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        磁處理對菊花組培苗增殖及生理生化的影響

        2015-01-15 15:53:59徐式近徐忠傳蔡平黃溶
        江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年11期
        關(guān)鍵詞:組培苗生理生化增殖

        徐式近+徐忠傳+蔡平+黃溶

        摘要:以切花菊品種優(yōu)香組培苗為試驗材料,用4種磁感應(yīng)強(qiáng)度(6、12、18、24mT)和4種磁處理時間(2.5、5、10、20h)的組合進(jìn)行磁處理,測定磁處理后組培苗的繁殖系數(shù)、可溶性糖含量、相對電導(dǎo)率以及POD、SOD、CAT活性等指標(biāo)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),12mT/10h處理下組培苗繁殖系數(shù)最高,12mT/5h處理下組培苗可溶性糖含量最高,18mT/20h處理下組培苗相對電導(dǎo)率最低,24mT/2.5h處理下組培苗CAT活性最低,18mT/10h處理下SOD活性最低,12mT/2.5h處理下POD活性最低。以上結(jié)果表明,磁處理對菊花組培苗繁殖系數(shù)及生理生化具有不同程度的影響,這為今后將磁處理應(yīng)用在菊花乃至其他觀賞植物組織培養(yǎng)方面提供理論的參考。

        關(guān)鍵詞:菊花;組培苗;磁處理;增殖;生理生化

        中圖分類號:S682.1+10.4+3文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號:1002-1302(2014)11-0080-03

        生物磁學(xué)是近幾十年發(fā)展起來的一門研究磁性、磁場與生物特性和生命活動之間相互聯(lián)系及相互影響的邊緣學(xué)科,目前已在醫(yī)療、工業(yè)、農(nóng)業(yè)和環(huán)保等方面得到廣泛的應(yīng)用[1]。植物組織培養(yǎng)幾乎涉及植物生物技術(shù)的所有內(nèi)容,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、分子生物學(xué)等研究領(lǐng)域[2]。然而,生物磁學(xué)在植物組織培養(yǎng)中的應(yīng)用相對較少,到目前為止僅有磁處理黃精[3]、菊花[4]、烏藥[5]、濱梅[6]等組培苗以及擬南芥[7]、變?nèi)~木[8]、馬尾松[9]等愈傷組織的報道,已有結(jié)果均表明合適的磁處理對植物組培苗或愈傷組織的生長有促進(jìn)作用。但這些報道多數(shù)只局限于磁處理對組培苗或愈傷組織外部形態(tài)的影響,而尚未涉及到內(nèi)部生理生化的影響。本試驗以切花菊品種優(yōu)香(Chrysanthemummorifolium)為材料,用4種磁感應(yīng)強(qiáng)度(6、12、18、24mT)和4種磁處理時間(2.5、5、10、20h)的組合進(jìn)行磁處理,探討磁處理對菊花組培苗增殖及生理生化的影響,為磁處理在菊花組織培養(yǎng)方面的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

        1材料與方法

        1.1材料與試劑

        切花菊優(yōu)香原始組培苗由張家港駿馬農(nóng)林科技有限公司提供,在常熟理工學(xué)院生物與食品工程學(xué)院植物生物技術(shù)實驗室擴(kuò)繁。試驗所用的試劑均為分析純,CAT、SOD、POD試劑盒均購自南京建成科技有限公司。

        1.2組培方法

        選擇生長健壯且一致的組培苗,在超凈工作臺中剪取長0.5cm左右?guī)?個節(jié)的莖段,剪掉葉片,留一點葉柄以免損傷葉腋,形態(tài)學(xué)上端朝上垂直插入分化培養(yǎng)基MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+30g/L蔗糖+8g/L瓊脂中,每瓶接種4~5個莖段。接種完后先在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3d,選取無污染的組培苗進(jìn)行磁處理。培養(yǎng)溫度為25±2℃,日光燈光源,光照度為21~24μmol/(m2·s),光照周期為12h/d[10]。

        1.3磁處理方法

        將無污染的菊花組培苗的培養(yǎng)瓶放在4種磁感應(yīng)強(qiáng)度A(6mT)、B(12mT)、C(18mT)、D(24mT)的磁處理裝置上進(jìn)行磁處理,設(shè)置處理時間為1(2.5h)、2(5h)、3(10h)、4(20h),采用完全隨機(jī)區(qū)組試驗設(shè)計,共得到16個磁處理組合,無磁處理為對照組CK。每組處理為3瓶,重復(fù)3次。處理后均放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng),條件同“1、2”節(jié),42d后統(tǒng)計測定各項指標(biāo)[3-5]。

        1.4指標(biāo)測定方法

        1.4.1繁殖系數(shù)統(tǒng)計統(tǒng)計0.5cm以上的生長正常的不定芽個數(shù)(不包括玻璃化芽),再計算繁殖系數(shù):繁殖系數(shù)=分化出的不定芽個數(shù)/分化出不定芽的外植體個數(shù)[10]。

        1.4.2相對電導(dǎo)率測定用電導(dǎo)儀測定。稱取0.3g不定芽,剪碎后置于試管中,加入15mL蒸餾水浸提2h,搖勻,用電導(dǎo)儀測定電導(dǎo)率R1,沸水浴15min,靜止冷卻至室溫,測電導(dǎo)率R2,最后計算相對電導(dǎo)率:相對電導(dǎo)率=初電導(dǎo)率/終電導(dǎo)率×100%[11-12]。

        1.4.3可溶性糖含量測定

        用蒽酮法測定[13]。精確稱取0.1g不定芽,剪碎后置于試管中,加入5mL蒸餾水,加蓋沸水浴30min,提取液過濾入50mL容量瓶中定容備用。每個樣品取1mL加等體積蒸餾水、0.5mL蒽酮乙酸乙酯與5mL濃硫酸于試管中,充分混勻,1min后水浴冷卻,用紫外-可見分光光度計測630nm處的吸光度D630nm,參照蔗糖標(biāo)準(zhǔn)曲線計算可溶性糖含量,蔗糖標(biāo)準(zhǔn)曲線線性回歸方程為:y=0.123x-0.1248,r=0.9998,可溶性糖含量=(標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的糖量×提取液總體積)/(植物質(zhì)量×測量用提取液的體積×106)×100%。

        1.4.5POD、SOD、CAT活性測定

        提取液制備:稱取1.0g不定芽,剪碎后加入預(yù)冷的研缽,加2mL預(yù)冷的磷酸緩沖液(0.05mol/L,pH值7.8),研磨后用6mL磷酸緩沖液沖洗于離心管中,6000r/min離心10min,上清液倒入50mL容量瓶定容備用。取上述酶提取液,均按照試劑盒說明書的步驟進(jìn)行測定。

        2結(jié)果與分析

        磁處理后將組培苗培養(yǎng)42d,統(tǒng)計測定各項生理生化指標(biāo),計算平均值,得到的平均值再計算相對指數(shù):相對指數(shù)=(處理組平均值-對照組平均值)/對照組平均值×100%。如果相對指數(shù)為正值,則表示磁處理后該指標(biāo)比對照組增加;如果為負(fù)值,則表示磁處理后該指標(biāo)比對照組減少。

        2.1磁處理對菊花組培苗繁殖系數(shù)的影響

        如圖1所示,磁處理對菊花組培苗繁殖系數(shù)有影響。在16個磁處理組合中,有11個處理組合的繁殖系數(shù)比對照組高,表明多數(shù)磁處理條件能促進(jìn)菊花組培苗不定芽的分化;其中繁殖系數(shù)比對照高20%以上磁處理組合有A2、A3、A4、B1、B3,其中B3最高,達(dá)60%,即12mT/10h是最有利于菊花組培苗不定芽的分化。當(dāng)磁感應(yīng)強(qiáng)度一定時,隨著磁處理時間的增加,繁殖系數(shù)基本呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢;當(dāng)磁處理時間一定時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,繁殖系數(shù)基本呈現(xiàn)先增加后減少或減少的趨勢。

        2.2磁處理對菊花組培苗可溶性糖含量的影響

        如圖2所示,磁處理對菊花組培苗可溶性糖含量有影響。在16個磁處理組合中,有9個處理組合的可溶性糖含量比對照組高,其中B2處理組合比對照組高13%,而A1、A3、B1、B3、C1、C2、C3、C4處理組合比對照組增加幅度在5%以下,表明這些磁處理雖能在不同程度上促進(jìn)菊花組培苗可溶性糖的合成,但多數(shù)情況下促進(jìn)效果不明顯。因此,B2處理12mT/5h是最有利于菊花組培苗可溶性糖的合成。磁感應(yīng)強(qiáng)度一定時,隨著磁處理時間的增加,可溶性糖含量的變化沒有明顯的規(guī)律;當(dāng)磁處理時間一定時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,可溶性糖含量基本呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢。

        2.3磁處理對菊花組培苗相對電導(dǎo)率的影響

        如圖3所示,所有處理組的相對電導(dǎo)率均比對照組低,表明所有處理組的細(xì)胞膜透性均比對照組小,其中相對電導(dǎo)率比對照組低20%以上的磁處理組合有A2、A3、B1、B3、C1、C2、C3、C4、D2,其中最低為C4,達(dá)34%,即18mT/20h是最能保護(hù)細(xì)胞膜不受損害。當(dāng)磁感應(yīng)強(qiáng)度一定時,隨著磁處理時間的增加,相對電導(dǎo)率的變化沒有明顯的規(guī)律;當(dāng)磁處理時間一定時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,相對電導(dǎo)率基本呈現(xiàn)先增加后減少再增加的趨勢。

        2.4磁處理對菊花組培苗抗氧化酶活性的影響

        2.4.1磁處理對菊花組培苗CAT活性的影響如圖4所示,磁處理對菊花組培苗CAT活性有影響。在16個處理組合中有12個處理的CAT活性比對照組低,表明這些磁處理條件能抑制CAT活性,其中CAT活性比對照組低20%以上的組合有A1、A2、B2、C4、D1,最低為D1,達(dá)30%,即24mT/2.5h最能抑制CAT活性。磁處理對菊花組培苗CAT活性影響沒有明顯的規(guī)律。

        2.4.2磁處理對菊花組培苗SOD活性的影響如圖5所示,磁處理對菊花組培苗SOD活性有影響。在16個處理組合中有15個處理組合的SOD活性比對照組低,表明這些磁處理條件抑制SOD活性,其中SOD活性比對照組低20%以上組合有B4、C3、C4、D2、D3,最低為C3,達(dá)30%,即18mT/10h是最能抑制SOD活性。磁感應(yīng)強(qiáng)度介于6~12mT時,隨著磁處理時間的增加SOD活性呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢;當(dāng)磁感應(yīng)強(qiáng)度介于18~24mT時,隨著磁處理時間的增加SOD活性呈現(xiàn)先減少后增加的趨勢;然而當(dāng)磁處理時間一定時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,SOD活性變化沒有明顯的規(guī)律。

        2.4.3磁處理對菊花組培苗POD活性的影響如圖6所示,磁處理對菊花組培苗POD活性有影響。在16個處理組

        合中有11個處理組合的POD活性均比對照組低,表明這些磁處理條件抑制POD活性,其中POD活性比對照組低20%以上的只有B1,即12mT/2.5h最能抑制POD活性。當(dāng)磁感應(yīng)強(qiáng)度介于6~24mT時,隨著磁處理時間的增加,POD活性基本呈現(xiàn)先減少后增加再減少的趨勢;當(dāng)磁感應(yīng)強(qiáng)度介于12~18mT時,隨著磁處理時間的增加,POD活性基本呈現(xiàn)先增加后減少再增加的趨勢;當(dāng)磁處理時間介于2.5~10h時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,POD活性呈現(xiàn)先減少后增加的趨勢;當(dāng)磁處理時間介于5~20h時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,POD活性呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢。

        3討論

        一些研究表明,磁處理能在不同程度上對植物組培苗或愈傷組織的生長有促進(jìn)作用,如徐忠傳等發(fā)現(xiàn)合適的磁處理條件能夠促進(jìn)菊花和烏藥不定芽的產(chǎn)生[4-5],閆道良等研究表明[6]合適的磁處理條件能夠促進(jìn)濱梅不定芽的增殖,梁華等研究表明,磁處理能夠促進(jìn)黃精根莖的增殖[3]。本試驗研究表明,合適的磁處理條件能夠促進(jìn)菊花不定芽的產(chǎn)生,與上述研究結(jié)果一致??扇苄蕴呛康母叩团c新陳代謝的快慢有密切的關(guān)系。梁華等研究表明,磁場處理后黃精組培苗的可溶性糖和蛋白質(zhì)的含量都有增加的趨勢,只是增加的趨勢各不相同[3]。本試驗中,合適的磁處理條件能增加菊花組培苗可溶性糖的含量,與梁華的研究結(jié)果一致,表明合適的磁處理條件能促進(jìn)菊花組培苗的新陳代謝。

        磁場作為一種脅迫因子,對細(xì)胞膜會產(chǎn)生一定程度的損傷,導(dǎo)致相對電導(dǎo)率增加[9]。本試驗中,磁處理菊花組培苗后相對電導(dǎo)率均下降,原因可能是磁處理后經(jīng)過42d的培養(yǎng),細(xì)胞膜的損傷已經(jīng)恢復(fù),而且細(xì)胞膜的穩(wěn)定性比對照組更好。磁處理可影響含有重要金屬的酶,從而改變這些酶的活性、結(jié)構(gòu)和功能,進(jìn)一步影響到這些酶所參與的一系列生理生化反應(yīng),使植物表現(xiàn)出磁效應(yīng)[14]。許多研究表明,合適的磁處理能夠提高抗氧化酶活性,從而減緩脂質(zhì)過氧化,延緩植物衰老、提高植物抗性等[1,3,9]。在本試驗中大部分磁處理組合抑制了抗氧化酶活性,與很多研究結(jié)果[1,3,9]相反。原因可能是磁處理后組培苗經(jīng)過42d的培養(yǎng),磁處理對抗氧化酶活性的影響已經(jīng)恢復(fù),組培苗的生理狀態(tài)相對穩(wěn)定,各方面代謝調(diào)整到較好狀態(tài),因此植物體內(nèi)的氧自由基含量較少且穩(wěn)定,自由基及其衍生物對植物體構(gòu)不成傷害或傷害很小,此時保護(hù)酶活性較小[15]。

        綜上所述,合適的磁處理條件對多種植物組培苗的生長有促進(jìn)作用,在此基礎(chǔ)上,可進(jìn)一步研究磁處理對組培苗抗性的影響。作為一種物理技術(shù),磁處理具有綠色、環(huán)保、方便、廉價等特點,因此在觀賞植物組織培養(yǎng)中的應(yīng)用前景廣闊。然而合適的磁處理條件因植物種類、植物生理狀態(tài)、培養(yǎng)環(huán)境等因素的不同而不同,因此需要根據(jù)實際情況進(jìn)行試驗。

        參考文獻(xiàn):

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        [2]呂毅,商澎.不同磁場環(huán)境和培養(yǎng)基對擬南芥種子誘導(dǎo)愈傷組織的影響[J].核農(nóng)學(xué)報,2012,26(5):723-728.

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        [5]徐忠傳,周靜亞.磁場對烏藥試管苗生長的生物學(xué)效應(yīng)研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(23):10013-10015.

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        [7]呂毅,商澎.不同磁場環(huán)境和培養(yǎng)基對擬南芥種子誘導(dǎo)愈傷組織的影響[J].核農(nóng)學(xué)報,2012,26(5):723-728.

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        2.2磁處理對菊花組培苗可溶性糖含量的影響

        如圖2所示,磁處理對菊花組培苗可溶性糖含量有影響。在16個磁處理組合中,有9個處理組合的可溶性糖含量比對照組高,其中B2處理組合比對照組高13%,而A1、A3、B1、B3、C1、C2、C3、C4處理組合比對照組增加幅度在5%以下,表明這些磁處理雖能在不同程度上促進(jìn)菊花組培苗可溶性糖的合成,但多數(shù)情況下促進(jìn)效果不明顯。因此,B2處理12mT/5h是最有利于菊花組培苗可溶性糖的合成。磁感應(yīng)強(qiáng)度一定時,隨著磁處理時間的增加,可溶性糖含量的變化沒有明顯的規(guī)律;當(dāng)磁處理時間一定時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,可溶性糖含量基本呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢。

        2.3磁處理對菊花組培苗相對電導(dǎo)率的影響

        如圖3所示,所有處理組的相對電導(dǎo)率均比對照組低,表明所有處理組的細(xì)胞膜透性均比對照組小,其中相對電導(dǎo)率比對照組低20%以上的磁處理組合有A2、A3、B1、B3、C1、C2、C3、C4、D2,其中最低為C4,達(dá)34%,即18mT/20h是最能保護(hù)細(xì)胞膜不受損害。當(dāng)磁感應(yīng)強(qiáng)度一定時,隨著磁處理時間的增加,相對電導(dǎo)率的變化沒有明顯的規(guī)律;當(dāng)磁處理時間一定時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,相對電導(dǎo)率基本呈現(xiàn)先增加后減少再增加的趨勢。

        2.4磁處理對菊花組培苗抗氧化酶活性的影響

        2.4.1磁處理對菊花組培苗CAT活性的影響如圖4所示,磁處理對菊花組培苗CAT活性有影響。在16個處理組合中有12個處理的CAT活性比對照組低,表明這些磁處理條件能抑制CAT活性,其中CAT活性比對照組低20%以上的組合有A1、A2、B2、C4、D1,最低為D1,達(dá)30%,即24mT/2.5h最能抑制CAT活性。磁處理對菊花組培苗CAT活性影響沒有明顯的規(guī)律。

        2.4.2磁處理對菊花組培苗SOD活性的影響如圖5所示,磁處理對菊花組培苗SOD活性有影響。在16個處理組合中有15個處理組合的SOD活性比對照組低,表明這些磁處理條件抑制SOD活性,其中SOD活性比對照組低20%以上組合有B4、C3、C4、D2、D3,最低為C3,達(dá)30%,即18mT/10h是最能抑制SOD活性。磁感應(yīng)強(qiáng)度介于6~12mT時,隨著磁處理時間的增加SOD活性呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢;當(dāng)磁感應(yīng)強(qiáng)度介于18~24mT時,隨著磁處理時間的增加SOD活性呈現(xiàn)先減少后增加的趨勢;然而當(dāng)磁處理時間一定時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,SOD活性變化沒有明顯的規(guī)律。

        2.4.3磁處理對菊花組培苗POD活性的影響如圖6所示,磁處理對菊花組培苗POD活性有影響。在16個處理組

        合中有11個處理組合的POD活性均比對照組低,表明這些磁處理條件抑制POD活性,其中POD活性比對照組低20%以上的只有B1,即12mT/2.5h最能抑制POD活性。當(dāng)磁感應(yīng)強(qiáng)度介于6~24mT時,隨著磁處理時間的增加,POD活性基本呈現(xiàn)先減少后增加再減少的趨勢;當(dāng)磁感應(yīng)強(qiáng)度介于12~18mT時,隨著磁處理時間的增加,POD活性基本呈現(xiàn)先增加后減少再增加的趨勢;當(dāng)磁處理時間介于2.5~10h時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,POD活性呈現(xiàn)先減少后增加的趨勢;當(dāng)磁處理時間介于5~20h時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,POD活性呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢。

        3討論

        一些研究表明,磁處理能在不同程度上對植物組培苗或愈傷組織的生長有促進(jìn)作用,如徐忠傳等發(fā)現(xiàn)合適的磁處理條件能夠促進(jìn)菊花和烏藥不定芽的產(chǎn)生[4-5],閆道良等研究表明[6]合適的磁處理條件能夠促進(jìn)濱梅不定芽的增殖,梁華等研究表明,磁處理能夠促進(jìn)黃精根莖的增殖[3]。本試驗研究表明,合適的磁處理條件能夠促進(jìn)菊花不定芽的產(chǎn)生,與上述研究結(jié)果一致??扇苄蕴呛康母叩团c新陳代謝的快慢有密切的關(guān)系。梁華等研究表明,磁場處理后黃精組培苗的可溶性糖和蛋白質(zhì)的含量都有增加的趨勢,只是增加的趨勢各不相同[3]。本試驗中,合適的磁處理條件能增加菊花組培苗可溶性糖的含量,與梁華的研究結(jié)果一致,表明合適的磁處理條件能促進(jìn)菊花組培苗的新陳代謝。

        磁場作為一種脅迫因子,對細(xì)胞膜會產(chǎn)生一定程度的損傷,導(dǎo)致相對電導(dǎo)率增加[9]。本試驗中,磁處理菊花組培苗后相對電導(dǎo)率均下降,原因可能是磁處理后經(jīng)過42d的培養(yǎng),細(xì)胞膜的損傷已經(jīng)恢復(fù),而且細(xì)胞膜的穩(wěn)定性比對照組更好。磁處理可影響含有重要金屬的酶,從而改變這些酶的活性、結(jié)構(gòu)和功能,進(jìn)一步影響到這些酶所參與的一系列生理生化反應(yīng),使植物表現(xiàn)出磁效應(yīng)[14]。許多研究表明,合適的磁處理能夠提高抗氧化酶活性,從而減緩脂質(zhì)過氧化,延緩植物衰老、提高植物抗性等[1,3,9]。在本試驗中大部分磁處理組合抑制了抗氧化酶活性,與很多研究結(jié)果[1,3,9]相反。原因可能是磁處理后組培苗經(jīng)過42d的培養(yǎng),磁處理對抗氧化酶活性的影響已經(jīng)恢復(fù),組培苗的生理狀態(tài)相對穩(wěn)定,各方面代謝調(diào)整到較好狀態(tài),因此植物體內(nèi)的氧自由基含量較少且穩(wěn)定,自由基及其衍生物對植物體構(gòu)不成傷害或傷害很小,此時保護(hù)酶活性較小[15]。

        綜上所述,合適的磁處理條件對多種植物組培苗的生長有促進(jìn)作用,在此基礎(chǔ)上,可進(jìn)一步研究磁處理對組培苗抗性的影響。作為一種物理技術(shù),磁處理具有綠色、環(huán)保、方便、廉價等特點,因此在觀賞植物組織培養(yǎng)中的應(yīng)用前景廣闊。然而合適的磁處理條件因植物種類、植物生理狀態(tài)、培養(yǎng)環(huán)境等因素的不同而不同,因此需要根據(jù)實際情況進(jìn)行試驗。

        參考文獻(xiàn):

        [1]曹宏,趙國林,張承烈.生物磁學(xué)在農(nóng)作物生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].植物生理學(xué)通訊,1999,35(2):163-168.

        [2]呂毅,商澎.不同磁場環(huán)境和培養(yǎng)基對擬南芥種子誘導(dǎo)愈傷組織的影響[J].核農(nóng)學(xué)報,2012,26(5):723-728.

        [3]梁華.磁場處理對黃精組培苗影響的研究[D].合肥:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué),2007.

        [4]徐忠傳,施佳宏,金波,等.磁處理對菊花組培苗生長的影響研究[C].第三屆全國植物組培,2007:55-58.

        [5]徐忠傳,周靜亞.磁場對烏藥試管苗生長的生物學(xué)效應(yīng)研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(23):10013-10015.

        [6]閆道良,欽佩,吳衛(wèi)國,等.磁處理對濱梅組培苗增殖及再生的影響[J].南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,2007,31(3):99-102.

        [7]呂毅,商澎.不同磁場環(huán)境和培養(yǎng)基對擬南芥種子誘導(dǎo)愈傷組織的影響[J].核農(nóng)學(xué)報,2012,26(5):723-728.

        [8]吳玉荷.磁場對變?nèi)~木愈傷組織培養(yǎng)的效應(yīng)[J].深圳大學(xué)學(xué)報:理工版,2002,19(1):67-71.

        [9]梁軍,寧少華,王振朝,等.脈沖磁場對馬尾松愈傷組織生長和生理生化特性的影響[J].林業(yè)科學(xué)研究,2008,21(6):818-824.

        [10]徐式近,徐忠傳.不同菊花品種高效直接再生體系的構(gòu)建[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,41(11):52-54,100.

        [11]侯福林.植物生理學(xué)實驗教程[M].北京:科學(xué)出版社,2004.

        [12]陳愛葵,韓瑞宏,李東洋,等.植物葉片相對電導(dǎo)率測定方法比較研究[J].廣東教育學(xué)院學(xué)報,2010,30(5):88-91.

        [13]王學(xué)奎.植物生理生化實驗原理和技術(shù)[M].2版.北京:高等教育出版社,2006.

        [14]王紅梅.磁場對綠豆芽長及超氧化物歧化酶的實驗研究[J].實驗技術(shù)與管理,2011,28(3):63-65,72.

        [15]王成霞,董曉穎,李培環(huán),等.桃葉片POD、SOD、CAT活性與樹體矮化和生長的關(guān)系[J].中國農(nóng)學(xué)通報,2007,23(6):353-357.

        2.2磁處理對菊花組培苗可溶性糖含量的影響

        如圖2所示,磁處理對菊花組培苗可溶性糖含量有影響。在16個磁處理組合中,有9個處理組合的可溶性糖含量比對照組高,其中B2處理組合比對照組高13%,而A1、A3、B1、B3、C1、C2、C3、C4處理組合比對照組增加幅度在5%以下,表明這些磁處理雖能在不同程度上促進(jìn)菊花組培苗可溶性糖的合成,但多數(shù)情況下促進(jìn)效果不明顯。因此,B2處理12mT/5h是最有利于菊花組培苗可溶性糖的合成。磁感應(yīng)強(qiáng)度一定時,隨著磁處理時間的增加,可溶性糖含量的變化沒有明顯的規(guī)律;當(dāng)磁處理時間一定時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,可溶性糖含量基本呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢。

        2.3磁處理對菊花組培苗相對電導(dǎo)率的影響

        如圖3所示,所有處理組的相對電導(dǎo)率均比對照組低,表明所有處理組的細(xì)胞膜透性均比對照組小,其中相對電導(dǎo)率比對照組低20%以上的磁處理組合有A2、A3、B1、B3、C1、C2、C3、C4、D2,其中最低為C4,達(dá)34%,即18mT/20h是最能保護(hù)細(xì)胞膜不受損害。當(dāng)磁感應(yīng)強(qiáng)度一定時,隨著磁處理時間的增加,相對電導(dǎo)率的變化沒有明顯的規(guī)律;當(dāng)磁處理時間一定時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,相對電導(dǎo)率基本呈現(xiàn)先增加后減少再增加的趨勢。

        2.4磁處理對菊花組培苗抗氧化酶活性的影響

        2.4.1磁處理對菊花組培苗CAT活性的影響如圖4所示,磁處理對菊花組培苗CAT活性有影響。在16個處理組合中有12個處理的CAT活性比對照組低,表明這些磁處理條件能抑制CAT活性,其中CAT活性比對照組低20%以上的組合有A1、A2、B2、C4、D1,最低為D1,達(dá)30%,即24mT/2.5h最能抑制CAT活性。磁處理對菊花組培苗CAT活性影響沒有明顯的規(guī)律。

        2.4.2磁處理對菊花組培苗SOD活性的影響如圖5所示,磁處理對菊花組培苗SOD活性有影響。在16個處理組合中有15個處理組合的SOD活性比對照組低,表明這些磁處理條件抑制SOD活性,其中SOD活性比對照組低20%以上組合有B4、C3、C4、D2、D3,最低為C3,達(dá)30%,即18mT/10h是最能抑制SOD活性。磁感應(yīng)強(qiáng)度介于6~12mT時,隨著磁處理時間的增加SOD活性呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢;當(dāng)磁感應(yīng)強(qiáng)度介于18~24mT時,隨著磁處理時間的增加SOD活性呈現(xiàn)先減少后增加的趨勢;然而當(dāng)磁處理時間一定時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,SOD活性變化沒有明顯的規(guī)律。

        2.4.3磁處理對菊花組培苗POD活性的影響如圖6所示,磁處理對菊花組培苗POD活性有影響。在16個處理組

        合中有11個處理組合的POD活性均比對照組低,表明這些磁處理條件抑制POD活性,其中POD活性比對照組低20%以上的只有B1,即12mT/2.5h最能抑制POD活性。當(dāng)磁感應(yīng)強(qiáng)度介于6~24mT時,隨著磁處理時間的增加,POD活性基本呈現(xiàn)先減少后增加再減少的趨勢;當(dāng)磁感應(yīng)強(qiáng)度介于12~18mT時,隨著磁處理時間的增加,POD活性基本呈現(xiàn)先增加后減少再增加的趨勢;當(dāng)磁處理時間介于2.5~10h時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,POD活性呈現(xiàn)先減少后增加的趨勢;當(dāng)磁處理時間介于5~20h時,隨著磁感應(yīng)強(qiáng)度的增加,POD活性呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢。

        3討論

        一些研究表明,磁處理能在不同程度上對植物組培苗或愈傷組織的生長有促進(jìn)作用,如徐忠傳等發(fā)現(xiàn)合適的磁處理條件能夠促進(jìn)菊花和烏藥不定芽的產(chǎn)生[4-5],閆道良等研究表明[6]合適的磁處理條件能夠促進(jìn)濱梅不定芽的增殖,梁華等研究表明,磁處理能夠促進(jìn)黃精根莖的增殖[3]。本試驗研究表明,合適的磁處理條件能夠促進(jìn)菊花不定芽的產(chǎn)生,與上述研究結(jié)果一致??扇苄蕴呛康母叩团c新陳代謝的快慢有密切的關(guān)系。梁華等研究表明,磁場處理后黃精組培苗的可溶性糖和蛋白質(zhì)的含量都有增加的趨勢,只是增加的趨勢各不相同[3]。本試驗中,合適的磁處理條件能增加菊花組培苗可溶性糖的含量,與梁華的研究結(jié)果一致,表明合適的磁處理條件能促進(jìn)菊花組培苗的新陳代謝。

        磁場作為一種脅迫因子,對細(xì)胞膜會產(chǎn)生一定程度的損傷,導(dǎo)致相對電導(dǎo)率增加[9]。本試驗中,磁處理菊花組培苗后相對電導(dǎo)率均下降,原因可能是磁處理后經(jīng)過42d的培養(yǎng),細(xì)胞膜的損傷已經(jīng)恢復(fù),而且細(xì)胞膜的穩(wěn)定性比對照組更好。磁處理可影響含有重要金屬的酶,從而改變這些酶的活性、結(jié)構(gòu)和功能,進(jìn)一步影響到這些酶所參與的一系列生理生化反應(yīng),使植物表現(xiàn)出磁效應(yīng)[14]。許多研究表明,合適的磁處理能夠提高抗氧化酶活性,從而減緩脂質(zhì)過氧化,延緩植物衰老、提高植物抗性等[1,3,9]。在本試驗中大部分磁處理組合抑制了抗氧化酶活性,與很多研究結(jié)果[1,3,9]相反。原因可能是磁處理后組培苗經(jīng)過42d的培養(yǎng),磁處理對抗氧化酶活性的影響已經(jīng)恢復(fù),組培苗的生理狀態(tài)相對穩(wěn)定,各方面代謝調(diào)整到較好狀態(tài),因此植物體內(nèi)的氧自由基含量較少且穩(wěn)定,自由基及其衍生物對植物體構(gòu)不成傷害或傷害很小,此時保護(hù)酶活性較小[15]。

        綜上所述,合適的磁處理條件對多種植物組培苗的生長有促進(jìn)作用,在此基礎(chǔ)上,可進(jìn)一步研究磁處理對組培苗抗性的影響。作為一種物理技術(shù),磁處理具有綠色、環(huán)保、方便、廉價等特點,因此在觀賞植物組織培養(yǎng)中的應(yīng)用前景廣闊。然而合適的磁處理條件因植物種類、植物生理狀態(tài)、培養(yǎng)環(huán)境等因素的不同而不同,因此需要根據(jù)實際情況進(jìn)行試驗。

        參考文獻(xiàn):

        [1]曹宏,趙國林,張承烈.生物磁學(xué)在農(nóng)作物生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].植物生理學(xué)通訊,1999,35(2):163-168.

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        [3]梁華.磁場處理對黃精組培苗影響的研究[D].合肥:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué),2007.

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        [5]徐忠傳,周靜亞.磁場對烏藥試管苗生長的生物學(xué)效應(yīng)研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(23):10013-10015.

        [6]閆道良,欽佩,吳衛(wèi)國,等.磁處理對濱梅組培苗增殖及再生的影響[J].南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,2007,31(3):99-102.

        [7]呂毅,商澎.不同磁場環(huán)境和培養(yǎng)基對擬南芥種子誘導(dǎo)愈傷組織的影響[J].核農(nóng)學(xué)報,2012,26(5):723-728.

        [8]吳玉荷.磁場對變?nèi)~木愈傷組織培養(yǎng)的效應(yīng)[J].深圳大學(xué)學(xué)報:理工版,2002,19(1):67-71.

        [9]梁軍,寧少華,王振朝,等.脈沖磁場對馬尾松愈傷組織生長和生理生化特性的影響[J].林業(yè)科學(xué)研究,2008,21(6):818-824.

        [10]徐式近,徐忠傳.不同菊花品種高效直接再生體系的構(gòu)建[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,41(11):52-54,100.

        [11]侯福林.植物生理學(xué)實驗教程[M].北京:科學(xué)出版社,2004.

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        [13]王學(xué)奎.植物生理生化實驗原理和技術(shù)[M].2版.北京:高等教育出版社,2006.

        [14]王紅梅.磁場對綠豆芽長及超氧化物歧化酶的實驗研究[J].實驗技術(shù)與管理,2011,28(3):63-65,72.

        [15]王成霞,董曉穎,李培環(huán),等.桃葉片POD、SOD、CAT活性與樹體矮化和生長的關(guān)系[J].中國農(nóng)學(xué)通報,2007,23(6):353-357.

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