鄭瑞明 張東泉 汪勇軍

1．浙江衢化醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江衢州324000；2．浙江衢化醫(yī)院職業(yè)病科，浙江衢州324000；3．浙江省衢州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江衢州324000

放療與欖香烯注射液聯(lián)合治療原發(fā)性肝癌的效果評(píng)價(jià)

鄭瑞明1張東泉2汪勇軍3

1．浙江衢化醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江衢州324000；2．浙江衢化醫(yī)院職業(yè)病科，浙江衢州324000；3．浙江省衢州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江衢州324000

目的觀察欖香烯注射液聯(lián)合放療治療原發(fā)性肝癌療效及對(duì)血清中基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）－2和MMP－9的影響。方法將我院收治的100例原發(fā)性肝癌患者隨機(jī)分為對(duì)照組和觀察組，每組50例。采用常規(guī)放療方式對(duì)對(duì)照組患者實(shí)施治療；觀察組在上述基礎(chǔ)上放療第1天開始予攬香烯注射液600 mg/d，直至放療結(jié)束。統(tǒng)計(jì)兩組治療總有效率，并觀察治療前后血清MMP－2和MMP－9變化。結(jié)果觀察組的治療總有效率達(dá)92%，明顯高于對(duì)照組的72%（P＜0．05），觀察組治療前后MMP－2和MMP－9血清濃度分別下降為（89．36±11．03）ng/L和（85．28± 8．32）ng/L，顯著高于對(duì)照組的（46．28±10．12）ng/L和（39．66±9．43）ng/L（P＜0．05），觀察組的放療計(jì)劃實(shí)施時(shí)間和住院接受治療總時(shí)間分別為（14．53±3．08）d和（21．67±3．54）d，明顯短于對(duì)照組的（25．43±5．20）d和（35．41±6．56）d，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。結(jié)論應(yīng)用欖香烯注射液與放療方式聯(lián)合對(duì)原發(fā)性肝癌患者實(shí)施治療的臨床效果明顯，并能有效下調(diào)血清中MMP－2和MMP－9表達(dá)，對(duì)抑制腫瘤進(jìn)展有重要作用。

原發(fā)性肝癌；欖香烯；放射治療；基質(zhì)金屬蛋白酶

原發(fā)性肝癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，是高侵襲性的惡性腫瘤，發(fā)病隱匿，具有發(fā)病率高、疾病進(jìn)展迅速且易復(fù)發(fā)，約85%的患者在就診時(shí)已經(jīng)發(fā)生多發(fā)病灶和肝硬化，待確診時(shí)大多數(shù)患者已喪失手術(shù)時(shí)機(jī)，死亡率高[1]。對(duì)于中晚期發(fā)現(xiàn)的肝癌，由于無法進(jìn)行手術(shù)，所以主要采用放療聯(lián)合靶向分子藥物治療。經(jīng)肝動(dòng)脈導(dǎo)管栓塞化療術(shù)（TACE）是原發(fā)性肝癌首選的治療技術(shù)之一，但腫瘤細(xì)胞對(duì)所用的化療藥物尚有敏感性及耐藥性問題，不僅殺傷作用有限，而且對(duì)患者的肝腎功能、胃腸道系統(tǒng)及造血系統(tǒng)會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用，容易導(dǎo)致肝癌治療相關(guān)性并發(fā)癥，故療效亦不盡人意，且采用肝動(dòng)脈化療栓塞（TACE）近期有一定療效，但遠(yuǎn)期效果不夠理想[2]。目前對(duì)于因各種原因不能接受TACE、局部消融治療或化療的原發(fā)性肝癌患者，必須積極地研究新的更有效的治療方法。

近年來，三維適形放療為中晚期肝癌患者提供了一條新的治療途徑[3]，其能夠在有效保護(hù)患者正常組織的前提下，給予腫瘤組織高劑量的射線照射，達(dá)到盡可能殺滅腫瘤組織、提高臨床療效的作用。

放療是治療不能手術(shù)的晚期肝癌的一種重要方法，可殺死部分癌細(xì)胞，但是放療也會(huì)對(duì)患者產(chǎn)生一些嚴(yán)重的不良反應(yīng)，因此采用放療聯(lián)合其他藥物治療方法共同治療腫瘤日益受到人們的重視。欖香烯注射液是從姜科植物溫郁金中提取的抗癌有效成分[4]，藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明腹腔注射欖香烯可明顯抑制腫瘤細(xì)胞的DNA、RNA及蛋白質(zhì)合成，阻礙腫瘤細(xì)胞生成。該藥物還可作用腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞膜，造成細(xì)胞破裂死亡，并能改變腫瘤細(xì)胞的免疫原性，誘發(fā)機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫反應(yīng)。欖香烯注射液臨床用于治療惡性腫瘤已有10余年的歷史，經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究及臨床實(shí)驗(yàn)表明有良好的抗腫瘤作用，但是三維適形放療聯(lián)合欖香烯注射液治療肝癌的研究報(bào)道不多。本文觀察原發(fā)性肝癌患者在常規(guī)三維適形放療基礎(chǔ)上加用欖香烯注射液的療效及對(duì)血清中MMP－2和－9的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2009年1月1日～2013年12月31日我科確診原發(fā)性肝癌患者100例。根據(jù)治療方法不同分為對(duì)照組和觀察組各50例。其中對(duì)照組男30例，女20例，平均年齡58．5歲，Child－Pugh分級(jí)A級(jí)31例，B級(jí)19例；觀察組男28例，女22例，平均年齡60．3歲，Child－Pugh分級(jí)A級(jí)30例，B級(jí)20例。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05）。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

所有患者均符合2001年9月中國抗癌協(xié)會(huì)肝癌專業(yè)委員會(huì)制定的“原發(fā)性肝癌的臨床診斷與分期標(biāo)準(zhǔn)”：所有患者甲胎蛋白顯著升高，經(jīng)過進(jìn)一步的彩色超聲多普勒以及上腹部的CT或者M(jìn)RI提示肝內(nèi)占位性病變經(jīng)過肝穿刺并取少量病變組織送病理檢查，確診為原發(fā)性肝癌。納入及排除標(biāo)準(zhǔn)：所有上述診斷為原發(fā)性肝癌的患者，無法手術(shù)切除，符合欖香烯注射液聯(lián)合放療治療適應(yīng)證，全部患者肝功能Child－Pugh分級(jí)在B級(jí)以上，腎功能正常，預(yù)計(jì)生存期＞3個(gè)月，有典型的肝癌動(dòng)態(tài)CT或MRI陽性表現(xiàn)。

1.3 治療方法

對(duì)照組采用單純的三維適形放療治療。放療期給予糖皮質(zhì)激素（地塞米松，國藥準(zhǔn)字H37021969，辰欣藥業(yè)股份有限公司，規(guī)格：5mg/mL）和（或）甘露醇（國藥準(zhǔn)字H61020004，西安京西雙鶴藥業(yè)有限公司，規(guī)格：100 mL∶20 g）等對(duì)癥支持治療。觀察組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上加用欖香烯注射液（國藥準(zhǔn)字H10960115，大連華立金港藥業(yè)有限公司，規(guī)格：5mL∶25 mg）600 mg/d，直至放療結(jié)束。

1.4 MMP-2和MMP-9的檢測(cè)

治療前后次日清晨空腹抽取靜脈血5 mL，經(jīng)枸櫞酸鈉抗凝劑抗凝，3500 r/min離心5 min，吸取血漿。收集的血漿標(biāo)本置于－20℃冰箱保存?zhèn)溆?。采用酶?lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MMP－2和MMP－9，具體步驟如下：①抗原包被：將MMP－2和MMP－9抗原用包被緩沖液稀釋至（10～20）mg/L，在96孔板中每孔加入0．3 mL，37℃水浴3～4 h后放在4℃冰箱。②抗原洗滌：吸取抗原包被緩沖液，每孔加入洗滌緩沖液洗3次，每次5 min。③每孔加入被檢測(cè)血清0．2 mL，37℃孵育2 h。④用洗滌緩沖液洗3次，每次5 min。⑤加入含酶標(biāo)記的抗體，37℃孵育2 h。⑥用洗滌緩沖液洗3次，每次5 min。⑦每孔加入0．2 mL底物溶液，室溫反應(yīng)30 min。⑧加終止液終止反應(yīng)。⑨作標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算檢測(cè)樣本值。

1.5 療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[5]

觀察兩組患者接受治療后的不良反應(yīng)發(fā)生情況。兩組患者接受治療后3個(gè)月的近期療效采用世界衛(wèi)生組織制定的實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)定，分為完全緩解、部分緩解、穩(wěn)定以及進(jìn)展，有效包括完全緩解以及部分緩解，無效包括穩(wěn)定和進(jìn)展。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS13．0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件，計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組放療實(shí)施時(shí)間和住院總時(shí)間比較

對(duì)照組患者常規(guī)放療計(jì)劃共計(jì)實(shí)施（25．43±5．20）d，共計(jì)住院總時(shí)間（14．53±3．08）d；觀察組患者放療計(jì)劃共計(jì)實(shí)施（35．41±6．56）d，共計(jì)住院總時(shí)間（21．67± 3．54）d。兩組患者放療實(shí)施時(shí)間和住院總時(shí)間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05），見表1。

表1 兩組患者放療實(shí)施時(shí)間與住院總時(shí)間比較±s，d）

表1 兩組患者放療實(shí)施時(shí)間與住院總時(shí)間比較±s，d）

組別n 放療實(shí)施時(shí)間住院總時(shí)間對(duì)照組觀察組5 0 5 0 t值P 2 5．4 3 ± 5．2 0 3 5．4 1 ± 6．5 6 8．6 7＜0．0 5 1 4．5 3 ± 3．0 8 2 1．6 7 ± 3．5 4 9．4 3＜0．0 5

2.2 兩組治療前后血清MMP-2和MMP-9水平改善幅度比較

對(duì)照組應(yīng)用常規(guī)放療方式治療前后血清MMP－2和MMP－9水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；觀察組應(yīng)用欖香烯注射液與放療方式聯(lián)合治療前后血清MMP－2和MMP－9水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。上述兩項(xiàng)觀察指標(biāo)治療前組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05），治療后組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05），見表2。

2.3 兩組近期療效比較

觀察組總有效率92%（完全緩解11例，部分緩解35例，穩(wěn)定3例，進(jìn)展1例），明顯高于對(duì)照組72%（完全緩解5例，部分緩解31例，穩(wěn)定10例，進(jìn)展4例），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．01）。見表3。

2.4 兩組不良反應(yīng)發(fā)生率

對(duì)照組35例患者在常規(guī)放療計(jì)劃實(shí)施后出現(xiàn)肝功能損傷、胃腸道反應(yīng)、骨髓移植、發(fā)熱、疼痛等不良反應(yīng)，不良反應(yīng)發(fā)生率為70%（35/50）；觀察組患者有19例放療計(jì)劃實(shí)施后出現(xiàn)肝功能損傷、胃腸道反應(yīng)、骨髓移植、發(fā)熱、疼痛等不良反應(yīng)，不良反應(yīng)發(fā)生率為38%（19/50），兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。

3 討論

原發(fā)性肝癌侵襲性強(qiáng)，多數(shù)就診時(shí)就已經(jīng)失去了手術(shù)的機(jī)會(huì)。目前常規(guī)采用TACE治療近期雖然能達(dá)到一定的治療效果，但其遠(yuǎn)期效果不佳。以往一直認(rèn)為常規(guī)放射治療對(duì)肝臟損傷太大，患者難以耐受，且治療效果不佳[6，7]。然而近期發(fā)現(xiàn)欖香烯注射治療對(duì)眾多惡性腫瘤治療效果較好。欖香烯注射液是從姜科植物溫郁金中提取的抗癌有效成分，是我國自主開發(fā)研制的廣譜抗癌二類新藥[8－10]，其可降低癌癥細(xì)胞有絲分裂能力，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，誘發(fā)機(jī)體免疫防御。也有研究發(fā)現(xiàn)欖香烯對(duì)肝癌細(xì)胞系Hep G2具有放射增敏的效果，且其毒副作用較輕[11]，為此，我們?cè)诖嘶A(chǔ)上對(duì)采用化療聯(lián)合欖香烯注射治療原發(fā)性肝癌效果進(jìn)行探討。

表2 兩組患者治療前后血清MMP-2和MMP-9水平改善幅度比較（s，ng/L）

表2 兩組患者治療前后血清MMP-2和MMP-9水平改善幅度比較（s，ng/L）

組別n對(duì)照組觀察組t值P M M P－2治療前治療后變化值M M P－9治療前治療后變化值5 0 5 0 1 1 9．7 2 ± 1 1．6 7 1 2 1．8 1 ± 1 2．4 3 0．6 7＞0．0 5 7 3．4 4 ± 8．7 6 3 2．4 5 ± 6．3 4 1 1．4 3＜0．0 5 4 6．2 8 ± 1 0．1 2 8 9．3 6 ± 1 1．0 3 1 0．2 1＜0．0 5 1 1 8．3 1 ± 1 0．5 7 1 2 0．4 9 ± 1 1．9 8 0．5 9＞0．0 5 7 8．6 5 ± 8．0 2 3 5．2 1 ± 7．2 1 1 2．1 4＜0．0 5 3 9．6 6 ± 9．4 3 8 5．2 8 ± 8．3 2 1 1．0 2＜0．0 5

表3 兩組患者療效比較[n（%）]

本研究結(jié)果顯示，放療聯(lián)合欖香烯注射治療的觀察組總有效率顯著高于對(duì)照組，表明采用放療聯(lián)合欖香烯注射治療較單一用三維適形放射治療方式效果更優(yōu)，且治療后病情進(jìn)展率較低，主要是因?yàn)闄煜阆┳⑸淇蓪?duì)肝癌細(xì)胞起放射增敏的效果。另外原發(fā)性肝癌浸潤(rùn)性轉(zhuǎn)移是中晚期最常見的死亡原因，其最重要的環(huán)節(jié)之一即是底膜或細(xì)胞外基質(zhì)的降解，其在腫瘤轉(zhuǎn)移的起始和終末階段血管生成中發(fā)揮重要作用[12]。眾所周知，基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）是高度保守的依賴于鋅離子的內(nèi)切蛋白酶的家族，MMP－2、MMP－9在內(nèi)皮血管過程的早期血管基底膜的降解中起重要作用[13]。我們對(duì)放療聯(lián)合欖香烯注射治療前后MMP－2和MMP－9的活性進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示觀察組MMP－2和MMP－9活性降低更為顯著，且對(duì)照組和觀察組的活性變化值之間差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05），如此表明放療聯(lián)合欖香烯注射治療后或可更為有效地防止原發(fā)性肝癌的浸潤(rùn)性轉(zhuǎn)移，效果或優(yōu)于單獨(dú)采用放射治療，主要是因?yàn)闄煜阆┚哂忻黠@的抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增值的效果，可使細(xì)胞周期阻滯于G1期，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，同時(shí)抑制血管內(nèi)皮中的MMP－2和MMP－9活性，對(duì)由MMP－2和MMP－9所引發(fā)的機(jī)體調(diào)節(jié)通路阻斷產(chǎn)生有效抑制，進(jìn)而抑制內(nèi)皮細(xì)胞的生成血管能力。

此外，有研究表明欖香烯具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能[14，15]，參與集體免疫調(diào)節(jié)，可顯著提高抗腫瘤效果，同時(shí)也可減少患者因放療引起的白細(xì)胞降低等各種毒副作用的發(fā)生。本研究也顯示除了這一特點(diǎn)，采用欖香烯聯(lián)合放療治療后患者的放療時(shí)間和住院總時(shí)間較單獨(dú)采用放射治療顯著縮短，間接表明欖香烯可促進(jìn)放療效果，縮短放療時(shí)間。

綜上所述，欖香烯與放療方案聯(lián)合治療原發(fā)性肝癌的效果比較明顯，比單純實(shí)施放療可以明顯提高近期療效，降低侵襲轉(zhuǎn)移的發(fā)生，縮短住院時(shí)間，具有較好的應(yīng)用前景。

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Clinical observation of elemene injection adjuvant three-dimensional conformal radiotherapy in treatment of primary hepatic cancer

ZHENG Ruiming1ZHANG Dongquan2WANG Yongjun3
1．Department of Clinical Laboratory,Zhejiang Quhua Hospital,Quzhou324000,China;2．Department of Occupational Diseases,Zhejiang Quhua Hospital,Quzhou324000,China;3．Department of Clinical Laboratory,Quzhou People’s Hospital,Quzhou 324000,China

Objective To observe the clinical efficacy of the elemene injection adjuvant three－dimensional conformal radiotherapy to treat the primary liver cancer and their impact to the expression of serum matrix metalloproteinase (MMP)－2 and MMP－9．Methods One hundred primary liver cancer patients were randomly divided into the observation group which was given elemene injection(600 mg/d)adjuvant three－dimensional conformal radiotherapy and the control group which was given three－dimensional conformal radiotherapy in our hospital,with an average 50 cases in each group．The control group was treated with the three－dimensional conformal radiotherapy,while the observation group was given elemene injection(600 mg/d)based on the control group,until the end of radiotherapy．The total efficiency of the two groups and the change of serum MMP－2 and MMP－9 before and after treatment were observed．Results The total efficiency of the observation group was reach to 92%,which was significantly higher than the control group that was only 72%(P＜0．05)．In addition,the decreased changes of the serum MMP－2 and MMP－9 in the observation group were(89．36±11．03)ng/L and(85．28±8．32)ng/L respectively,which were also significantly higher than the control group which were(46．28±10．12)ng/L and(39．66±9．43)ng/L(P＜0．05)．However,the total time for radiotherapy treatment and hospitalization time in the observation group were(14．53±3．08)d and(21．67±3．54)d respectively,which was significantly shorter than the control group which were(25．43±5．20)d and(35．41±6．56)d respectively(P＜0．05)．Conclusion The clinical efficacy of the elemene injection adjuvant three－dimensional conformal radiotherapy in treatment of primary liver cancer is obvious．And it can reduce the expression of MMP－2 and MMP－9 in serum effectively,which have an important role to inhibit the tumor progression．

Primary liver cancer;Elemene;Radiotherapy;Matrix metalloproteinase

R735.7

B

1673-9701（2015）27-0059-04

2015-03-17）

浙江省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（LY13H240001）