鄭少華，李 欣，周 莉，楊范莉，陳琴華，張繼業(yè)，王牛民＊（.西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院，西安 7006；.西安交通大學(xué)藥學(xué)院，西安 7006；.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬東風(fēng)醫(yī)院實(shí)驗(yàn)中心，十堰 44008）

姜黃素緩釋片的制備及釋放度研究

鄭少華1，李 欣1，周 莉2，楊范莉2，陳琴華3，張繼業(yè)2，王牛民1＊（1.西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院，西安 710061；2.西安交通大學(xué)藥學(xué)院，西安 710061；3.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬東風(fēng)醫(yī)院實(shí)驗(yàn)中心，十堰 442008）

目的 制備姜黃素緩釋片并對其釋放度進(jìn)行研究。方法 高效液相色譜法。色譜柱：XTerra C18（150mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇－50mL·L－1冰醋酸溶液（60∶40）；檢測波長：420nm；流速：1.0mL·min－1；柱溫：30℃。結(jié)果 在0.003 6～0.036mg·mL－1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率為98.9%，RSD為1.2%，溶出8h后姜黃素累積釋放率可達(dá)80%以上。結(jié)論 該緩釋片釋放性能良好，且測定方法準(zhǔn)確可靠，可作為姜黃素緩釋片釋放度研究的評價(jià)方法。

姜黃素；高效液相色譜法；釋放度

藥用姜黃具有破血行氣、通經(jīng)止痛之功效［1］。姜黃素（curcumin，C21H20O6）是姜黃中的主要有效成分，具有抗氧化、抗炎及免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗動(dòng)脈粥樣硬化等生理和藥理作用［2］，并且其中一些藥理作用已進(jìn)入臨床驗(yàn)證階段，美國國立癌癥研究所已將姜黃素列為第三代癌化學(xué)預(yù)防藥［3］。但是，目前姜黃素還沒有被批準(zhǔn)上市的劑型，因此，眾多學(xué)者致力于姜黃素制劑的研究。緩釋劑型具有延長藥物作用時(shí)間、提高治療指數(shù)、減少服藥劑量、降低毒性、服藥方便和增加患者順應(yīng)性的特點(diǎn)。因此，本文研究制備了姜黃素緩釋片并對其釋放特性進(jìn)行研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 ZRS－8G智能溶出儀（天津大學(xué)無線電廠）；日本島津LC－20AT系列高效液相色譜儀；AY－120電子天平（日本島津）；單沖壓片機(jī)（北京國藥龍立科技有限公司）。

1.2 試藥 姜黃素對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號0823－9802）；姜黃素樣品（質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%，天津光復(fù)精細(xì)化工有限公司）；姜黃素緩釋片（自制）；甲醇（天津科密歐化學(xué)試劑有限公司，色譜純）；十二烷基硫酸鈉（上海晶純有限公司）；蒸餾水、液相用水（自制）。

2 方法與結(jié)果

2.1 姜黃素緩釋片的制備 用單沖壓片機(jī)粉末直接壓片法制備姜黃素緩釋片，片質(zhì)量200mg，硬度2～3kg，每片的處方為：姜黃素37.50mg，卡波姆68.58mg，HPMC K4M51.25mg，十二烷基硫酸鈉12.95mg，無水乳糖0.98mg，滑石粉2.45mg，硬脂酸鎂3.30mg，玉米淀粉23.00mg。

2.2 姜黃素含量測定方法的建立

2.2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn) 色譜柱為XTerra C18（150mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相為甲醇－50mL·L－1冰醋酸溶液（60∶40）；檢測波長為420nm；流速1mL·min－1；進(jìn)樣量20μL。理論板數(shù)按姜黃素峰計(jì)算達(dá)到3 000以上。

2.2.2 溶液制備 對照品溶液的制備：精密稱取姜黃素對照品約3.6mg，置于100mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

供試品溶液的制備：精密稱取40mg樣品細(xì)粉（約含姜黃素7.5mg），置于100mL量瓶中，加5g·L－1十二烷基硫酸鈉水溶液適量，振搖15min使溶解，用5g·L－1十二烷基硫酸鈉水溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。

2.2.3 專屬性考察 對2.2.2項(xiàng)下供試品溶液稀釋進(jìn)樣20μL，顯示主藥成分在此色譜條件下，與雜質(zhì)具有良好的分離效果，色譜圖見圖1。

圖1 HPLC圖A.姜黃素對照品；B.溶出樣品；1.姜黃素Fig.1 HPLC chromatogramsA.curcumin reference；B.dissolution sample；1.curcumin

2.2.4 線性關(guān)系 精密稱取姜黃素對照品3.6mg，置于100mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為儲備液。分別精密量取儲備液1，2.5，5和7.5mL，置于10mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。分別取上述對照品溶液和儲備液20μL，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，并以質(zhì)量濃度（C）和峰面積（A）作線性回歸。計(jì)算得回歸方程：Y＝128 031 524 X－374 349，r＝0.999 3。結(jié)果表明，姜黃素在0.003 6～0.036mg·mL－1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.5 精密度實(shí)驗(yàn) 分別量取2.2.2項(xiàng)下的對照品溶液2，6和8mL，置于10mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。分別連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄色譜圖，以峰面積計(jì)算，RSD分別為0.69%，0.23%和0.19%，結(jié)果表明本方法精密度良好。

2.2.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取2.2.2項(xiàng)下的供試品溶液，分別于0，2，4，6，12，24和48h進(jìn)樣20μL，記錄峰面積，RSD為0.35%（n＝7），表明供試品溶液在室溫下48h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.7 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 精密稱取同一批樣品（批號：20131222）共6份，加5g·L－1十二烷基硫酸鈉水溶液稀釋成0.03mg·mL－1的樣品溶液，取20μL注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，得RSD＝0.66%（n＝6），表明方法的重復(fù)性良好。

2.2.8 回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取批號為20131223的姜黃素緩釋片細(xì)粉適量（相當(dāng)于姜黃素11mg），置于100mL量瓶中，分別加入姜黃素對照品儲備液（稱取姜黃素對照品111mg，置于100mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻）約3.00，5.00和7.00mL，加5g·L－1十二烷基硫酸鈉水溶液稀釋至刻度，搖勻，制成低、中、高3種質(zhì)量濃度的溶液各3份。各稀釋10倍后分別取20μL注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，計(jì)算回收率，見表1。

表1 姜黃素加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab.1 Results of curcumin recovery rate

2.2.9 溶出度測定 將3批樣品片劑（批號20131222，20131223，20131224）按《中國藥典》（2010年版二部附錄ⅩC）規(guī)定的籃法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)［4］。溶出介質(zhì)為500mL的5g·L－1十二烷基硫酸鈉水溶液，溫度為37±1℃，轉(zhuǎn)速為50r·min－1。于1，2，3，4，5，6，7和8h時(shí)定時(shí)取樣，過濾，同時(shí)立即補(bǔ)加等量釋放介質(zhì)。取出的樣品液用甲醇稀釋2.5倍進(jìn)行HPLC分析，用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得累積釋放度。結(jié)果顯示，3批片劑都具有較好的釋放。結(jié)果如表2。

表2 3批姜黃素緩釋片釋放實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab.2 Cumulative release results of Curcumin Sustained Tablets

3 討論

選擇色譜條件時(shí)，甲醇和水作為流動(dòng)相姜黃素色譜峰會(huì)產(chǎn)生拖尾現(xiàn)象，但改為50mL·L－1冰醋酸溶液后，拖尾現(xiàn)象即消失。

姜黃素在水中的溶解度很差，有文獻(xiàn)記載陰離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉可以使姜黃素的溶解度增大1倍，且質(zhì)量濃度為5g·L－1的十二烷基硫酸鈉對姜黃素的增溶作用最強(qiáng)［5］，因此，本研究選擇質(zhì)量濃度為5g·L－1十二烷基硫酸鈉水溶液作為溶出介質(zhì)，以增加姜黃素的溶出效果，產(chǎn)生這種作用的可能原因是表面活性劑十二烷基硫酸鈉在溶液中形成了臨界膠束，對有效成分產(chǎn)生增溶作用［6］。

在進(jìn)行姜黃素溶出度實(shí)驗(yàn)時(shí)，因姜黃素長時(shí)間見光易分解，因此實(shí)驗(yàn)過程必須在避光的條件下操作，溶出所得樣品需立即處理進(jìn)樣，否則要在避光條件下保存。

姜黃素緩釋片的處方中卡波姆和HPMC K4M作為緩釋材料聯(lián)合被使用，同時(shí)為增加姜黃素的溶解加入十二烷基硫酸鈉作為增溶劑，無水乳糖為致孔劑，滑石粉和硬脂酸鎂為潤滑劑，玉米淀粉則為填充劑。

［1］韓剛，張義春，劉士勇.姜黃中姜黃素含量測定方法的比較［J］.西北藥學(xué)雜志，2005，20（1）：15－16.

［2］牛生洋，郝峰鴿，許秋亞.姜黃素的提取及應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.河南科技學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2008，36（4）：58－61.

［3］張軍，郭衛(wèi)，翟光喜.姜黃素劑型的研究概況［J］.食品與藥品，2010，12（3）：133－137.

［4］國家藥典委員會(huì).中國藥典2010年版［S］.二部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：1044.

［5］韓剛，霍文，李秋影，等.姜黃素的穩(wěn)定性研究［J］.中成藥，2007，29（2）：291－293.

［6］韓剛，韓學(xué)成，張衛(wèi)國.表面活性劑提高姜黃素提取率的研究［J］.中成藥，2004，26（4）：13－15.

Preparation and release behavior of Curcumin Sustained Tablets

ZHENG Shaohua1，LI Xin1，ZHOU Li2，YANG Fanli2，CHEN Qinhua3，ZHANG Jiye2，WANG Niumin1＊（1.The First Affiliated Hospital of Xi′an Jiaotong University，Xi′an 710061，China；2.School of Pharmacy，Xi′an Jiaotong University，Xi′an 710061，China；3.Experiment Center，Dongfeng Hospital of Hubei Medical College，Shiyan 442008，China）

Objective To research the preparation method and release behavior of Curcumin Sustained Tablets.Methods The HPLC quantitative analysis was performed on an XTerra C18column（150mm×4.6mm，5μm）with methanol and 50mL·L－1glacial acetic acid solution（60∶40）as the mobile phase at a flow rate of 1.0mL·min－1.The detection wavelength was 420nm and the column temperature was at 30℃.Results The calibration curve showed good linearity ranged from 0.003 6to 0.036mg·mL－1.The average recovery was 98.9%and RSD was 1.2%.Curcumin released from the tablets were more than 80%at 8h.Conclusion The release performance of Curcumin Sustained Tablets is good，and the analytical method is accurate and reliable，which can be used as an evaluation method for the release of Curcumin Sustained Tablets.

curcumin；HPLC；release behavior

10.3969／j.issn.1004－2407.2015.01.017

R944

A

1004－2407（2015）01－0065－03

2014－06－17）

陜西省自然科學(xué)基金（編號：2012JQ4025）

鄭少華，女，主治醫(yī)師

＊通信作者：王牛民，男，主管藥師