劉 彬 黃占波 楚冬海/遼寧科技學(xué)院生物醫(yī)藥與化學(xué)工程學(xué)院

蒼術(shù)麩炒后茅術(shù)醇含量變化研究

劉 彬 黃占波 楚冬海/遼寧科技學(xué)院生物醫(yī)藥與化學(xué)工程學(xué)院

目的：采用氣相色譜法測定蒼術(shù)麩炒前后茅朮醇的含量，明確麩炒對蒼術(shù)中該成分含量的影響。方法：色譜柱為HP-5石英彈性毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm），氮?dú)庾鳛檩d氣，采用氫火焰檢測器，程序升溫方式，分流進(jìn)樣（10∶1），進(jìn)樣口溫度為220 ℃，檢測器溫度為250 ℃。

蒼術(shù)；麩炒；茅朮醇；氣相色譜

傳統(tǒng)中藥材蒼術(shù)來源于菊科植物茅蒼術(shù)Atractylodes lancea（Thunb.）DC.或北蒼術(shù)Atractylodes chinensis（DC.）Koidz.的干燥根莖，具有燥濕健脾、祛風(fēng)散寒等功效[1]。現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)蒼術(shù)具有抗胃潰瘍、促進(jìn)肝蛋白合成、改善脾虛、利尿等作用[2]。蒼術(shù)的化學(xué)成分主要為倍半萜、聚乙烯炔類等成分組成的揮發(fā)油，以及氨基酸、倍半萜糖苷等水溶性成分和少量的糠醛[3-5]；其中蒼術(shù)揮發(fā)油是其主要的活性成分，茅術(shù)醇和β-桉葉醇含量較高。臨床上目前應(yīng)用的蒼術(shù)多為麩炒蒼術(shù)，蒼術(shù)麩炒后的化學(xué)成分尤其是揮發(fā)油成分會(huì)發(fā)生明顯變化，本實(shí)驗(yàn)采用氣相色譜法測定全國十個(gè)地區(qū)的生蒼術(shù)片及自行炮制的麩炒蒼術(shù)片中茅朮醇的含量，評價(jià)蒼術(shù)麩炒前后其揮發(fā)油中主要成分茅朮醇含量的差異[6]，初步闡明麩炒該成分的的影響。

1.材料

1.1 儀器 Agilent 6820氣相色譜儀及其配套設(shè)備，數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；HP-5(0.32 mm×30m)石英彈性毛細(xì)管柱；FID檢測器；AR2140電子分析天平（上海奧豪斯公司）；sartorius CP225D型電子天平( 十萬分之一，德國sartorius公司）；KH-300P型超聲波清洗器（昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司）。

1.2 試劑和試藥 β-桉葉油醇和茅術(shù)醇對照品均為自制，并經(jīng)GC用歸一化法測定，含量均大于98％。正十六醇（GC級，純度大于99％）。蒼術(shù)飲片分別購自浙江寧波，河北，內(nèi)蒙古等地，經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)李峰教授鑒定均為茅蒼術(shù)[Atractylodes lancea (Thunb.) DC.]。麩炒品按照2010版《中華人民共和國藥典》自制。色譜純甲醇（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；分析純甲醇（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）。

2.方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 HP-5(0.32 mm×30m)石英彈性毛細(xì)管柱，進(jìn)樣口溫度220℃，氫火焰檢測器(FID)250℃，載氣為N2氣，進(jìn)樣量1μL，分流進(jìn)樣（10：1），柱流量1 mL·min-1；程序升溫：柱初始溫度為120℃（持續(xù)2min），以10℃·min-1升至166℃（持續(xù)8min），以20℃·min-1升至250℃（持續(xù)1min）。采用內(nèi)標(biāo)法，以正十六醇為內(nèi)標(biāo)物。見圖1。

圖1 氣相色譜圖圖

A 對照品 B 內(nèi)標(biāo) C 供試品

1.茅術(shù)醇；2. 正十六醇

2.2 對照品儲備液的制備

稱取茅術(shù)醇適量，加甲醇定容，制成1 mL含茅術(shù)醇10 mg的溶液。

2.3 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

稱取正十六醇適量，精密稱定，制成每1 ml含15 mg正十六醇的甲醇溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液。

2.4 對照品溶液的制備

精密量取對照品儲備液2 ml，內(nèi)標(biāo)1 mL，置于5mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.5 供試品溶液的制備

取蒼術(shù)粉末（過60目篩），精密稱取0.2g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇，稱重，放置12小時(shí)，超聲處理（功率250 W，頻率50kHz）30min，稱重，加甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，置10mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，作為供試品溶液。

2.6 線性范圍考察

精密吸取對照品儲備液0.3 mL，0.6 mL，0.9 mL，1.2 mL，1.5 mL，1.8 mL至5 mL量瓶中，加入內(nèi)標(biāo)溶液1mL，加甲醇定容至刻度，搖勻，備用。精密吸取1 μL，注入氣相色譜儀中，按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件，測定峰。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，以對照品與內(nèi)標(biāo)物的色譜峰面積之比為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為：Y=1.2134X+0.1879，r=0.9995。表明茅術(shù)醇進(jìn)樣量在0.6μg-3.6μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.7 校正因子的測定

吸取含正十六醇的對照品1 μL，按“2.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)樣6次，計(jì)算校正因子，結(jié)果平均校正因子為0.912，RSD為1.12％。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn)考察

取同一供試品溶液（浙江寧波）5μL，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件，分別在0、4、8、12、24、48h時(shí)間，進(jìn)樣，測定色譜峰面積，計(jì)算，RSD為0.87％，結(jié)果表明，供試品溶液在48h內(nèi)色譜峰面積比無明顯變化。

2.9 精密度試驗(yàn)考察

精密吸取供試品溶液5μL（浙江寧波），按“2.1”項(xiàng)下色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次，測定色譜峰面積，并將茅術(shù)醇峰面積與內(nèi)標(biāo)物色譜峰面積作比，RSD為0.98％，結(jié)果表明，本試驗(yàn)精密度試驗(yàn)符合規(guī)定。

2.10 重復(fù)性試驗(yàn)考察

精密稱取本品0.2g（浙江寧波），按“2.1”項(xiàng)下色譜條件，測定，茅術(shù)醇的平均含量為21.2mg/g，RSD為2.87％，結(jié)果表明，本試驗(yàn)測定方法的重復(fù)性良好。

2.11 回收率試驗(yàn)考察

取已知含量的蒼術(shù)（浙江寧波，茅術(shù)醇含量為21.2 mg/g）6份，每份0.1 g，精密稱定，置錐形瓶中，加入茅術(shù)醇濃度為1.02 mg/mL的對照品溶液2 mL，測定，計(jì)算，結(jié)果茅術(shù)醇平均回收率為98.7％，RSD為2.3％，表明符合有關(guān)規(guī)定。

2.12 含量測定

按“2.1”項(xiàng)下色譜條件，測定10批來源于不同地區(qū)的的蒼術(shù)片和相應(yīng)的麩炒蒼術(shù)片中茅術(shù)醇的含量，結(jié)果見表1 。

表1 不同來源生蒼術(shù)和麩炒蒼術(shù)中茅術(shù)醇的含量 (n=3)

根據(jù)表2-12測定結(jié)果顯示，蒼術(shù)麩炒后茅術(shù)醇和β-桉葉油醇的含量均呈現(xiàn)下降的趨勢。

3.討論

3.1 在確定供試品溶液的制備方法時(shí)，本實(shí)驗(yàn)先后考察了超聲、回流和索氏提取等不同的提取方法，考察了甲醇、石油醚、環(huán)己烷等不同的提取溶劑，還考察了不同的提取時(shí)間和提取溶劑的容量，最終確定了本文的最佳提取方法。

3.2 由不同來源的蒼術(shù)飲片的測定結(jié)果可知，來源于不同地區(qū)的蒼術(shù)，茅術(shù)醇的含量相差較大，最高和最低含量相差達(dá)到20倍，說明蒼術(shù)來源不同，質(zhì)量不同。

3.3 通過比較生蒼術(shù)和相對應(yīng)的麩炒蒼術(shù)中茅術(shù)醇的含量可知，蒼術(shù)麩炒后該成分的含量明顯降低，分析原因可能是在炮制過程中茅術(shù)醇作為揮發(fā)性成分受加熱的影響，導(dǎo)致含量的降低。

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典：一部[S]. 2010 年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：150.

[2] 劉國生，孫備，明亮，等.蒼術(shù)揮發(fā)油與水溶性成分的主要藥理作用比較[J]. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，38（2）：124.

[3] 關(guān)穎麗: 蒼術(shù)化學(xué)成分的現(xiàn)代研究進(jìn)展[J]. 人參研究，2007，（1）28-33.

[4] 歐陽臻，江濤濤，繆亞東， 等. 蒼術(shù)的化學(xué)成分、道地性和藥理活性研究進(jìn)展[J]. 時(shí)珍國醫(yī)國藥，2006，10（17）：1936-1938.

[5] 李霞，王金輝，李銑，等: 北蒼術(shù)化學(xué)成分的研究[J]. 沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，9（3）：178.

[6] 姚佳，劉玉強(qiáng)，才謙. GC 法測定不同來源蒼術(shù)飲片中茅術(shù)醇和β-桉葉醇的含量[J]. 中國藥房，2014，25（3）：246-248.

劉彬(1978-)，女（漢族），新疆人，本科，研究方向：制藥工程。

楚冬海(1982-)，男（漢族），山東人，研究生，研究方向：天然藥物化學(xué)。

結(jié)果：測定了10個(gè)不同地區(qū)市售蒼術(shù)片及自制的麩炒蒼術(shù)片中茅朮醇的含量，發(fā)現(xiàn)麩炒蒼術(shù)中該成分的含量低于生蒼術(shù)。結(jié)論：麩炒導(dǎo)致蒼術(shù)揮發(fā)性成分茅朮醇的含量下降。

遼寧省教育廳一般項(xiàng)目，編號：L2014502。