亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        黃奇楠生物活性和化學成分的研究

        2015-01-18 07:23:09楊錦玲梅文莉蔡彩虹董文化陳亮亮戴好富
        中成藥 2015年8期
        關鍵詞:倍半萜乙醚酯酶

        楊錦玲, 梅文莉, 蔡彩虹, 董文化, 陳亮亮, 戴好富*

        (1.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院熱帶生物技術研究所,海南省沉香工程技術研究中心,海南 海口 571101;2.海南大學園藝園林學院,海南???70228)

        黃奇楠生物活性和化學成分的研究

        楊錦玲1,2, 梅文莉1, 蔡彩虹1, 董文化1, 陳亮亮1, 戴好富1*

        (1.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院熱帶生物技術研究所,海南省沉香工程技術研究中心,海南 海口 571101;2.海南大學園藝園林學院,海南???70228)

        目的研究黃奇楠的生物活性,并分析其化學成分。方法對黃奇楠乙醚提取物進行抗菌、抗腫瘤、乙酰膽堿酯酶抑制和降血糖活性測試,然后應用HP6890/5975CGC/MS聯(lián)用儀分析其化學成分。結果乙醚提取物對金黃色葡萄球菌、慢性髓原白血病細胞K562、人胃癌細胞SGC-7901、乙酰膽堿酯酶和α-葡萄糖苷酶均表現(xiàn)出較好的抑制活性。同時,GC-MS檢測到30個成分 (相對含有量為91.46%),并鑒定了其中26個化合物,包括16個倍半萜類成分(相對含有量為52.94%)和3個2-(2-苯乙基)色酮類成分 (相對含有量為16.09%)。其中,有7個倍半萜具有香味(相對含有量為36.29%)。結論黃奇楠乙醚提取物具有抗菌、抗腫瘤、乙酰膽堿酯酶抑制和降血糖活性,并含有多種化學成分,主要為倍半萜類型。

        黃奇楠;乙醚提取物;抗菌;抗腫瘤;乙酰膽堿脂酶抑制;降血糖;GC-MS;化學成分

        沉香為瑞香科沉香屬植物中含有樹脂的木材,其中白木香Aquilaria sinensis是我國唯一的沉香基源植物,主產(chǎn)于海南、廣東等地[1-3]。沉香為我國傳統(tǒng)名貴中藥,可作為鎮(zhèn)靜和鎮(zhèn)痛劑,具有降氣溫中,暖腎納氣功效,用于治療喘息、胃痛、嘔吐呃逆、脘腹脹痛、腰膝虛冷、大腸虛秘、胃痛、咳嗽、風濕和高熱等癥狀[1,4],其作為藥物,最早記載于梁代陶弘景的 《名醫(yī)別錄》[5]。至今,該植物已是160多個中成藥的主要組方原料,例如沉香化滯丸、沉香養(yǎng)胃丸、常松八味沉香片、著名良藥“救心丸”等[4,6]。除作藥用外,沉香因具有獨特的芳香氣味,也被大量用于熏香香料行業(yè)。研究表明,色酮和倍半萜類化合物是沉香的特征性成分,其中倍半萜成分包括沉香螺旋烷型、沉香呋喃型、愈創(chuàng)木烷型、杜松烷型、桉烷型、孤木烷型等多種骨架類型。

        奇楠被認為是沉香中最上等和珍貴的品種,又名伽楠、伽羅、琪南、伽南沉等,英文名有Kanankoh、Kyara、Chi-Nan、Qi-Nan等[7]。據(jù)記載,奇楠外表油潤光滑,油性重,以指甲刻之,如錐畫沙,油隨即溢出,用刀刮削后能捻捏成丸成餅,散發(fā)出耐久的幽香,其味微苦麻辣,嚼之粘牙,燃之出油,而普通沉香質堅,雕剔之如刀刮竹[8]。根據(jù)外表和斷面的顏色,它可分為綠油伽楠香 (綠奇)、紫油伽楠香 (紫奇)、黑油伽楠香 (黑奇)、茶油伽楠香 (黃奇)等[8]。

        傳統(tǒng)鑒別奇楠與普通沉香的方法主要是基于其芳香氣味和外觀差別等感官評價。本課題組前期利用GC-MS來分析海南白奇、海南紫奇、海南綠奇和越南綠奇中的化學成分,結果發(fā)現(xiàn)奇楠乙醚提取物的得率 (34%~45%)明顯高于普通沉香 (1.3%~9.7%),而且其中兩個主要化合物2-(2-苯乙基)色酮和2-[2-(4-甲氧基苯)乙基]色酮的相對含有量之和 (66.47%~84.71%)也明顯高于普通沉香 (0.16%~13.30%)。因此,可將以上兩種成分作為奇楠和沉香的質量評價指標[7]。

        沉香的藥用價值極高,是我國及東南亞國家沿用歷史悠久的珍貴傳統(tǒng)藥材,其粗提物的藥理活性也受到了國內(nèi)外廣泛的關注。周永標[9]研究了沉香水煎液對腸平滑肌的藥理活性,發(fā)現(xiàn)它對胃腸平滑肌的解痙有直接作用。Okugawa等[10]報道,沉香的苯提取物可降低環(huán)戊巴比妥睡眠小鼠的直腸溫度,能使小鼠睡眠時間延長。Kim等[11]研究表明,沉香水提物通過抑制肥大細胞中組胺的釋放,可以抑制速發(fā)型過敏反應的發(fā)生。梅文莉等[12]發(fā)現(xiàn),沉香的揮發(fā)油成分對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌MRSA具有顯著的抑制活性。Wetwitayak1ung等[13]應用水蒸氣蒸餾法和超臨界流體萃取法 (用和不用乙醇為輔助溶劑)提取沉香的化學成分,并分析其抗菌活性,結果發(fā)現(xiàn)這3種方法提取的沉香精油對金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus和白色念珠菌Candida albicans均具有抑制活性,但對大腸桿菌Escherichia coli無明顯作用。Suwannasing等[14]報道,沉香的乙酸乙酯提取物可保護心臟因心肌缺血或再灌注引起的損傷,能部分抑制p38 MAPK磷酸化。然而,迄今有關奇楠粗提物的藥理活性研究鮮見報道,因此本實驗將對黃奇楠乙醚提取物的抗菌、抗腫瘤、乙酰膽堿酯酶抑制和降血糖活性進行測試,并應用GC-MS法分析其化學成分。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 儀器與試劑 HP6890/5975C GC/MS聯(lián)用儀,包括ZB-5MSI彈性石英毛細管色譜柱 (30 m×0.25 mm,0.25μm,流動相為5%Pheny1-95% DiMethy1po1ysi1oxane,美國安捷倫公司);ELX-800酶標儀(美國寶特公司);Shimadzu UV-2550紫外可見分光光度計 (美國 Beckman公司);HHB11360-S普通培養(yǎng)箱 (上海躍進醫(yī)療器械有限公司);SW-40潔凈工作臺 (上海博迅實業(yè)有限公司);BP221S電子秤 (萬分之一,北京賽多利斯天平有限公司);HVE-50高壓蒸汽滅菌鍋 (日本Hirayama公司)。所用試劑均為分析純(國藥集團化學試劑有限公司)。

        1.1.2 活性測試材料

        1.1.2.1 抗菌活性測試 金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus ATCC 51650(海南省藥品檢驗所);硫酸卡那霉素 (生工生物工程上海股份有限公司)。培養(yǎng)基采用牛肉膏蛋白胨瓊脂 (NA),配方為牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaC15 g,定容至1 L,pH在7.4~7.6之間。

        1.1.2.2 細胞毒活性測試 人胃癌細胞SGC-7901、人慢性髓原白血病細胞K562(中國科學院上海生命科學研究院細胞庫);紫杉醇 (江蘇紅豆杉藥業(yè)有限公司)。腫瘤細胞株于完全RPMI-1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

        1.1.2.3 乙酰膽堿酯酶抑制活性測試 S-硫代乙酰膽堿、5,5'-二硫-雙-2-硝基苯甲酸(DTNB,E11-man試劑)、乙酰膽堿酯酶(美國Sigma Chemica1公司);他克林(純度為99%,美國Sigma-A1drich公司)。

        1.1.2.4 體外α-葡萄糖苷酶抑制活性 阿卡波糖(拜糖平,批號BJ12559,德國拜耳公司);α-葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.20,批號MGI01,東京TLC公司);對硝基苯-α-葡萄糖苷(pNPG,美國Sigma Chemica1公司)。磷酸鉀、無水乙醇、二甲基亞砜、氯化鈉和碳酸鈉均為分析純 (國藥集團化學試劑有限公司)。

        1.1.3 樣品 黃奇楠樣品于2014年4月購自廣東省化州市,經(jīng)中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院熱帶生物技術研究所戴好富研究員鑒定,其源植物為白木香Aquilaria sinensis。該植物結香部位靠近樹皮,內(nèi)側面土黃色木質部上密布黑褐色油脂,外側面亦為土黃色,油脂分布少,木性較重。常溫下,其花香味濃郁,涼味較重,并且嚼之粘牙,入口先有辣味,后漸轉涼苦味,嚼后口中留香持久,涼辛味重,可削成卷,標本 (編號201405HQN)保存于中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院熱帶生物技術研究所,見圖1。

        圖1 黃奇楠沉香樣品Fig.1 Huangqi'nan agarwood sample

        1.2 方法

        1.2.1 樣品制備 黃奇楠切碎后精密稱取50.000 g,乙醚超聲提取3次,每次100 m L,超聲15 min,靜置5 min后過濾,得到乙醚提取液,合并揮干,即得黃奇楠乙醚提取物11.870 g,計算出其質量占樣品干質量的23.74%。

        1.2.2 抗菌活性測試 采用濾紙片瓊脂擴散法[15],將金黃色葡萄球菌制成一定濃度的菌懸液(105~107 cfu/m L)后取100μL,用棉簽將其均勻涂于供試無菌牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基NA平板上,制成含菌平板。然后,將樣品配成質量濃度為10 mg/m L的溶液,取50μL,滴加于滅菌濾紙片上 (Φ=6 mm),待溶劑揮干后將其貼于含菌平板上,重復3次。0.08 mg/mL硫酸卡那霉素10μL作為陽性對照,37℃恒溫條件下培養(yǎng),24 h后觀察結果,測量并記錄抑菌圈直徑。

        1.2.3 細胞毒活性測試 腫瘤細胞培養(yǎng)的條件為37℃、5%CO2、相對濕度 90%以上,在含有10%小牛血清的完全RPMI-1640培養(yǎng)基中充分培養(yǎng)。然后,以K562和SGC-7901細胞為指示瘤株,MTT法測定[16],設DMSO溶劑陰性對照組、陽性對照組 (紫杉醇)和待測樣品組,其中待測樣品組中設6個質量濃度梯度 (0.1、0.3、0.9、2.7、8.1和24.3μg/mL)。取對數(shù)生長期細胞,于完全RPMI 1640培養(yǎng)基中制成單細胞懸浮液,血球計數(shù)板計數(shù),在96孔平底細胞培養(yǎng)板中按50 000個/mL接種90μL。K562細胞株中加入樣品10μL和SGC-7901細胞株 (不加樣品),培養(yǎng)24 h后再加入樣品10μL,培養(yǎng)條件為5%CO2、濕度90%以上、37℃,繼續(xù)培養(yǎng)72 h,取出后置于顯微鏡下觀察每孔細胞形態(tài)。然后,加入5 mg/mL的MTT溶液15μL,37℃下反應4 h后,棄除上清液,再往各孔加入DMSO 100μL,充分溶解后用ELX-800酶標儀測量各孔在490 nm處的OD值,按公式1計算抑制率,重復3次,再以樣品質量濃度為橫坐標,樣品的抑制率為縱坐標作圖,求出抑制率為50%時樣品的質量濃度 (IC50)。

        抑制率=(對照組OD值-實驗組OD值)/(對照組OD值)×100% (公式1)

        1.2.4 乙酰膽堿酯酶的抑制活性測試 采用改進的E11man法[17],將樣品溶解于DMSO中,在含有磷酸緩沖液(pH=8.0)、測試樣品(50μg/mL)和乙酰膽堿酯酶 (0.02 U/mL)的最終反應體系200μL中,先在30℃下孵育20 min,然后于405 nm紫外波長下測量兩次背景值。接著,加入2.48 mg/mL DTNB和1.81 mg/mL硫代乙酰膽堿的等體積混合液40μL開始反應,將反應體系置于405 nm紫外波長下檢測1 h。以他克林作為陽性對照,反應終質量濃度為0.08μg/mL;DMSO為陰性對照,反應終濃度為0.1%,重復3次,再選擇陰性對照組平均吸光值約為1的樣品吸光值,計算其平均值 (化合物測定值-背景值),根據(jù)公式2計算樣品的抑制率。

        抑制率=(E-S)/E×100% (公式2)

        注:E為陰性對照組的平均吸光值;S為樣品的平均吸光值。

        1.2.5 降血糖活性測試 采用優(yōu)化后的賢景春[18-19]報道的方法測試。取0.1 mmo1/L的磷酸鉀緩沖液(pH為6.8)0.5 mL,加入10 mg/Lα-葡萄糖苷酶100μL和樣品溶液0.5mL,混勻后37℃下恒溫加熱15 min,再加入2.5 mmo1/L pNPG 0.5 m L,混勻后37℃下恒溫加熱15 min,最后加入0.2 mo1/L Na2CO3溶液1 mL終止反應,于405 nm波長下測定OD值,重復3次,取平均值。以阿卡波糖為陽性對照,分別檢測不同質量濃度的黃奇楠乙醚提取物對α-葡萄糖苷酶的抑制活性,按公式3計算其抑制率和IC50值。

        酶活性抑制率=[A空白-(A樣品-A背景)]/ A空白×100% (公式3)

        注:A空白為不加待測樣品,只加入待測樣品的溶劑,進行反應后的吸光值;A樣品為加入待測樣品反應后的吸光值;A背景為只加待測樣品反應后的吸光值。

        1.2.6 GC-MS分析條件

        1.2.6.1 色譜條件 ZB-5MSI彈性石英毛細管色譜柱(30 m×0.25 mm,0.25μm);流動相為5% Pheny1-95%DiMethy1po1ysi1oxane;初始柱溫50℃,然后以5℃/min的速率升至310℃,保持10 min;汽化室溫度250℃;載氣為高純He(99.999%);柱前壓7.62 psi(1 psi=6.895 kPa);載氣體積流量1.0 mL/min;分流比40∶1;溶劑延遲時間3.0 min。

        1.2.6.2 質譜條件 電子轟擊(EI)離子源;電子能量70 eV;離子源溫度230℃;四極桿溫度150℃;接口溫度280℃;發(fā)射電流34.6μA;倍增器電壓1 612 V;質量掃描范圍m/z20~550。

        2 結果與分析

        2.1 活性測試結果

        2.1.1 抗菌活性測定 濾紙片瓊脂擴散法測定黃奇楠乙醚粗取物對金黃色葡萄球菌的抗菌活性。結果表明,它對金黃色葡萄球菌有抑制作用,抑菌圈直徑為(11.57±0.14)mm,而陽性對照青霉素的抑菌圈直徑為(27.66±0.21)mm。

        2.1.2 細胞毒活性測定 MTT法測定黃奇楠乙醚粗取物對慢性髓原白血病細胞K562和人胃癌細胞SGC-7901的細胞毒活性。結果表明,它對兩者的生長均有不同程度的抑制作用,對K562的IC50值為(12.77±0.18)μg/m L,而陽性對照紫杉醇的IC50值為(6.22±0.20)μg/m L;對SGC-7901的IC50值為(14.67±0.23)μg/mL,而紫杉醇的IC50值為(3.24±0.15)μg/mL。

        2.1.3 乙酰膽堿酯酶的抑制活性測定 E11man法測試黃奇楠乙醚粗取物對乙酰膽堿酯酶的抑制活性。結果表明,它對乙酰膽堿酯酶的抑制率為(24.85±0.22)%,而陽性對照他克林的抑制率為(42.61±0.15)%。

        2.1.4 降血糖活性測定 優(yōu)化后的賢景春法[18-19]測試黃奇楠乙醚提取物對α-葡萄糖苷酶的抑制活性。結果表明,它對α-葡萄糖苷酶有很強的抑制作用,IC50值為(268.75±0.42)μg/m L,明顯小于陽性對照阿卡波糖(788.36±0.57)μg/m L。

        2.2 GC-MS分析結果 黃奇楠沉香樣品乙醚提取物的總離子流圖見圖2,對圖中各峰通過質譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索及核對Nist2005和Wi1ey275標準質譜圖,并借鑒前期的鑒定方法[2,7,20-21],結合質譜圖與文獻數(shù)據(jù)進行鑒定。結果,在提取物中檢測到30個色譜峰 (表1),并用峰面積歸一化法測定出它們在樣品中的相對含有量為91.46%。最終,確定了5種類型的倍半萜類化合物16個 (52.94%),其中孤木烷型6個 (23.59%)、愈創(chuàng)木烷型5個(16.30%)、沉香螺旋醇型3個 (10.12%)、沉香呋喃型1個 (2.63%)、降倍半萜1個 (0.30%),2-(2-苯乙基)色酮類化合物3個 (16.09%),烷烴類化合物4個 (0.42%),甾體類化合物3個(0.53%),另有4個色譜峰尚未鑒定。同時發(fā)現(xiàn),該樣品中的主要成分為倍半萜類化合物,而色酮類化合物的種類和含有量均較少,見表1。除此之外,本實驗共檢出7個有香味的倍半萜[7,22],相對含有量為36.29%,分別為(-)-愈創(chuàng)木-1(10),11-二烯-15-醛 (7.22%)、(-)-愈創(chuàng)木-1(10),11-二烯-15,2-內(nèi)酯 (5.98%)、沉香螺旋醇 (1.09%)、白木香醛 (3.18%)、二氫卡拉酮 (7.35%)、新紫蜂斗菜烯(10.03%)、7α-H-9(10)-烯-11,12-環(huán)氧-8-氧艾里莫芬(1.44%)。

        3 結論與討論

        本實驗采用乙醚提取法提取黃奇楠,得率為23.74%,明顯高于普通沉香的乙醚提取得率(1.3%~9.7%)[7]?;谇捌谘芯?,對黃奇楠乙醚提取物進行抗菌、抗腫瘤、乙酰膽堿酯酶抑制和降血糖活性測試。梅文莉、Wetwitayak1ung等[12-13]均報道沉香提取物具有抗金黃色葡萄球菌的活性,而本實驗發(fā)現(xiàn)黃奇楠乙醚粗提物對該細菌也具有抑制作用。文獻報道,沉香中的一些倍半萜類成分能抑制和安定中樞神經(jīng)系統(tǒng)[10,34-36],而色酮類成分則具有神經(jīng)細胞保護作用[37-38],本實驗也表明,它對乙酰膽堿酯酶也有一定的抑制作用。乙酰膽堿酯酶是水解乙酰膽堿的特異性膽堿酯酶,而其含有量的降低會引發(fā)神經(jīng)退行性疾病,而黃奇楠乙醚提取物可在一定程度上抑制乙酰膽堿酯酶的活性,顯示它對神經(jīng)系統(tǒng)具有保護作用。同時,本實驗還發(fā)現(xiàn)該提取物對慢性髓原白血病細胞K562、人胃癌細胞SGC-7901和α-葡萄糖苷酶均表現(xiàn)出較好的抑制活性,這也是首次發(fā)現(xiàn)黃奇楠具有抗腫瘤和降血糖的活性。

        圖2 黃奇楠沉香的GC-MS總離子流圖Fig.2 The GC-MS total iron chart of Huangqi'nan agarwood

        表1 黃奇楠沉香乙醚提取物中的化學成分Tab.1 Chem ical constituents of Huangqi'nan agarwood etheral extract

        續(xù)表1

        另外,通過GC-MS檢測出樣品中有30個成分,相對含有量為 91.46%。首先,通過核對Nist2005和Wi1ey275標準質譜圖來進行鑒定,但是只確定了3個倍半萜類成分,而絕大多數(shù)倍半萜和所有色酮類化合物都無法鑒定,主要是因為沉香中很多特征性成分的質譜數(shù)據(jù)尚未入庫,故通過譜庫對比很難鑒定這些成分。近年來,人們通過人工檢索和化合物質譜數(shù)據(jù)比對,推斷出沉香提取物中色酮類化合物的結構[21,39-40],其中梅文莉等[2,34]通過分析色酮類化合物的質譜數(shù)據(jù),并結合文獻,總結出沉香中大量存在的特征性f1idersia類色酮化合物的EI-MS質譜特征和鑒定方法,本實驗也主要參考了該方法。而倍半萜類成分則主要通過對比文獻質譜數(shù)據(jù)或標準化合物的譜圖進行確認,但仍有4個化合物未能鑒定。本實驗檢測到的3個色酮類成分相對含有量總和為16.09%,其中2-(2-苯乙基)色酮與2-[2-(4-甲氧基苯)乙基]色酮相對含有量總和為14.40%。梅文莉等[2]報道,國產(chǎn)綠奇楠中這2個化合物總和為58.48%,而楊德蘭[7]發(fā)現(xiàn),海南白奇、海南紫奇、海南綠奇和越南綠奇中兩者總和分別為66.47%、82.09%、84.71%和71.98%,本實驗中上述兩個色酮類成分相對含有量較低的主要原因可能是黃奇楠樣品的結香部位靠近樹皮,故倍半萜類成分含有量較高,從而降低了色酮的相對含有量,并在常溫下香味更濃郁。梅文莉等[2,7]研究表明,奇楠沉香的結香部位靠近樹心,其中倍半萜類成分含有量較低,主要為色酮類化合物,由于結香位置不同,兩者在主成分類別上有一定的差異。

        一些倍半萜具有抗菌活性,而本實驗樣品中16個倍半萜的相對含有量總和為52.94%,可能是其具有抗菌活性的主要原因,但具體活性成分有待進一步研究。楊德蘭等[22,41-42]發(fā)現(xiàn),2-[2-(2-羥基-4-甲氧基苯)乙基]色酮、7α-H-9(10)-烯-11,12-環(huán)氧-8-氧艾里莫芬和新紫蜂斗菜烯均具有乙酰膽堿脂酶抑制活性,三者在黃奇楠乙醚提取物中相對含有量總和為13.16%,可能是該樣品具有乙酰膽堿脂酶抑制活性的重要活性成分。Okugawa等[43]報道,沉香雅檻藍醇和螺旋醇可作用于小鼠神經(jīng)中樞,使環(huán)己巴比妥引起的小鼠睡眠時間延長,具有良好的鎮(zhèn)靜和鎮(zhèn)痛作用。安娜貝拉等[44]發(fā)現(xiàn),兩者均能顯著抑制醋酸引起的小鼠扭體反應,其中沉香螺旋醇還可減少由脫氧麻黃堿和阿撲嗎啡誘導的自發(fā)性運動,增加大腦內(nèi)高香草酸的含有量,可能是沉香鎮(zhèn)靜安神作用的重要活性成分。

        在鑒定出的16個倍半萜中,7個有香味,相對含有量總和為36.29%,是常溫下樣品散發(fā)濃郁香味的主要來源。其中,沉香螺旋醇、新紫蜂斗菜烯和7α-H-9(10)-烯-11,12-環(huán)氧-8-氧艾里莫芬是沉香重要的香味和活性成分。本實驗通過對黃奇楠初步的活性研究,并采用GC-MS分析其中的化學成分,可為更好地開發(fā)黃奇楠的藥用價值和進一步追蹤其活性成分提供了科學依據(jù)和參考。

        [1]Naef R.The vo1ati1e and semi-vo1ati1e constituents of agarwood,the infected heartwood of Aquilaria species:a review[J].Flav Frag J,2011,26(2):73-87.

        [2]梅文莉,楊德蘭,左文健,等.奇楠沉香中2-(2-苯乙基)色酮的GC-MS分析鑒定[J].熱帶作物學報,2013,34(9):1819-1824.

        [3]Chen H Q,Wei JH,Yang JS,etal.Chemica1constituents of agarwood originating from the endemic genus Aquilaria p1ants[J].Chem Biodivers,2012,9(2):236-250.

        [4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:2010年版一部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:172-173.

        [5]劉慶林.沉香藥對的臨床應用[J].湖南中醫(yī)雜志,2005,21(5):70-71.

        [6]馮毅凡,郭曉玲,梁漢明.常松八味沉香片質量標準研究[J].中成藥,2005,27(12):1411-1413.

        [7]楊德蘭,梅文莉,楊錦玲,等.GC-MS分析四種奇楠沉香中致香的倍半萜和2-(2-苯乙基)色酮類成分[J].熱帶作物學報,2014,35(6):1235-1243.

        [8]謝宗萬.中藥材品種論述:中冊[M].上海:上海科學技術出版社,1984.

        [9]周永標.沉香對腸平滑肌的藥理作用[J].中藥通報,1988,13(6):40-42.

        [10]Okugawa H,Ueda R,Matsumoto K,et al.Effects of agarwood extracts on the centra1nervous system inmice[J].Planta Med,1993,59(1):32-36.

        [11]Kim Y C,Lee E H,Lee Y M,et al.Effect of the aqueous extract of Aquilaria agallocha stems on the immediate hypersensitivity reactions[J].JEthnopharm,1997,58(1):31-38.

        [12]MeiW L,Zeng Y B,Wu J,et al.Chemica1 composition and anti-MRSA activity of the essentia1oi1 from Chinese eag1ewood[J].JChin Pharm Sci,2008,17(3):225-229.

        [13]Wetwitayak1ung P,Thavanapong N,Charoenteeraboon J. Chemica1constituents and antimicrobia1activity of essentia1 oi1 and extractsofheartwood of Aquilaria crassna obtained from water disti11ation and supercritica1 f1uid carbon dioxide extraction[J].Silpakorn Univ Sci Tech J,2009,3(1):25-33.

        [14]Suwannasing C,Paiyabhroma N,Kumphune S.Anti-ischemic effectsof the ethy1acetate extractof Aquilaria crassna by attenuation of P38 MAPK activation[J].J App Pharm Sci,2012,2(10):26-30.

        [15]徐叔云,卞如濂,陳 修.藥理實驗方法學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2002.

        [16]Mosmann T.Rapid co1orimetric assay for ce11u1ar growth and surviva1:app1ication to pro1iferation and cytotoxicity assays[J]. J Immunol Methods,1983,65(1-2):55-63.

        [17]E11man G L,Courtney K D,Andres V Jr,et al.A new and rapid co1orimetric determination of acety1cho1inesterase activity[J].Biochem Pharmacol,1961,7:88-95.

        [18]Jong-Anurakkun N,BhandariM R,Kawabata J.α-G1ucosidase inhibitors from Devi1 tree(Alstonia scholaris)[J].Food Chem,2007,103(4):1319-1323.

        [19]胡 琳.中藥提取物對鼠腸α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究[J].世界臨床藥物,2012,33(12):726-729.

        [20]Ishihara M,Tsuneya T,Uneyama K.Fragrant sesquiterpenes from agarwood[J].Phytochemistry,1993,33(5):1147-1155.

        [21]MeiW L,Yang D L,Wang H,et al.Characterization and determination of 2-(2-pheny1ethy1)chromones in agarwood by GC-MS[J].Molecules,2013,18(10):12324-12345.

        [22]Yang D L,Wang H,Guo Z K,et al.Fragrant agarofuran and eremophi1ane sesquiterpenes in agarwood“Qi-Nan”from Aquilaria sinensis[J].Phytochem Lett,2014,8:121-125.

        [23]Naf R,Ve11uz A,Busset N,et al.New nor-sesquiterpenoids with 10-epi-eudesmane ske1eton from agarwood(Aquilaria agallocha Roxb.)[J].Flav Fragr J,1992,7(6):295-298.

        [24]Thomas A F,OzainneM.New sesquiterpene a1coho1s from ga1-banum resin:the occurrence of C(10)-epi-sesquiterpenoids[J].Helv Chim Acta,1978,61(8):2874-2880.

        [25]Yang JS,Wang Y L,Su Y L,etal.Studies on the chemica1 constituents of Aquilaria sinensis(Lour.)Gi1g.III.E1ucidation of the structure of isobaimuxino1and iso1ation and identification of the constituents of 1ower boi1ing fraction of the vo1ati1e oi1[J].Acta Pharm Sin,1989,24(4):264-268.

        [26]Naf R,Ve11uz A,Thommen W,et al.New compounds identified in agarwood(Aquilaria agallocha Roxb.)[J].Flav Fragr J,1993,8(6):307-313.

        [27]Naf R,Ve11uz A,Brauch1i R,et al.Agarwood oi1(Aquilaria agallocha Roxb.).Its composition and eight new va1encane-,eremophi1ane and vetispirane-derivatives[J].Flav Fragr J,1995,10(3):147-152.

        [28]Yoneda K,Yamagata E,Mizuno M.Pharmacognostica1 studies on the crude drug of“agarwood”(II):On the Chinese agarwood[J].Shoyakugaku Zassi,1986,40(3):259-265.

        [29]Ishihara M,Tsuneya T,Shiga M,et al.Three sesquiterpenes from agarwood[J].Phytochemistry,1991,30(2):563-566.

        [30]Nakanishi T,Yamagata E,Yoneda K,etal.Three fragrant sesquiterpenes of agarwood[J].Phytochemistry,1984,23(9):2066-2067.

        [31]Yang JS,Chen Y W.Studies on the constituents of Aquilaria sinensis(Lour.)Gi1g.I.Iso1ation and structure e1ucidation of two new sesquiterpenes,baimuxinic acid and baimuxina1[J]. Acta Pharm Sin,1983,18(3):191-198.

        [32]Ishihara M,Tsuneya T,Uneyama K.Guaiane sesquiterpenes from agarwood[J].Phytochemistry,1991,30(10):3343-3347.

        [33]Ishihara M,Masatsugu Y,Uneyama K.Preparation of(-)-guaia-1(10),11-dien-15,2-o1ide and(-)-2α-hydroxyguaia-1(10),11-dien-15-oic acid,fragrant sesquiterpenes in agarwood(Aquilaria agallocha Roxb.)[J].Tetrahedron,1992,48(47):10265-10276.

        [34]Ueda J Y,Imamura L,Tezuka Y,et al.New sesquiterpene from Vietnamese agarwood and its induction effect on brain-derived neurotrophic factor mRNA expression in vitro[J].Bioorgan Med Chem,2006,14(10):3571-3574.

        [35]Okugawa H,Ueda R,Matsumoto K,etal.Effectsof sesquiterpenoids from“Orienta1 incenses”on acetic acid-induced writhing and D2 and 5-HT2A receptors in ratbrain[J].Phytomedicine,2000,7(5):417-422.

        [36]Takemoto H,Ito M,Shiraki T,et al.Sedative effects of vapor inha1ation of agarwood oi1and spikenard extract and identification of their active components[J].JNatMed,2008,62(1):41-46.

        [37]Yang L,Qiao L R,Xie D,et al.2-(2-Pheny1ethy1)chromones from Chinese eag1ewood[J].Phytochemistry,2012,76:92-97.

        [38]Yoon JS,Lee M K,Sung S H,et al.Neuroprotective 2-(2-pheny1ethy1)chromones of Imperata cylindrica[J].J Nat Prod,2006,69(2):290-291.

        [39]郭曉玲,田佳佳,高曉霞,等.不同產(chǎn)區(qū)沉香藥材揮發(fā)油成分GC-MS分析[J].中藥材,2009,32(9):1354-1358.

        [40]陳曉穎,高 英,李衛(wèi)民,等.不同結香方法與國產(chǎn)沉香揮發(fā)性化學成分的相關性研究[J].中國藥房,2012,23(11):1017-1020.

        [41]Yang de L,Mei W L,Zeng Y B,et al.2-(2-Pheny1ethy1)chromone derivatives in Chinese agarwood″Qi-Nan″from Aquilaria senensis[J].Planta Med,2013,79(14):1329-1334.

        [42]Liu J,Wu J,Zhao Y X,et al.A new cytotoxic 2-(2-pheny1ethy1)chromone from Chinese eag1ewood[J].Chin Chem Lett,2008,19(8):934-936.

        [43]Okugawa H,Ueda R,Matsumoto K,et al.Effect of jinkoh-eremo1and agarospiro1 from agarwood on the centra1nervous system in mice[J].Planta Med,1996,62(1):2-6.

        [44]安娜貝拉,陳 穎,許 敏,等.沉香的質量評價及藥理活性研究進展[J].中國野生植物資源,2014,33(2):1-5.

        Bioactivities and chem ical constituents of Huangqi'nan

        YANG Jin-1ing1,2, MEI Wen-1i1, CAI Cai-hong1, DONG Wen-hua1, CHEN Liang-1iang1,
        DAIHao-fu1*

        (1.Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences;Hainan Engineering Research Center of Agarwood,Haikou 571101,China;2.Horticultural and Garden College,Hainan University,Haikou 570228,China)

        AIMTo study the bioactivities and chemica1 constituents of Huangqi'nan etherea1 extract.METHODSThe antibacteria1,antitumor,acety1cho1inesterase(AChE)inhibitory and hypog1ycemic activities of Huangqi'nan etherea1extractwere tested.Then the chemica1constituents of this p1antwere ana1yzed by HP6890/ 5975C GC-MS.RESULTSThe Huangqi'nan etherea1extract showed antibacteria1activity toward Staphylococcus aureus,antitumor activity toward chronic mye1ogenous 1eukemia ce11s K562 and human gastric carcinoma ce11s SGC-7901,AChE inhibitory activity andα-g1ucosidase inhibitory activity.Meanwhi1e,thirty compounds(91.46%),inc1uding 16 sesquiterpenes(52.94%)and three 2-(2-pheny1ethy1)chromone derivatives(16.09%)were identified.Among them,seven sesquiterpeneswere reported to be fragrant(36.29%).CONCLUSIONThe Huangqi'nan etherea1extract has antibacteria1,antitumor,AChE inhibitory and hypog1ycemic activities,and contains various chemica1constituents,main1y ofwhich are sesquiterpenes.

        Huangqi'nan;etherea1 extract;antibacteria1;antitumor;AChE inhibitory;hypog1ycemic;GCMS;chemica1constituents

        R284.1

        A

        1001-1528(2015)08-1740-08

        10.3969/j.issn.1001-1528.2015.08.024

        2014-09-22

        公益性行業(yè) (農(nóng)業(yè))科研專項 (201303117);國家科技支撐計劃課題項目 (2013BAI11B04);海南省重大科技項目(ZDZX2013013)

        楊錦玲(1990—),女,碩士,從事天然產(chǎn)物化學研究。E-mai1:jin1yang@126.com

        *通信作者:戴好富(1974—),男,博士,研究員,從事天然產(chǎn)物化學研究。Te1:(0898)66961869,E-mai1:daihaofu@itbb.org.cn

        猜你喜歡
        倍半萜乙醚酯酶
        姜黃中3個新的沒藥烷型倍半萜類化合物
        中草藥(2023年14期)2023-07-21 07:02:02
        澤瀉原三萜、降三萜和倍半萜的分離及其抗炎活性研究
        地黃梓醇和乙酰膽堿酯酶作用的分子動力學模擬
        用乙醚處理共沉淀法合成YAG:Ce熒光粉
        商情(2020年47期)2020-12-15 06:53:14
        乙醚提取與固相萃取兩種方法對比測定醬油中的苯甲酸
        科技視界(2019年12期)2019-06-20 01:34:27
        西方華佗怎樣引進麻醉術
        百家講壇(2019年24期)2019-04-24 00:27:35
        常見麻醉藥在獸醫(yī)臨床上的應用研究
        蜈蚣草化學成分及抑制乙酰膽堿酯酶生物活性研究
        新的藥根堿三唑的合成與抗菌以及乙酰膽酯酶抑制活性評價
        野馬追倍半萜內(nèi)酯精制工藝的優(yōu)化
        中成藥(2017年10期)2017-11-16 00:50:02
        国产日韩亚洲欧洲一区二区三区| 公与淑婷厨房猛烈进出| 国产aⅴ无码专区亚洲av麻豆 | 一二三区无线乱码中文在线| 伊人久久大香线蕉综合影院首页| 杨幂AV污网站在线一区二区| 国产美女三级视频网站| 91精品国产91综合久久蜜臀 | 蜜桃臀av一区二区三区| 国产精品人妻一码二码| 免费人成又黄又爽的视频在线| 97色人阁俺也去人人人人人| 国产亚洲精品90在线视频| 国产成人精品午夜视频| 国产精品密播放国产免费看| 中文乱码字幕在线中文乱码| 极品av一区二区三区| 40岁大乳的熟妇在线观看| jjzz日本护士| 国产亚洲精品综合一区二区| 国语自产精品视频在线看| 又色又爽又黄又硬的视频免费观看| 久久久久久久尹人综合网亚洲| 亚洲无人区乱码中文字幕动画| 日本岛国视频在线观看一区二区 | 五月停停开心中文字幕| 蜜桃视频在线免费观看| 成人h视频在线观看| 人妻少妇一区二区三区| 久久99人妖视频国产| 亚洲中文字幕舔尻av网站| 蜜臀av性久久久久蜜臀aⅴ| 四虎精品国产一区二区三区| 久久精品天堂一区二区| 国产精品无码dvd在线观看| 欧美老妇与禽交| 国产三级在线观看性色av| 日韩女优av一区二区| 精品av天堂毛片久久久| 亚洲深夜福利| 亚洲国产精品av麻豆网站|