摘要：根據(jù)相關(guān)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，黃曲霉素是一種具有很強(qiáng)毒性的物質(zhì)，一般在糧食、食用油中存在，具有引發(fā)癌癥的特性。因此，在生產(chǎn)過(guò)程中，必須對(duì)糧油食品中黃曲霉素的檢測(cè)給以高度重視，以保證人們?nèi)粘Ｉ畹氖秤冒踩苊獍┌Y患者不斷增多。本文就糧油食品中黃曲霉素的幾種常用檢測(cè)方法進(jìn)行闡述和對(duì)比，以為提高糧油食品中黃曲霉素檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性提供可參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：糧油食品;黃曲霉素;檢測(cè)方法

目前，糧油食品中黃曲霉素的檢測(cè)方法主要包括高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫法、免疫膠體金檢測(cè)法和免疫親和柱和熒光光度法等四種，根據(jù)實(shí)際情況選擇最合適的檢測(cè)方法，可以大大提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，從而提高糧油食品食用的安全性。

一、高效液相色譜法分析

在相關(guān)資料中，高效液相色譜法也被叫做是“高速液相色譜”、“高壓液相色譜”、“近代柱色譜”和“高分離度液相色譜”等，一般采用液體的方式進(jìn)行檢測(cè)。在高壓系統(tǒng)中安裝有不同極性的單一或者混合的容積所對(duì)應(yīng)的色譜柱，在液體被輸入系統(tǒng)后，各種成分會(huì)被分離開(kāi)，從而在各種檢測(cè)器中進(jìn)行相應(yīng)的檢測(cè)，以對(duì)試樣進(jìn)行全面分析。

在實(shí)踐過(guò)程中采用高效液相色譜法，可以快速、定性的進(jìn)行黃曲霉素的檢測(cè)，并且檢測(cè)下限較低，大大提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。一般情況下，20分鐘可以完成黃曲霉素的檢測(cè)，并將相關(guān)的毒素分離出來(lái)，檢測(cè)下限可以達(dá)到每千克0.5μg，與國(guó)家提出的糧食、油等食品中黃曲霉素的含量相比，濃度低很多。但是，高效液相色譜法使用的相關(guān)設(shè)備儀器成本較高，對(duì)樣品的要求也比較高，事先處理的相關(guān)操作比較繁瑣，如果采用免疫親和小柱進(jìn)行處理，則會(huì)大大提高檢測(cè)成本。因此，采用高效液相色譜法進(jìn)行黃曲霉素的檢測(cè)，在基層部門中無(wú)法進(jìn)行推廣，只適用于國(guó)家或省級(jí)的相關(guān)檢測(cè)機(jī)構(gòu)中。

二、酶聯(lián)免疫法分析

一般情況下，酶聯(lián)免疫法也被叫做是酶聯(lián)免疫吸附法，通過(guò)將可溶性抗原或抗體吸附到聚苯乙烯等固態(tài)物質(zhì)上的方式，對(duì)免疫反應(yīng)進(jìn)行定性和定量檢測(cè)，以保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性。根據(jù)酶、免疫和生化計(jì)數(shù)的相關(guān)知識(shí)，對(duì)黃曲霉素的檢測(cè)進(jìn)行全面分析，并靈活運(yùn)用固態(tài)酶聯(lián)免疫吸附的相關(guān)原理，在聚苯乙烯微量反應(yīng)板的空穴中放入AFTB1特異性抗體，同時(shí)將樣品提取液（未知抗原）和酶標(biāo) AFTB1 抗原（已知抗原）放入其中，讓他們與抗體進(jìn)行強(qiáng)烈的免疫競(jìng)爭(zhēng)方反應(yīng)。待上述操作完成后，加入酶底物進(jìn)行顯色，并根據(jù)顏色的深淺情況，對(duì)抗體和酶標(biāo)AFTB1抗原結(jié)合的量進(jìn)行判斷，如果樣品中的AFTB1較多，那么被抗原結(jié)合的酶標(biāo)AFTB1抗原則很少，即呈現(xiàn)淺色狀態(tài);如果樣品中的AFTB1較少，那么被抗原結(jié)合的酶標(biāo)AFTB1抗原則很多，即呈現(xiàn)深色狀態(tài)。

在實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中，使用酶聯(lián)免疫法進(jìn)行黃曲霉素的檢測(cè)，具有毒性小、檢測(cè)速度較快等特點(diǎn)，但試劑的使用壽命較短，并且重復(fù)性不強(qiáng)，必須在溫度較低的情況下才能進(jìn)行保存。因此，酶聯(lián)免疫法檢測(cè)結(jié)果中，假陽(yáng)性概率比較高，為了保證檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)性和可靠性，必須配置專門的酶標(biāo)儀。與此同時(shí)，酶聯(lián)免疫法在進(jìn)行基層檢測(cè)時(shí)，具有較高的暗度，對(duì)樣品提出了較高要求，因此，在進(jìn)行脂肪量和含鹽量較高的樣品時(shí)，要事先進(jìn)行相關(guān)處理后才能按照上述流程進(jìn)行檢測(cè)。在實(shí)踐過(guò)程中，酶聯(lián)免疫法一般可以先進(jìn)行初篩，在陰性狀態(tài)下則可去除，在陽(yáng)性狀態(tài)下則可繼續(xù)下一步檢測(cè)。

三、免疫膠體金檢測(cè)法分析

在相關(guān)檢測(cè)中，免疫膠體金檢測(cè)法也被叫做金標(biāo)免疫層析法，通過(guò)在抗原以內(nèi)將膠體金看作是示蹤標(biāo)志的方式，可以了解黃曲霉素的分布情況，從而對(duì)樣品中黃曲霉素的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行全面分析。一般膠體金是還原劑的作用下，氯金酸通過(guò)聚合的方式形成的具有一定大小的金顆粒，同時(shí)在靜電作用下，這種金顆粒可以保持比較穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，從而稱作是膠體金。在檢測(cè)過(guò)程中，堿性情況下膠體金會(huì)帶負(fù)電荷，從而與蛋白質(zhì)分子中的正電荷基團(tuán)會(huì)緊密結(jié)合在一起。與此同時(shí)，作為特定的免疫反應(yīng)標(biāo)記物，可以將反應(yīng)物的定位和分布情況在電鏡下清晰顯示出來(lái)，以便于進(jìn)行有效分析。例如：通過(guò)還原法使用檸檬酸三鈉進(jìn)行膠體金顆粒的制作，并將抗黃曲霉素其中一個(gè)素標(biāo)記出來(lái)，同時(shí)在玻璃纖維上噴灑其單克隆抗體，這種素的偶聯(lián)抗原和二抗鼠抗驢會(huì)分別在硝酸纖維膜上結(jié)合。最后通過(guò)切割的方式，將樣本墊、膠金墊、硝酸纖維膜、吸水紙組裝切成膠體金試紙，并放入到檢測(cè)卡中進(jìn)行檢測(cè)。

在實(shí)踐過(guò)程中，這種檢測(cè)方法所需要的時(shí)間比較短，操作比較簡(jiǎn)單、方便和快捷，可用于單份樣品的檢測(cè)，具有非常高的檢測(cè)效率，從而在現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)中應(yīng)用較多。但是，通常是通過(guò)半定量的方式進(jìn)行檢測(cè)，作為一種快速篩查的方法。

四、免疫親和柱和熒光光度法分析

由于免疫親和柱具有較強(qiáng)的免疫反應(yīng)活性、熒光光度計(jì)具有較高的檢測(cè)靈敏度，因此，將兩者結(jié)合在一起，可以形成一種新的監(jiān)測(cè)技術(shù)，成為了檢測(cè)糧油食品中黃曲霉素的一種國(guó)標(biāo)方法。在實(shí)際操作過(guò)程中，通過(guò)采用經(jīng)過(guò)濾、水稀釋和用含有黃曲霉素其中一種的抗體的免疫親和柱進(jìn)行凈化后的甲醇與水的溶液進(jìn)行提取，其中，甲醇和水的比例為七比三，在經(jīng)過(guò)甲醇的洗滌和脫水后，在添加

溴溶液進(jìn)行行衍生，可以有效提高檢測(cè)靈敏度，從而提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

采用這種方法進(jìn)行黃曲霉素的檢測(cè)，與色譜法相比，準(zhǔn)確性更高，操作更簡(jiǎn)單、方便和快捷，并且不會(huì)出現(xiàn)安全事故，在不需要進(jìn)行毒素標(biāo)樣、毒氣柜和不與黃霉曲素直接接觸的情況下，有機(jī)試劑的用量也比較少，從而節(jié)省檢測(cè)時(shí)間。但是，這種方法只適合于檢測(cè)黃曲霉素的總量，不能用于單獨(dú)檢測(cè)中，對(duì)水和試劑都有較高的要求，必須在高純水和重蒸水情況下，才能保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

結(jié)束語(yǔ)：

綜上所述，在實(shí)踐過(guò)程中，糧油食品中黃曲霉素的檢測(cè)，需要根據(jù)不同級(jí)別、不同機(jī)構(gòu)性質(zhì)來(lái)選擇合適的檢測(cè)方法，才能滿足上述各種方法的檢測(cè)特點(diǎn)，從而保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性，使檢測(cè)銷量和檢測(cè)率得到不斷提高，最終提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，確保食品食用過(guò)程的安全。

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