玄 敏， 程雪梅，2， 王長(zhǎng)虹，2*， 王崢濤，2

（1.上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥研究所，中藥標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海201203；2.上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心，上海201203）

龍膽和堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物的制備

玄 敏1， 程雪梅1，2， 王長(zhǎng)虹1，2*， 王崢濤1，2

（1.上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥研究所，中藥標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海201203；2.上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心，上海201203）

目的研究龍膽與堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物的制備工藝及質(zhì)量控制方法。方法以龍膽提取物HPLC指紋圖譜中龍膽苦苷和另外4個(gè)特征峰峰面積為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用L9（34）正交試驗(yàn)優(yōu)化其制備工藝，并建立龍膽和堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物指紋圖譜。結(jié)果最佳制備工藝為藥材最粗粉加10倍量水，回流提取3次，每次1 h，獲得粗提物；粗提物濃縮至含原藥材6.60 g/100 mL，加3倍量乙酸乙酯，萃取2次，萃取液蒸干，真空干燥。龍膽、堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物中龍膽苦苷平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為31.37%、25.20%。龍膽對(duì)照提取物指紋圖譜標(biāo)定龍膽苦苷和另外4個(gè)特征峰，整體相似度大于0.99；堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物指紋圖譜標(biāo)定龍膽苦苷和另外4個(gè)特征峰，整體相似度大于0.98。結(jié)論對(duì)照提取物制備工藝穩(wěn)定，重復(fù)性好，可用于龍膽藥材、飲片的質(zhì)量控制。

龍膽；對(duì)照提取物；龍膽苦苷；HPLC指紋圖譜

龍膽為多基源藥材，2010年版 《中國(guó)藥典》收載的龍膽為龍膽科Gentianaceae龍膽屬Gentiana植物龍膽Gentiana scabra Bge.、條葉龍膽Gentiana manshurica Kitag.、三花龍膽Gentiana triflora Pall或堅(jiān)龍膽Gentiana rigescens Franch的干燥根和根莖，前三種習(xí)稱 “龍膽”，后一種習(xí)稱 “堅(jiān)龍膽”［1］。龍膽主要產(chǎn)地為內(nèi)蒙古、東北，堅(jiān)龍膽道地產(chǎn)地為云南。龍膽始載于 《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品［2］。其味苦，性寒，為清肝膽濕熱，瀉下焦郁火之常用中藥。現(xiàn)代藥理研究表明，龍膽具有保肝、利膽、健胃、抗炎、抗菌及對(duì)中樞系統(tǒng)的作用［3］。龍膽主要化學(xué)成分有環(huán)烯醚萜類 （iridoids）、三萜類（triterpenes）、黃酮類（flavonoids）、口山酮類（xthantones）等［4-6］。龍膽的質(zhì)量控制主要集中在以龍膽苦苷（gentiopicroside）、當(dāng)藥苷（sweroside）、當(dāng)藥苦苷（swertiamarin）等環(huán)烯醚萜類成分為指標(biāo)的研究［7-10］。龍膽藥材現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，以龍膽苦苷為指標(biāo)進(jìn)行TLC定性鑒別和HPLC定量測(cè)定。

對(duì)照提取物是中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的一種，其易于獲得，成本低廉，使用快捷簡(jiǎn)便，可用于中藥材、飲片的多指標(biāo)質(zhì)量控制，具有廣泛應(yīng)用前景。2010年版 《中國(guó)藥典》共收載16種對(duì)照提取物，其在中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中所占比例很小，對(duì)中藥對(duì)照提取物進(jìn)行研究具有現(xiàn)實(shí)意義［11］。龍膽中大極性成分含有量較高，中、小極性成分含有量較低［12-14］。前期研究發(fā)現(xiàn)龍膽中的中、小極性成分具有一定的鑒別意義，可用于龍膽和堅(jiān)龍膽藥材的定性質(zhì)量控制。本實(shí)驗(yàn)以龍膽與堅(jiān)龍膽為研究對(duì)象，制備對(duì)照提取物，擬作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)快速、簡(jiǎn)便地用于龍膽藥材、飲片的質(zhì)量控制。

1 儀器與試藥

Agilent1260高效液相色譜儀（G1315C型四元梯度泵、G1311B型在線脫氣機(jī)、G1367E型自動(dòng)進(jìn)樣器、G1316A型DAD柱恒溫箱、G1330B型DAD檢測(cè)器），Agilent Chemstation色譜工作站；BT-124S電子分析天平（Sartorius公司）；GRT-RK型電熱套 （鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）；DZF-6050型真空干燥箱 （上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；KQ-250DB數(shù)控超聲波清洗器 （昆山市超聲儀器有限公司）。

龍膽苦苷由上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心提供（純度＞98%）；龍膽藥材購(gòu)自安國(guó)藥材市場(chǎng)，堅(jiān)龍膽藥材由蘭州佛慈制藥股份有限公司饋送，經(jīng)上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心吳立宏研究員鑒定分別為龍膽G.scabra與堅(jiān)龍膽G.rigescens的干燥根和根莖，憑證標(biāo)本存放于上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心標(biāo)本室。甲醇、乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 對(duì)照提取物制備工藝 本實(shí)驗(yàn)前期基于極性導(dǎo)向，在保留大極性成分的基礎(chǔ)上，富集龍膽和堅(jiān)龍膽藥材中的中、小極性成分，可用于表征龍膽藥材的特征 （另文報(bào)道），見(jiàn)圖1。

圖1 龍膽和堅(jiān)龍膽藥材的特征指紋圖譜Fig.1 Characteristic fingerprints of G.scabra and G. rigescens

本研究在龍膽提物制備工藝 （藥材最粗粉加10倍量水，回流提取3次，每次回流時(shí)間為1 h）［15］的基礎(chǔ)上，考察乙酸乙酯萃取法制備提取物的工藝條件。選擇粗提物質(zhì)量濃度 （A）、萃取溶劑/粗提物倍量 （體積） （B）、萃取次數(shù) （C）為考察因素，每個(gè)因素設(shè)立3個(gè)水平，通過(guò)L9（34）正交表安排試驗(yàn)，以提取物指紋圖譜中的1、4、6、8、9號(hào)特征峰 （圖1A）峰面積為考察指標(biāo)（權(quán)重系數(shù)分別為0.02，0.3，0.08，0.3，0.3），綜合評(píng)價(jià)和篩選龍膽對(duì)照提取物萃取工藝，試驗(yàn)因素及水平見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)因素及水平Tab.1 Factors and levels

取龍膽藥材12 g，精密稱定，加10倍量水，回流提取3次，1 h/次，離心，合并藥液，定容；加乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯層蒸干，70%甲醇超聲溶解，濾過(guò)，得供試品。記錄目標(biāo)特征峰峰面積，計(jì)算綜合評(píng)分，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 正交試驗(yàn)安排及評(píng)分結(jié)果 （n=3）Tab.2 Orthogonal experiment arrangements and scores（n=3）

直觀分析評(píng)分結(jié)果知，影響因素從大到小依次為A＞C＞B。以空白項(xiàng)D作為誤差項(xiàng)，進(jìn)行方差分析，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 方差分析Tab.3 Table of variance analysis

方差分析結(jié)果顯示，因素A（粗提物質(zhì)量濃度）為萃取效果最主要影響因素 （P＜0.05）。結(jié)合直觀分析和實(shí)際生產(chǎn)，確定最佳工藝為A3B3C2，即粗提物質(zhì)量濃度6.60 g/100 mL，加3倍量 （體積）乙酸乙酯萃取2次。

2.2 工藝驗(yàn)證 根據(jù)最佳工藝條件制備3份龍膽對(duì)照提取物樣品，計(jì)算評(píng)分，結(jié)果見(jiàn)表4。驗(yàn)證試驗(yàn)得分均較高，重復(fù)性好。

表4 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果Tab.4 Resu lts of verification experiments

根據(jù)篩選工藝制備堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物樣品，發(fā)現(xiàn)堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物圖譜特征性強(qiáng)，各特征峰峰高比例協(xié)調(diào)，所篩選工藝適用于堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物的制備。

2.3 對(duì)照提取物制備 根據(jù)最佳工藝條件分別制備6批龍膽對(duì)照提取物和6批堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物（表5），龍膽對(duì)照提取物平均得率為1.19%，堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物平均得率為1.99%。

2.4 對(duì)照提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

2.4.1 龍膽苦苷測(cè)定

2.4.1.1 色譜條件 Diamonsil C18（2）Column色譜柱（4.6 mm×250 mm，5μm）；流動(dòng)相為甲醇-水（25：75）；體積流量1.0 m l/min；檢測(cè)波長(zhǎng)270 nm；柱溫30℃；進(jìn)樣量10μL。色譜圖見(jiàn)圖2。

表5 龍膽和堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物得率、相似度和龍膽苦苷含有量Tab.5 Yield，sim ilarity，and gentiopicroside content of reference extracts from G.scabra and G.rigescens

圖2 龍膽苦苷測(cè)定色譜圖Fig.2 Chromatograms for gentiopicroside

2.4.1.2 對(duì)照品溶液的制備 取龍膽苦苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含1.925 0 mg的貯備液。

2.4.1.3 供試品溶液的制備 取對(duì)照提取物約13 mg，精密稱定，置25 mL量瓶中，加甲醇振搖溶解并定容至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，得供試品溶液。

2.4.1.4 線性關(guān)系考察及標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 分別精密吸取對(duì)照品貯備液，加甲醇稀釋成0.385～385 μg/mL的一系列對(duì)照品溶液，按“2.4.1”項(xiàng)譜條件測(cè)定。以峰面積 （Y）對(duì)質(zhì)量濃度 （X）進(jìn)行線性回歸，得線性回歸方程Y=12.137X+4.08（r= 1.000），龍膽苦苷在0.385～385μg/mL時(shí)，峰面積與質(zhì)量濃度線性關(guān)系良好。

2.4.1.5 定量限、檢測(cè)限 配制龍膽苦苷對(duì)照品由高到低濃度系列溶液，按信噪比 （S：N）為3：1，計(jì)算龍膽苦苷的檢測(cè)限為0.190μg/m L，按信噪比 （S：N）為10：1，計(jì)算龍膽苦苷的定量限為0.385μg/mL。

2.4.1.6 精密度試驗(yàn) 取高、中、低 （385、192.5、77μg/mL）3種質(zhì)量濃度的對(duì)照品溶液，同1 d內(nèi)連續(xù)進(jìn)樣6次，峰面積RSD分別為0.34%、0.82%、0.35%，日內(nèi)精密度良好；分別連續(xù)3 d進(jìn)樣測(cè)試，峰面積RSD分別為1.81%、1.56%、1.29%，日間精密度度良好。

2.4.1.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液 （S1），分別于0、1、2、4、8、12、24、48 h進(jìn)樣，峰面積RSD為0.95%，樣品48 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.4.1.8 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批次樣品 （S1），按 “2.4.1.3”項(xiàng)下方法平行制備6份供試品溶液，分別進(jìn)樣，龍膽苦苷RSD為1.37%，方法重復(fù)性良好。

2.4.1.9 加樣回收率試驗(yàn) 采用半程加樣。取9份經(jīng)過(guò)準(zhǔn)確定量測(cè)定的樣品13 mg，精密稱定，置25 m L量瓶中，加甲醇振搖溶解并定容至刻度，搖勻；取5mL，定容至10mL；分別按已知含有量的50%、100%、150%3個(gè)水平加入龍膽苦苷對(duì)照品。進(jìn)樣檢測(cè)，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表6。龍膽苦苷平均回收率為102.4%，RSD為2.7%。

表6 龍膽苦苷加樣回收率結(jié)果Tab.6 Recoveries of gentiopicroside

2.4.1.10 樣品測(cè)定 分別取6批龍膽和6批堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物樣品，按上述方法測(cè)定龍膽苦苷峰面積，按標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算，對(duì)照提取物樣品中龍膽苦苷含有量見(jiàn)表5。龍膽對(duì)照提取物中龍膽苦苷平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為31.37%，堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物中龍膽苦苷平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25.20%。

2.4.2 對(duì)照提取物指紋圖譜的建立 預(yù)試驗(yàn)顯示，龍膽對(duì)照提取物、堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物色譜圖差異較大，故分別建立其指紋圖譜，并進(jìn)行相似度分析。

2.4.2.1 指紋圖譜色譜條件 流動(dòng)相為甲醇（A）-乙腈 （B）-0.1%磷酸水 （C），梯度洗脫條件見(jiàn)表7；檢測(cè)波長(zhǎng)240 nm；體積流量 1.0 mL/min；柱溫30℃，進(jìn)樣量10 mL。

表7 梯度洗脫條件Tab.7 Gradient elution conditions

2.4.2.2 指紋圖譜精密度 取同一供試品溶液（S1，S7），連續(xù)進(jìn)樣6次，以龍膽苦苷為參照峰，計(jì)算各特征峰相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積，各特征峰相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積RSD均小于2%（n=6），儀器精密度良好。

2.4.2.3 指紋圖譜穩(wěn)定性 取同一供試品溶液（S1，S7），室溫放置，分別于0、2、4、8、12、24、48 h進(jìn)樣，各特征峰相對(duì)保留時(shí)間RSD均小于2%、相對(duì)峰面積RSD均小于4%（n=7），樣品48 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.4.2.4 指紋圖譜重復(fù)性 取同一批次樣品（S1，S7），按 “2.4.1.3”項(xiàng)下方法分別平行制備6份供試品溶液，進(jìn)樣檢測(cè)。各特征峰相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積RSD均小于2% （n=6），方法重復(fù)性良好。

2.4.2.5 指紋圖譜測(cè)定與相似度分析 取12批供試品溶液，按 “2.4.2.1”項(xiàng)下方法檢測(cè)，提取物中成分均可在60 min內(nèi)洗脫完畢。采用國(guó)家藥典委員會(huì)頒布的 “中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)” （2004A版）軟件進(jìn)行相似度分析，將指紋圖譜數(shù)據(jù)導(dǎo)入相似度評(píng)價(jià)軟件，龍膽、堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物指紋圖譜分別以S1、S7為參照譜，采用中位數(shù)法生成對(duì)照特征圖譜，相似度分析結(jié)果見(jiàn)圖3。

圖3 相似度分析結(jié)果Fig.3 Results of sim ilarity analysis

龍膽、堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物各標(biāo)定5個(gè)特征峰，其中1號(hào)峰龍膽苦苷為兩者共有峰。相似度數(shù)據(jù)見(jiàn)表5，龍膽對(duì)照提取物指紋圖譜整體相似度在0.99～1.00，堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物指紋圖譜整體相似度在0.98～0.99，各批次對(duì)照提取物相似度較高，重復(fù)性較好。

2.4.2.6 重復(fù)性考察 以龍膽苦苷為參照物峰，計(jì)算龍膽、堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物中各特征峰的相對(duì)保留時(shí)間，結(jié)果見(jiàn)表8。由表8知，各特征峰相對(duì)保留時(shí)間RSD均小于0.2%，表明制備工藝的重復(fù)性良好。

3 討論

龍膽為多基源藥材，2010年版 《中國(guó)藥典》收載了4種龍膽。其中龍膽和堅(jiān)龍膽是目前市場(chǎng)流通中的主流產(chǎn)品。條葉龍膽、三花龍膽資源稀缺，本實(shí)驗(yàn)僅收集到1批條葉龍膽、1批三花龍膽，樣本不足以制備提取物，有待于進(jìn)一步研究。

以龍膽為研究對(duì)象，對(duì)龍膽對(duì)照提取物制備工藝參數(shù)進(jìn)行了系統(tǒng)研究。前期試驗(yàn)研究表明，堅(jiān)龍膽指紋圖譜中的2、3、5、7號(hào)特征峰與龍膽指紋圖譜中的4、6、8、9號(hào)特征峰的紫外吸收比較相似，其中4、5號(hào)峰與6、7號(hào)峰保留時(shí)間與紫外吸收基本一致，推測(cè)其為相同類型的化合物。依據(jù)相似相容的原理，可以近似地認(rèn)為堅(jiān)龍膽中的小極性成分與龍膽中的小極性成分性質(zhì)類似。故采用龍膽對(duì)照提取物制備工藝制備堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物，且通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 （圖3）證明獲得了較好的結(jié)果。

表8 6批龍膽 （S1～S6）和6批堅(jiān)龍膽 （S7-S12）對(duì)照提取物特征峰相對(duì)保留時(shí)間Tab.8 Relative retention time of characteristic peaks in reference extract from G.scabra（S1～S6）and G.rigescens（S7-S12）

龍膽對(duì)照提取物平均得率較堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物低，而龍膽苦苷含有量較堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物高。兩種對(duì)照提取物指紋圖譜差異較大 （龍膽對(duì)照提取物指紋圖譜中的4、6號(hào)色譜峰分別與堅(jiān)龍膽對(duì)照提取物指紋圖譜中的5、7號(hào)峰保留時(shí)間相近，紫外吸收光譜相似，但經(jīng)LC-MS法鑒定為不同成分），說(shuō)明兩種藥材化學(xué)成分種類及含有量均存在顯著差異，有必要分別進(jìn)行質(zhì)量控制。

致謝：樣品收集得到了蘭州佛慈制藥股份有限公司的支持，特此致謝。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：2010年版一部［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：89.

［2］Wang Y M，Xu M，Wang D，et al.Review on“Long-Dan”，one of the traditional Chinesemedicinal herbs recorded in Chinese Pharmacopoeia［J］.Nat Prod Bioprospect，2012，2（1）：1-10.

［3］孔增科.實(shí)用中藥手冊(cè)［M］.天津：天津科技出版社，1996.

［4］沈 濤，金 航，王元忠，等.中藥龍膽化學(xué)成分研究進(jìn)展［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（30）：16868-16870.

［5］齊靜靜，宋鳳瑞，劉志強(qiáng)，等.高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法分析龍膽中的環(huán)稀醚萜類成分［J］.質(zhì)譜學(xué)報(bào)，29（增刊）：92-93.

［6］Kim JA，Son N S，Son JK，et al.Two new secoiridoid glycosides from the rhizomes of Gentiana scabra Bunge［J］.Arch Pharm Res，2009，32（6）：863-867.

［7］馮 波，朱鶴云，關(guān) 皎，等.HPLC同時(shí)測(cè)定龍膽中4中活性成分含量［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（13）：82-85.

［8］秦 晶，陳國(guó)鋒，韓麗妹，等.龍膽藥材及龍膽總苷提取物的HPLC指紋圖譜研究［J］.中國(guó)新藥雜志，2012，21（13）：1466-1478.

［9］吳立宏，俞 麗，侴桂新，等.龍膽藥材和飲片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J］.中藥材，2011，34（4）：528-531.

［10］李文龍，陳軍輝，殷月芬，等.龍膽藥材中龍膽苦苷和馬錢子苷酸含量的測(cè)定及其指紋圖譜研究［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，2007，42（5）：566-570.

［11］陸兔林，翟為民，蔡寶昌，等.對(duì)照提取物在中藥質(zhì)量控制中的應(yīng)用［J］.中國(guó)中藥雜志，2013，38（3）：462.

［12］魏 嵐，陳曉輝，張 鵬，等.龍膽藥材的高效液相指紋圖譜及聚類分析［J］.沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，24（5）：292-294.

［13］江蔚新，欽 浩，何文順.龍膽藥材的HPLC指紋圖譜研究［J］.中草藥，2008，39（10）：1563-1565.

［14］李文龍，陳軍輝，殷月芬，等.龍膽藥材中龍膽苦苷和馬錢子苷酸含量的測(cè)定及其指紋圖譜研究［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，2007，42（5）：566-570.

［15］魯艷柳，王長(zhǎng)虹，王崢濤.龍膽標(biāo)準(zhǔn)提取物制備及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J］.中國(guó)藥學(xué)雜志，2009，43（24）：1909-1913.

Preparation and quality control of reference extract from Gentiana scabra and Gentiana rigescens

XUAN Min1， CHENG Xue-mei1，2， WANG Chang-hong1，2*， WANG Zheng-tao1，2

（1.Institute of Chinese Material Medica，Shanghai University of Traditional Chinese Medicine；The MOE Key Laboratory for Standardization of Chinese Medicines，Shanghai 201203，China；2.Shanghai R&D Centre for Standardization of Chinese Medicines，Shanghai201203，China）

AIMTo establish a preparation and quality control of reference extract from Gentiana scabra and G.rigescens.METHODSGentiopicroside and four characteristic peakswere considered as the evaluation index，the preparation processwas optimized through L9（34）orthogonal experiment.HPLC fingerprints of reference extract of G.scabra and G.Rigescens were established respectively.RESULTSThe optimized preparation process was determined as follows：the coarse powdered G.scabra was reflux-extracted with tenfold water for an hour once，three times；the crude extract was concentrated to 6.60 g/100 m L，extracted with threefold ethyl acetate for 2 times，and dried in vacuum.Gentiopicroside（31.37%average content）and four characteristic peaks in reference extractof G.cabras were identified and their overall similarity wasmore than 0.99.Gentiopicroside（25.20%average content）and four characteristic peaks of reference extract from G.Rigescens were detected and their overall similarity wasmore than 0.98.CONCLUSIONThe preparation process of the reference extract from G.scabra presents a good stability and reproducibility.Therefore，it can provide a reference for the quality control of Gentianae Radix slices.

Gentianae Radix；reference extract；gentiopicroside；HPLC fingerprint

R284.2

A

1001-1528（2015）04-0746-06

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.04.012

2014-11-20

國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)提高暨2015版藥典科研任務(wù)資助 （2012）

玄 敏（1988—），女，碩士生，研究方向?yàn)樗幬锓治黾爸兴庂|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。E-mail：dfzz-0088@163.com

*通信作者：王長(zhǎng)虹，男，研究員，博士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)橹兴幮轮苿┡c體內(nèi)過(guò)程。Tel：（021）51322511，E-mail：wchcxm@ 163.com