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        黃秋葵果膠理化特性的研究

        2015-01-03 01:14:49李加興石春誠(chéng)肖秀鳳周炎輝
        食品科學(xué) 2015年17期
        關(guān)鍵詞:醛酸黃秋葵果膠

        李加興,石春誠(chéng),馬 浪,吳 越,肖秀鳳,周炎輝

        (1.吉首大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,湖南 吉首 416000;2.湖南奇異生物科技有限公司,湖南 長(zhǎng)沙 410008)

        黃秋葵果膠理化特性的研究

        李加興1,石春誠(chéng)1,馬 浪2,吳 越2,肖秀鳳2,周炎輝2

        (1.吉首大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,湖南 吉首 416000;2.湖南奇異生物科技有限公司,湖南 長(zhǎng)沙 410008)

        以商品柑橘果膠為對(duì)照,研究黃秋葵果膠的理化特性及果膠質(zhì)量濃度、加熱溫度、pH值、蔗糖質(zhì)量濃度和CaCl2質(zhì)量濃度等因素對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響。結(jié)果表明:黃秋葵果膠總半乳糖醛酸含量為86.68%,酯化度為75.45%,溶解度為82%,pH值為4.63,屬于弱酸性高酯果膠;黃秋葵果膠的黏度隨著加熱時(shí)間的延長(zhǎng)而下降,但其熱穩(wěn)定性?xún)?yōu)于商品柑橘果膠;黃秋葵果膠的黏度與其質(zhì)量濃度、蔗糖質(zhì)量濃度均成正相關(guān),與加熱溫度成負(fù)相關(guān),而隨pH值、CaCl2質(zhì)量濃度的增大呈先上升后下降的趨勢(shì),表現(xiàn)出一般果膠的黏度特性。黃秋葵果膠的黏度及熱穩(wěn)定性能優(yōu)于商品柑橘果膠,是一種優(yōu)質(zhì)果膠。

        黃秋葵;果膠;黏度;理化特性

        黃秋葵為錦葵科(Malvaceae)秋葵屬(Abelmoschus manihot(L.)Medic)一年生草本植物,別名秋葵、補(bǔ)腎草、羊角豆等,原產(chǎn)于非洲,我國(guó)北京、上海、浙江、廣東等地區(qū)也均有種植[1-2]。黃秋葵富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、維生素、膳食纖維、黃酮及多糖等,是一種營(yíng)養(yǎng)保健型蔬菜[3]。

        果膠作為一種親水性植物膠,常存在于高等植物的根、莖、葉和果實(shí)中,是從植物中提取的一種天然多糖類(lèi)高分子化合物[4]。果膠具有非常好的增稠性、凝膠性、穩(wěn)定性、乳化性等,常作為天然食品添加劑應(yīng)用于果醬、果凍、糖果、乳酸、果汁飲料等食品的加工中[5]。研究表明,黃秋葵嫩果中含蛋白質(zhì)約2.5%,含果膠約24.8%,具有促進(jìn)消化、降低血脂水平、增強(qiáng)人的體力和耐力等功效,其開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景廣闊[2,6]。

        目前,國(guó)內(nèi)對(duì)黃秋葵的研究主要集中在種植、栽培以及主要成分的提取及工藝優(yōu)化上,而對(duì)于黃秋葵的果膠、黃酮、多糖等活性成分理化特性的研究較少。果膠是一種天然高分子化合物,具有良好的膠凝化和乳化穩(wěn)定作用,其作為食品添加劑應(yīng)用前景廣闊。因此,本實(shí)驗(yàn)以黃秋葵果膠為對(duì)象,研究其理化特性及果膠質(zhì)量濃度、加熱溫度、pH值、蔗糖質(zhì)量濃度和CaCl2質(zhì)量濃度等因素對(duì)果膠黏度的影響,以期為黃秋葵果膠的商品化應(yīng)用提供理論指導(dǎo)。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        黃秋葵嫩果 湖南省瀏陽(yáng)市淳口鎮(zhèn)湘純黃秋葵種植專(zhuān)業(yè)合作社;商品柑橘果膠 河南金潤(rùn)食品添加劑有限公司。

        D-(+)-半乳糖醛酸(高級(jí)純) 合肥博美生物科技有限責(zé)任公司;咔唑、NaOH、H2SO4、CaCl2、HCl、酚酞、無(wú)水乙醇、蔗糖均為分析純。

        1.2 儀器與設(shè)備

        PHSJ-4A雷磁pH計(jì) 上海精密科學(xué)儀器有限公司;TMP-2電子天平、SopTop可見(jiàn)分光光度計(jì)、NDJ-8S數(shù)字式黏度計(jì) 上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司;TD24醫(yī)用離心機(jī) 長(zhǎng)沙平凡儀器儀表有限公司;電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;M-NJL07-3型實(shí)驗(yàn)用微波爐 北京中西遠(yuǎn)大科技有限公司;HH-2型數(shù)顯恒溫水浴鍋 金壇市富華儀器有限公司。

        1.3 方法

        1.3.1 黃秋葵果膠的提取

        除去黃秋葵果實(shí)中結(jié)蒂部位并切碎成小塊,置于干燥箱內(nèi)低溫烘干至恒質(zhì)量,粉碎過(guò)60 目篩,按1∶20(m/V)的料液比加入蒸餾水并攪拌均勻,并用一定濃度的HCl調(diào)節(jié)pH值至酸性范圍,在微波時(shí)間60 s、微波功率590 W、浸提時(shí)間30 min、浸提溫度74 ℃的條件下進(jìn)行微波輔助提取[7],然后4 000 r/min離心15 min,收集上層清液后,在不斷攪拌條件下加入等量無(wú)水乙醇,析出絮狀沉淀并靜置2 h,之后3 000 r/min離心15 min,收集果膠沉淀用無(wú)水乙醇洗滌2~3 次,然后于55 ℃干燥至恒質(zhì)量,即得黃秋葵果膠。

        1.3.2 黃秋葵果膠理化特性指標(biāo)的測(cè)定

        1.3.2.1 pH值的測(cè)定

        采用QB 2484—2000《食品添加劑 果膠》[8]中的方法,使用酸度計(jì)測(cè)定黃秋葵果膠的pH值。

        1.3.2.2 酯化度的測(cè)定

        采用梅新等[9]的方法測(cè)定黃秋葵果膠的酯化度:取0.2 g黃秋葵果膠粉末于稱(chēng)量瓶中,用少量乙醇潤(rùn)濕,加20 mL蒸餾水,于40 ℃條件下攪拌2 h至溶解,加1 滴酚酞,用0.1 mol/L的NaOH滴定,所用NaOH體積記為V1;之后,向該溶液中加入10 mL 0.1 mol/L的NaOH攪拌均勻,室溫條件下靜置2 h,再向溶液加入10 mL 0.1 mol/L的HCl,混勻后形成混合液,最后,用0.1 mol/L的NaOH進(jìn)行滴定,至滴定終點(diǎn)所消耗的NaOH體積記為V2。按照公式(1)計(jì)算黃秋葵果膠的酯化度。

        1.3.2.3 半乳糖醛酸含量的測(cè)定

        參照Yeoh等[10]的方法,采用咔唑比色法測(cè)定黃秋葵果膠中的半乳糖醛酸含量。

        標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:取D-(+)-半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)品10 mg,用蒸餾水定容至100 mL。移取上述溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL至25 mL具塞刻度試管中,加水稀釋至1 mL,得到一組梯度質(zhì)量濃度的半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)液,分別加入6.0 mL濃H2SO4,沸水浴20 min,冷卻至室溫,再分別加入0.2 mL 1.5 g/L的咔唑-乙醇溶液,搖勻。置于暗處30 min,取出測(cè)定其在526 nm波長(zhǎng)處的吸光度,用蒸餾水做空白實(shí)驗(yàn),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為Y=0.008 2X-0.014 8(R2=0.992 5)。

        黃秋葵果膠半乳糖醛酸含量的測(cè)定:配制一定質(zhì)量濃度的黃秋葵果膠溶液,定容至100 mL,取1 mL于具塞試管中,加入6 mL濃H2SO4,沸水浴20 min,冷卻至室溫,再加入0.2 mL 1.5 g/L的咔唑-乙醇溶液,搖勻。置于暗處30 min,取出測(cè)定反應(yīng)液在526 nm波長(zhǎng)處的吸光度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算黃秋葵果膠中的半乳糖醛酸含量。

        1.3.2.4 溶解度的測(cè)定

        取0.5 g黃秋葵果膠于100 mL的燒杯中,加入50 mL蒸餾水,用0.1 mol/L的HCl溶液調(diào)樣品溶液pH值至4,攪拌混勻,在40 ℃條件下保溫30 min后,4 200 r/min、25 ℃離心20 min,然后取上清液至恒質(zhì)量的鋁盒中,將其置于90 ℃的水浴鍋中蒸干后,在105 ℃條件下烘干至恒質(zhì)量,并按照公式(2)計(jì)算黃秋葵果膠的溶解度[11]。

        式中:m1為上清液烘干至恒質(zhì)量時(shí)的質(zhì)量/g;m2為樣品質(zhì)量/g。

        1.3.3 黃秋葵果膠熱穩(wěn)定性的研究

        將裝有0.5 g/100 mL黃秋葵果膠溶液的小燒杯密封后置于95 ℃的烘箱中,放置0、5、10、15、20、30、60 min后取出小燒杯,利用黏度計(jì)測(cè)其相對(duì)黏度,記錄數(shù)值并繪制熱穩(wěn)定曲線。同時(shí),采用0.5 g/100 mL的商品柑橘果膠溶液作為對(duì)照。

        1.3.4 影響黃秋葵果膠黏度因素的研究

        1.3.4.1 果膠質(zhì)量濃度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響

        配制1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 g/100 mL的黃秋葵果膠溶液和商品柑橘果膠溶液,分別測(cè)定其黏度,探討果膠質(zhì)量濃度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響。

        1.3.4.2 加熱溫度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響

        分別取質(zhì)量濃度為3.0 g/100 mL的黃秋葵果膠溶液和商品柑橘果膠溶液,經(jīng)過(guò)20、40、60、80、100 ℃處理20 min,分別測(cè)定其黏度,探討加熱溫度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響。

        1.3.4.3 pH值對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響

        分別取質(zhì)量濃度為3.0 g/100 mL的黃秋葵果膠溶液和商品柑橘果膠溶液,然后用1 mol/L的HCl溶液和1 mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)果膠溶液的pH值分別為2、4、6、8、10、12,分別測(cè)定其黏度,探討pH值對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響。

        1.3.4.4 蔗糖質(zhì)量濃度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響

        分別在質(zhì)量濃度為3.0 g/100 mL的黃秋葵果膠溶液和商品柑橘果膠溶液中加入不同量的蔗糖,使果膠溶液中的蔗糖質(zhì)量濃度分別為10、20、30、40、50、60 g/100 mL,分別測(cè)定其黏度,探討蔗糖質(zhì)量濃度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響。

        1.3.4.5 CaCl2質(zhì)量濃度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響

        分別取質(zhì)量濃度為3.0 g/100 mL的黃秋葵果膠溶液和商品柑橘果膠溶液,加入不同量的CaCl2,使果膠溶液中的CaCl2質(zhì)量濃度分別為10、20、30、40、50、60 g/100 mL,分別測(cè)定其黏度,探討CaCl2質(zhì)量濃度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響。

        1.4 數(shù)據(jù)處理

        采用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析;所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均為3 次平行實(shí)驗(yàn)的平均值。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 黃秋葵果膠的理化特性

        表1 黃秋葵果膠的理化特性Table1 Physicochemical properties of okra pectin

        由表1可知,黃秋葵果膠酯化度為75.45%,商品柑橘果膠酯化度為65.91%,均屬于高酯果膠[12]。黃秋葵果膠的pH值為4.63,商品柑橘果膠pH值為2.65,兩者均屬于酸性果膠,但黃秋葵果膠不在高酯果膠的最穩(wěn)定pH值范圍內(nèi),當(dāng)pH值降低時(shí),COO-數(shù)目減少,果膠分子相互間排斥力減小,果膠黏度會(huì)隨之增大。黃秋葵果膠的溶解度為82%,總半乳糖醛酸含量為86.68%,均高于商品柑橘果膠,且總半乳糖醛酸含量符合QB 2484—2000中的要求;由此可見(jiàn),黃秋葵果膠是一種溶解性好、純度高的優(yōu)質(zhì)果膠。

        2.2 黃秋葵果膠的熱穩(wěn)定性

        圖1 95 ℃條件下處理不同時(shí)間對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響Fig.1 Effect of heating time on the viscosity of pectin at 95 ℃

        由圖1可知,在熱處理階段的前期,黃秋葵果膠和商品柑橘果膠在高溫下發(fā)生鏈解聚,果膠分子鏈的交聯(lián)作用不斷被破壞,使果膠分子間的分散度增加,從而使果膠黏度迅速下降;之后,當(dāng)熱處理時(shí)間超過(guò)20 min時(shí),熱力作用對(duì)果膠鏈的分子結(jié)構(gòu)破壞達(dá)到最大,果膠黏度的下降趨勢(shì)開(kāi)始變緩[13]。但在整個(gè)熱處理過(guò)程中,黃秋葵果膠的黏度及熱穩(wěn)定性能均優(yōu)于商品柑橘果膠,這表明黃秋葵果膠是一種熱穩(wěn)定性良好的優(yōu)質(zhì)果膠。

        2.3 影響黃秋葵果膠黏度的因素

        2.3.1 果膠質(zhì)量濃度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響

        圖2 果膠質(zhì)量濃度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響Fig.2 Effect of pectin concentration on its viscosity

        由圖2可知,兩種果膠的黏度均隨果膠質(zhì)量濃度的增大而增大。這可能是因?yàn)楣z質(zhì)量濃度越大,其活化能越大,導(dǎo)致果膠流動(dòng)的阻力增加,流動(dòng)性變?nèi)?,從而使黏度增加[14];同時(shí),果膠屬于長(zhǎng)鏈大分子物質(zhì),分子間作用力較強(qiáng),當(dāng)果膠質(zhì)量濃度增大后,分子間的氫鍵和疏水作用發(fā)生機(jī)率變大,使果膠整體更易形成結(jié)構(gòu)復(fù)雜的聚合物而導(dǎo)致果膠黏度上升[13,15]。

        2.3.2 加熱溫度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響

        由圖3可知,黃秋葵果膠和商品柑橘果膠的黏度均隨著加熱溫度的升高呈下降趨勢(shì);而在30~60 ℃時(shí),黏度下降較快,此后加熱溫度對(duì)黏度的影響減弱,果膠黏度下降趨勢(shì)趨于平緩。其原因可能在于溫度的升高增加了果膠分子鏈的柔順程度,流動(dòng)性得以增強(qiáng),或者果膠分子間的交聯(lián)作用減弱,從而使果膠黏度下降[16]。此外,在相同加熱溫度下,黃秋葵果膠的黏度均高于商品柑橘果膠的黏度。

        圖3 加熱溫度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響Fig.3 Effect of temperature on the viscosity of pectin

        2.3.3 pH值對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響

        圖4 pH值對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響Fig.4 Effect of pH on the viscosity of pectin

        果膠分子在水溶液中帶正電荷,其分子間的斥力使果膠分子伸展而分散于水中,形成較穩(wěn)定的構(gòu)象;當(dāng)改變果膠溶液的pH值時(shí),容易破壞這種穩(wěn)定的構(gòu)象而影響果膠溶液的黏度[17]。由圖4可知,pH值對(duì)兩種果膠黏度的影響較大。在所測(cè)pH值范圍內(nèi),黃秋葵果膠的黏度隨pH值的增大先上升后下降,這主要是因?yàn)辄S秋葵果膠為高酯果膠,在pH 2.5~4.5范圍內(nèi)高酯果膠較穩(wěn)定,并且隨著pH值的增加,分子間氫鍵的結(jié)合增強(qiáng),果膠分子伸展程度增加,使得溶液黏度增大;當(dāng)pH值為4.0~6.0時(shí),高酯果膠的半乳糖醛酸主鏈隨著糖苷鍵的酯化羧基的斷裂而裂解,或者溶液中OH-與果膠分子相互吸引,使果膠分子形態(tài)發(fā)生改變,從而兩者的黏度隨pH值的增加迅速下降[11],而商品柑橘果膠呈一直下降的趨勢(shì),主要與果膠自身的分子結(jié)構(gòu)在強(qiáng)堿溶液中被破壞有關(guān)。

        2.3.4 蔗糖質(zhì)量濃度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響

        圖5 蔗糖質(zhì)量濃度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響Fig.5 Effect of sucrose concentration on the viscosity of pectin

        黃秋葵果膠是一種高酯果膠,決定高酯果膠性質(zhì)的最重要因素是酯化度,而蔗糖質(zhì)量濃度影響著果膠凝固速率。由圖5可知,加入蔗糖時(shí),黃秋葵果膠和商品柑橘果膠的黏度均隨蔗糖質(zhì)量濃度的增加而升高。這是因?yàn)檎崽欠肿訛槎嗔u基結(jié)構(gòu),具有強(qiáng)親水性,其競(jìng)爭(zhēng)作用使果膠的水合作用降低,導(dǎo)致果膠分子脫水結(jié)合,加劇了果膠分子間的相互作用,使果膠黏度增大[13,18];并且果膠分子中含有疏水基團(tuán)甲氧基,也能促進(jìn)果膠分子間的脫水作用,使蔗糖與果膠分子間通過(guò)氫鍵結(jié)合,從而導(dǎo)致果膠黏度增大[19]。

        2.3.5 CaCl2質(zhì)量濃度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響

        圖6 CaaCl2質(zhì)量濃度對(duì)黃秋葵果膠黏度的影響Fig.6 Effect of calcium chloride concentration on the viscosity of pectin

        Ca2+在高酯果膠膠凝過(guò)程中能發(fā)揮一定作用,特別在酯基以嵌段形式分布在果膠分子中留下大段游離酸性基團(tuán)時(shí),Ca2+與果膠鏈之間產(chǎn)生交聯(lián)作用形成果膠凝膠。由圖6可知,黃秋葵果膠和商品柑橘果膠的黏度隨CaCl2質(zhì)量濃度的增加均呈先升后降的趨勢(shì);黃秋葵果膠和商品柑橘果膠對(duì)CaCl2質(zhì)量濃度的敏感程度差異較大,其黏度達(dá)最大時(shí)CaCl2質(zhì)量濃度分別為20、50 g/100 mL,CaCl2質(zhì)量濃度對(duì)商品柑橘果膠的黏度影響更大。這是由于Ca2+正電荷能與果膠羧基結(jié)合形成網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),產(chǎn)生橋聯(lián)作用,有利于果膠分子的有序結(jié)合,使黏度增加[13];但Ca2+質(zhì)量濃度過(guò)高時(shí),反而會(huì)破壞果膠分子鏈間的相互作用而發(fā)生不規(guī)則排序,從而導(dǎo)致果膠黏度下降[20]。

        3 結(jié) 論

        黃秋葵果膠的總半乳糖醛酸含量為86.68%,符合QB 2484—2000對(duì)商品果膠的要求,其酯化度為75.45%,溶解度為82%,pH 4.63,屬于弱酸性高酯果膠;黃秋葵果膠的黏度隨加熱時(shí)間的延長(zhǎng)而下降,但其熱穩(wěn)定性?xún)?yōu)于商品柑橘果膠;黃秋葵果膠的黏度與其質(zhì)量濃度、蔗糖質(zhì)量濃度均成正相關(guān),與加熱溫度成負(fù)相關(guān),而隨pH值、CaCl2質(zhì)量濃度的增大先上升后下降,表現(xiàn)出一般果膠的黏度特性。黃秋葵果膠的黏度及熱穩(wěn)定性能優(yōu)于商品柑橘果膠,是一種優(yōu)質(zhì)果膠,具有較好的應(yīng)用前景。

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        Physicochemical Properties of Okra Pectin

        LI Jiaxing1, SHI Chuncheng1, MA Lang2, WU Yue2, XIAO Xiufeng2, ZHOU Yanhui2
        (1. College of Chemistry and Chemical Engineering, Jishou University, Jishou 416000, China; 2. Hunan Amazing Grace Biotechnology Co. Ltd., Changsha 410008, China)

        Using commercial citrus pectin as control for comparison, the physicochemical properties of okra pectin and the impact of pectin concentration, temperature, pH, sucrose concentration, calcium chloride concentration and other factors on the viscosity of okra pectin were studied. The results showed that the total galacturonic acid of okra pectin was 86.68%, esterification degree was 75.45%, solubility was 82%, and pH was 4.63. It was a weakly acidic and high methoxyl pectin. Its viscosity gradually decreased with increasing heating time, but its heat stability was better than that of commercial citrus pectin. The viscosity of okra pectin was positively correlated with its concentration and sucrose concentration but negatively correlated with temperature, displayed an initial increase and a subsequent decrease with increasing pH and calcium chloride concentration, and showed the general viscosity properties of pectin. The viscosity and heat stability of okra pectin were superior to those of commercial citrus pectin, and thus it was a kind of pectin with high quality.

        okra; pectin; viscosity; physicochemical property

        TS202.3

        A

        10.7506/spkx1002-6630-201517020

        2015-04-09

        2015年湖南省農(nóng)業(yè)領(lǐng)域重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2015NK3018)

        李加興(1969—),男,教授,博士,主要從事植物資源開(kāi)發(fā)利用與功能性食品研究。E-mail:jslijiaxing@sohu.com

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