中冷卻的碘化鉀溶于水，移入100 ml棕色容量瓶中，用水稀釋并定容至刻度，搖勻備用，3個月內有效。

1.2.2 色譜條件

色譜柱：C18柱，柱長250 mm，內徑4.6 mm，粒度5 μm或性能類似的分析柱；柱溫：40℃；流動相：四丁基硫酸氫銨溶液+甲醇=85+15；檢測器：紫外檢測器；檢測波長：225 nm；進樣量：20 μl。

1.2.3 標準曲線的繪制

精密量取碘標準貯備溶液適量，加水稀釋制成含碘量分別為2、5、10、15、20 μg/ml的標準工作液，分別注入色譜儀，測定各濃度工作液的峰面積。以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。

1.2.4 樣品的前處理

稱取樣品0.5～5 g，精確至0.000 1 g，于100 ml棕色容量瓶中。加0.5 g偏重亞硫酸鈉，60 ml水，再加10 ml稀硫酸，置超聲提取器中超聲提取30 min（中間旋搖一次以防樣品附著瓶底），待溫度降至室溫后用水稀釋并定容至刻度，過濾（若濾液渾濁則需離心）。取部分清澈的溶液過0.45 μm濾膜,控制濃度在2.0～20 μg/ml，待上機。

1.2.5 回收率與精密度的測定

1.2.5.1 樣品的制備

①稱取1000 g空白飼料，分別添加一定量的碘化鉀，混合均勻，使樣品含碘量分別為100、400、800、1 200 mg/kg。

②稱取1 000 g空白飼料，分別添加一定量的碘酸鈣，混合均勻，使樣品含碘量分別為100、400、800、1 200 mg/kg。

1.2.5.2 按1.2.4節(jié)的方法對樣品處理和測定，根據峰面積計算其濃度和添加回收率。每個濃度的樣品設置3個重復。

1.2.6 穩(wěn)定性的測定

樣品制備好后，間隔24 h復測，比較兩次結果。

2 結果

2.1 標準曲線

碘標準工作液濃度在2～20 μg/ml范圍內時，色譜峰面積與碘離子濃度呈良好的線性關系?；貧w曲線和方程見圖1。

圖1 碘的標準曲線

2.2 添加回收率與精密度

標準工作液色譜圖，空白飼料加碘化鉀及空白飼料加碘酸鈣按1.2.4處理色譜圖見圖2。添加回收率和變異系數見表1。

圖2 標準工作液及樣品色譜

表1 添加回收率和變異系數（n=3）

從表1可看出，平均加樣回收率為88.4%～102.8%，變異系數為0.8%～2.4%,說明本方法具有較高的準確度及精密度，可以滿足檢測要求。

2.3 穩(wěn)定性試驗（見表2）

樣品按1.2.4節(jié)處理后，第一次檢測結果與24 h后復測結果見表2。從表2可看出，兩次檢測結果無顯著性差異。

3 討論

3.1 方法的適用范圍

實際上，飼料中的碘化鈉、碘酸鉀亦可用此方法測定，本文只舉例了碘化鉀、碘酸鈣說明方法的可靠性。由于飼料中有很多組分具有氧化性，因此，不論飼料中添加的是碘化鉀、碘化鈉，還是碘酸鉀、碘酸鈣，在樣品處理時，均需加入過量的偏重亞硫酸鈉，以保證樣品中的碘全部變?yōu)槭虦y的碘離子。

3.2 還原劑的選擇和用量

在樣品前處理中，我們發(fā)現加入0.2 g的偏重亞硫酸鈉可將碘完全還原為碘離子，為防止某些樣品中氧化劑含量過高，不能將碘完全還原，將偏重亞硫酸鈉的用量提升到0.5 g。

3.3 酸的選擇和用量

在剛開始時，樣品前處理中加入的酸為冰乙酸，用量為10 ml，結果不能將碘完全還原為碘離子，后將冰乙酸用量改為20 ml，仍不能將碘完全還原為碘離子。我們分析應該是冰乙酸的酸性太弱的原因，故將冰乙酸改為稀硫酸，試驗表明，稀硫酸用量為10 ml時，碘可完全被還原為碘離子。

4 結論

本方法操作簡單，分析速度快，重現性強，準確度高，可用于飼料（微量元素預混料、復合預混料、配合飼料）中碘的測定。