秦建設(shè)

（重慶三峽醫(yī)藥高等專科學校，重慶404120）

補中益氣活血方對胃潰瘍患者血清TFF2和SOD水平的影響

秦建設(shè)

（重慶三峽醫(yī)藥高等專科學校，重慶404120）

目的通過觀察補中益氣活血方 （由黃芪、黨參、白術(shù)、當歸、陳皮、升麻、柴胡、炙甘草等組成）對脾胃虛弱型胃潰瘍患者血清三葉因子2（TFF2）和超氧化物歧化酶 （SOD）表達水平的影響并探討其可能的機制。方法將符合納入標準的77例病例隨機分為補中益氣活血方治療組 （簡稱中藥組）和奧美拉唑治療組，通過比較2組藥物治療前后的癥狀分析、胃鏡檢查、血清TFF2和SOD的水平來觀察對胃潰瘍的治療效果。結(jié)果治療后，補中益氣活血方組的臨床療效評定和提升胃潰瘍患者血清TFF2和SOD的表達水平明顯優(yōu)于奧美拉唑組 （P＜0.05）。結(jié)論補中益氣活血方抗脾胃虛弱型胃潰瘍的作用機理可能與調(diào)節(jié)胃黏膜中TFF2和SOD的表達有關(guān)。

補中益氣活血方；胃潰瘍；三葉因子2；超氧化物歧化酶

胃潰瘍（gastric ulcer，GU）是一種臨床消化系統(tǒng)的常見病、多發(fā)病，其致病因素復雜，病理機制迄今未完全清楚。中醫(yī)藥治療胃潰瘍有深厚的理論基礎(chǔ)和臨床實踐經(jīng)驗，補中益氣類方劑是臨床上用于治療胃潰瘍屬脾胃虛弱證的常用藥物，本研究的目的是探討補中益氣活血方對胃潰瘍脾胃虛弱型患者血清中三葉因子2（Trefoil factor family 2，TFF2）和超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）水平的影響，進一步闡明補中益氣類方藥治療胃潰瘍的藥理機制，為治療慢性胃潰瘍提供科學理論基礎(chǔ)。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象 本研究對象為重慶三峽醫(yī)藥高等?？茖W校附屬醫(yī)院門診收治的符合胃潰瘍脾胃虛弱型診斷標準的患者77例 （2011年9月—2013年10月）。根據(jù)患者就診時間將病例隨機分成補中益氣活血治療組 （簡稱中藥組）和奧美拉唑治療組（簡稱西藥組），其中中藥組42例，西藥組35例。

1.2 診斷標準、納入標準、排除標準 均參照文獻 ［1-2］所給定的脾胃虛弱證候的診斷標準判定。凡年齡18～70歲男女不限，無胃潰瘍并發(fā)癥，無嚴重心、腦、腎血管疾病及精神疾病，中醫(yī)辨證屬于脾胃虛弱證能較好配合治療的患者均納入研究對象。凡年齡小于18歲或大于70歲者，有胃潰瘍嚴重并發(fā)癥、嚴重心肺肝腎功能不全者，妊娠、哺乳期婦女，中醫(yī)辨證不屬于脾胃虛弱證不能配合治療及隨訪者作為排除對象。

1.3 治療方法

1.3.1 中藥組 口服補中益氣活血方，藥物主要為黃芪20 g、黨參20 g、白術(shù)15 g、當歸20 g、陳皮10 g、升麻8 g、柴胡15 g、炙甘草10 g、五靈脂10 g、蒲黃6 g、赤芍15 g、大棗6枚，煎湯口服一日1劑。

1.3.2 西藥組給予奧美拉唑20 mg（重慶華邦制藥有限公司）和阿莫西林分散片1 g（華北制藥股份有限公司），口服1日1次。

1.3.3 療程 兩組均以8周為1個療程。在治療期間，兩組不再使用其他藥物。治療1個療程后復查胃鏡及抽血檢測。

1.4 療效判定

1.4.1 中醫(yī)證候療效判斷標準 參照文獻 ［2］對患者的胃脘部疼痛、腹脹、飲食不振、神疲乏力、面色等主要癥狀和體征采用分級量化的方法進行記分，即分無、輕、中、重4級，記為0、1、2、3分。對舌、脈變化則分為正常和非正常兩級，分別記0、1分。臨床痊愈：癥狀、體征消失或基本消失，積分減少≥95%；顯效：癥狀、體征明顯改善，積分減少≥70%，但＜95%；有效：癥狀、體征均有好轉(zhuǎn)，積分減少≥30%，但＜70%；無效：癥狀、體征均無明顯改善，甚或加重，積分減少＜30%。積分計算公式為：［（治療前積分-治療后積分）/治療前積分］×100%。

1.4.2 胃鏡療效判定標準 臨床痊愈：潰瘍及周圍炎癥全部消失；顯效：潰瘍基本消失，但仍有炎癥表現(xiàn)；有效：潰瘍面縮小≥50% 以上；無效：潰瘍無變化或縮?。?0%者。

1.5 血清TFF2和SOD水平測定 抽取患者空腹靜脈血5 mL，室溫靜置1 h后3 500 r/min，離心10 min，吸出上層血清存放在-85℃冰箱保存。TFF2試劑盒購自武漢伊萊瑞特生物科技有限公司。SOD試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.5.1 采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）檢測血清TFF2水平。設(shè)定空白孔、樣品孔和標準品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢鹤鳛榭瞻讓φ?，樣品孔依次加樣品血清100μL，標準孔依次加稀釋為0、31.25、62.5、125、250、500、1 000、2 000、4 000 pg/mL的標準品100μL，37℃孵育反應90 min。棄液甩干后每孔加入生物素化抗體工作液100μL，37℃孵育反應60 min。洗板3次后，每孔加入酶結(jié)合物工作液100μL，37℃孵育反應60 min。洗板5次后，每孔加底物液90μL，37℃避光孵育反應15 min后，每孔加入50μL終止液，終止反應。用多功能酶標儀（Bio-Tek ELX800，美國）在450 nm波長測定OD值。標準品得到的數(shù)據(jù)用Excel作標準曲線，根據(jù)標準曲線回歸方程計算樣品的濃度。

1.5.2 采用WST-1法檢測血清SOD水平。按試劑盒要求設(shè)定對照孔、對照空白孔、測定孔和測定空白孔，分別加樣品、雙蒸水、酶工作液、酶稀釋液、底物應用液后，37℃孵育反應20 min。用多功能酶標儀（Bio-Tek ELX800，美國）在450 nm波長測定OD值。依據(jù)公式計算樣品中SOD水平。

1.6 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件，計量資料以表示，采用t檢驗，等級資料采用卡方檢驗，以P＜0.05為差異顯著有明顯統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者一般情況比較 經(jīng)卡方檢驗，兩組患者性別、年齡、病史等一般情況比較無統(tǒng)計學差異（P＞0.05），見表1。

表1 兩組患者一般情況比較Tab.1 Com parison of general information between the two groups

2.2 臨床療效比較 依據(jù)中醫(yī)證候療效診斷標準進行記分，根據(jù)記分結(jié)果把治療效果分別評定為臨床痊愈、顯效、有效和無效四個層次。經(jīng)卡方檢驗，兩組療效整體比較有顯著性差異 （P＜0.05），中藥組療效明顯優(yōu)于西藥組 （見表2）。

表2 兩組臨床療效比較Tab.2 Comparison of clinical effects between the two groups

2.3 兩組胃鏡下療效對比 經(jīng)卡方檢驗，兩組胃鏡下療效無顯著性差異 （P＞0.05），見表3。

表3 兩組胃鏡下療效比較Tab.3 Comparison of the curative effect between the two groups by gastroscopy

2.4 兩組治療前后血清TFF2和SOD的含量變化

結(jié)果顯示，經(jīng)過一個療程治療后，中藥組與西藥組患者血清中的TFF2和SOD水平與治療前相比都有明顯的提升 （P＜0.05），且中藥組患者治療后血清中TFF2和SOD水平明顯高于西藥組患者（P＜0.05），說明中藥組的治療作用要優(yōu)于西藥組（見表4）。

表4 兩組治療前后血清TFF2和SOD的含量變化（）Tab.4 Content changes of serum TFF2 and SOD in two groups（）

表4 兩組治療前后血清TFF2和SOD的含量變化（）Tab.4 Content changes of serum TFF2 and SOD in two groups（）

注：治療前與治療后比較，▲P＜0.05；治療后中藥組與西藥組比較，★P＜0.05

組別 n TFF2/（pg·m L-1）SOD/（U·mL-1）治療前 治療后中藥治療組 42 75.94±9.22 127.14±10.94▲ 64.61±7.28 101.23±8.30治療前 治療后▲西藥治療組 35 73.83±7.19 119.28±8.01▲★ 68.17±8.38 93.70±8.33▲★

3 討論

胃潰瘍（gastric ulcer）的產(chǎn)生與修復是一個十分復雜的過程，是多種細胞、生長因子及細胞外基質(zhì)相互作用的結(jié)果?，F(xiàn)代研究表明，胃黏膜防御屏障功能下降，防御保護因子減少是形成胃潰瘍的重要病理基礎(chǔ)之一。三葉因子家族（trefoil factor family，TFF）是一類含有三葉結(jié)構(gòu)域（又稱P結(jié)構(gòu)域）的小分子多肽，其中最常見的是乳腺癌相關(guān)肽（TFF1或pS2）、解痙攣多肽 （TFF2或SP）及小腸三葉因子（TFF3或ITF）。研究表明，三葉因子的主要表達位點在胃腸道，由胃腸道黏膜細胞分泌產(chǎn)生，但具有明顯的區(qū)域和細胞選擇性。TFF1主要由胃竇和胃體的隱窩及表層上皮的黏膜細胞產(chǎn)生，TFF2主要在胃竇部表達，TFF3主要由小腸和大腸黏膜細胞表達［3］。

近幾年研究顯示，三葉因子2（TFF2）表達的部位和水平與GU的關(guān)系非常密切，大量實驗也證實，TFF2能增加胃黏液糖蛋白的分泌，促進胃腸道上皮細胞移行和修復，是促進潰瘍愈合的重要機制之一［4-5］。另外，相關(guān)研究顯示，胃癌的發(fā)生與TFF2表達降低存在明顯的相關(guān)性［6］。

SOD是機體內(nèi)重要的抗氧化酶之一，胃潰瘍發(fā)生過程中氧自由基損傷是重要因素之一，大量試驗研究表明，SOD活性下降、抗氧化鐵能力降低，導致機體出現(xiàn)氧化應激反應，是胃潰瘍產(chǎn)生的重要機制［7-8］。

胃潰瘍屬祖國醫(yī)學的 “胃痛”的范疇，其發(fā)生主要是由于外感寒邪、飲食不節(jié)、七情失和、久病體虛等因素引起。根據(jù)臨床表現(xiàn)又分為寒邪客胃證、飲食停滯證、肝氣犯胃證、胃陰虧虛證、脾胃虛弱證等證候。本虛標實，正虛邪戀是臨床胃潰瘍病復發(fā)、遷延不愈的重要病理基礎(chǔ)［9］，故此，針對臨床慢性脾胃虛弱型胃潰瘍患者，采用補中益氣活血的方法治療并取得了較好的療效。本方以補中益氣湯為基礎(chǔ)方，加活血化瘀的五靈脂、蒲黃、赤芍等，共湊補中益氣，行氣活血化瘀之功效。補中益氣湯是金元時期名醫(yī)李東垣創(chuàng)制的治療脾胃病的代表方劑，分別見于 《內(nèi)外傷辨惑論》和 《脾胃論》，主要由黃芪、人參、白術(shù)、升麻、柴胡、當歸、陳皮、甘草等組成，全方功在補中益氣，升陽舉陷。研究表明，補中益氣湯能明顯減少胃潰瘍的炎癥反應，促進胃黏膜細胞的遷移、增殖和修復，具有胃黏膜保護及促進胃黏膜修復重建的作用［10-11］。

本實驗結(jié)果表明，以補中益氣湯為基礎(chǔ)方的補中益氣活血方能明顯提升患者血清中TFF2和SOD的表達水平 （P＜0.05），且治療效果明顯優(yōu)于西藥組。這說明補中益氣活血方治療脾胃虛弱型胃潰瘍的作用機理可能與調(diào)節(jié)胃黏膜中的TFF2和SOD的表達有關(guān)，通過提高胃黏膜中TFF2和SOD的水平，促進胃黏膜微血管的生成，促進胃黏膜的增殖與修復，從而達到保護胃黏膜、治療胃潰瘍的中用。關(guān)于補中益氣活血方促進胃黏膜中TFF2和SOD的生成與表達、促進胃潰瘍的修復與愈合的機制問題，還有待進一步深入研究。

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Effects of Buzhong Yiqi Huoxue Form ula on serum TFF2 and SOD in gastric ulcer patients

QIN Jian-she

（Chongqing Three GorgesMedical College，Chongqing 404120，China）

Buzhong Yiqi Huoxue Formula；gastric ulcer；trefoil factor family 2（TFF2；superoxide dismutase（SOD）

R287

A

1001-1528（2015）04-0735-04

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.04.010

2014-07-03

秦建設(shè) （1978—），男，講師，碩士，主治醫(yī)師，研究方向為中醫(yī)藏象理論研究。Tel：13594819353，E-mail：iamqjshe@ 163.com