張趁英，李家樹，吳興萍

（連云港市第一人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，江蘇 連云港 222002）

肺癌起病隱匿，早期癥狀不明顯，惡性程度高，是目前全球發(fā)病率和病死率最高的惡性腫瘤，且呈持續(xù)上升趨勢［1］，而作為輔助診斷的重要手段之一，腫瘤標(biāo)志物自20 世紀(jì)60 年代被陸續(xù)發(fā)現(xiàn)以來研究十分活躍［2］。臨床纖維支氣管鏡檢查是確診肺癌的重要方法，除了常規(guī)的活檢、刷檢外，支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中腫瘤標(biāo)志物的檢測也可協(xié)助臨床提高對肺癌的診斷價值。本研究通過檢測血清和BALF 中癌胚抗原（CEA）、細(xì)胞角質(zhì)蛋白片段21-1（CYFRA21-1）和組織多肽特異性抗原（TPS）的水平，旨在探討其在肺癌診斷中的臨床價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2013 年2 月至2014 年1 月在連云港市第一人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科住院的肺癌患者47 例，均經(jīng)病理組織學(xué)證實(shí)。其中男27 例，女20 例，年齡56～75（63.31±5.28）歲；鱗癌10 例，腺癌22 例，小細(xì)胞癌15 例。

1.2 方法

血清標(biāo)本采集：47 例患者空腹抽取肘靜脈血3～4 mL，1 500 r·min-1離心5 min，取血清，放置—20 ℃冰箱保存，待測。

BALF 采集：采用日本Pentax 公司生產(chǎn)的FB—15V 纖維支氣管鏡，按纖維支氣管鏡檢查常規(guī)進(jìn)行術(shù)前準(zhǔn)備。采用1%利多卡因5 mL 霧化面罩行咽喉部黏膜表面浸潤性麻醉，經(jīng)鼻插入纖維支氣管鏡，檢查左右支氣管。吸凈分泌物后，先檢查健側(cè)，后將纖維支氣管鏡的末端置于病變所在的段或亞段支氣管開口處，如病變完全或不完全阻塞支氣管開口，則嵌入最鄰近病灶的上端或支氣管開口處進(jìn)行沖洗，將特制的肺泡灌洗瓶分別接在纖維支氣管鏡及負(fù)壓吸引管上端，取37 ℃滅菌的0.9%氯化鈉注射液20 mL，分4 次注入，每次注入后停留30～60 s，以6.67～8.00 kPa 負(fù)壓吸出BALF 60 mL，置入無菌容器內(nèi)，3 000 r·min-1離心5 min，取上清液，放置—20 ℃冰箱保存，待測。

檢測方法：使用美國羅氏公司生產(chǎn)的Elecsys2010電化學(xué)發(fā)光儀、采用電化學(xué)發(fā)光法檢測血清和BALF中CEA、CYFRA21-1 水平，試劑盒購自美國羅氏公司；采用雙抗體夾心法（ELISA 法）檢測血清和BALF 中TPS 水平，試劑盒購自瑞典IDL 公司。以上具體操作步驟見試劑盒說明書。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

47 例患者BALF 中CEA、CYFRA21-1 和TPS水平均明顯高于血清（均P＜0.01），見表1。

表1 47 例患者血清、BALF 中CEA、CYFRA21-1和TPS 水平的比較

表1 47 例患者血清、BALF 中CEA、CYFRA21-1和TPS 水平的比較

*P＜0.01 與血清組比較。

3 討論

肺癌是臨床上常見的惡性腫瘤之一，目前纖維支氣管鏡在臨床廣泛應(yīng)用，使肺癌的診斷率有了很大的提高。支氣管肺泡上皮發(fā)生惡變時，可以產(chǎn)生并釋放出腫瘤標(biāo)志物。隨著科技進(jìn)步，對腫瘤標(biāo)志物的研究水平不斷提高，人們發(fā)現(xiàn)肺癌患者血清腫瘤標(biāo)志物的濃度低、敏感性差［3］，而BALF 直接取自病變局部支氣管肺泡內(nèi)，因此通過纖維支氣管鏡肺泡灌洗技術(shù)從腫瘤病變部位獲取標(biāo)本檢測腫瘤標(biāo)志物比血中出現(xiàn)早、濃度高［4］，尤其是將這一檢測技術(shù)與纖維支氣管鏡檢查相結(jié)合，其敏感性、含量高于血清學(xué)檢測，在肺癌早期診斷中具有重要的臨床價值［5-6］。

CEA 基因編碼于19 號染色體上，是相對分子質(zhì)量150 000～300 000 的糖蛋白，為胚胎性致癌抗原，在多種腫瘤中均可升高；肺癌細(xì)胞在進(jìn)行代謝分泌時，CEA 易在病灶處聚積，且由該部位向血液循環(huán)中釋放，故BALF 中的含量異常升高較血中出現(xiàn)早而顯著［7-8］。CYFRA21-1 由細(xì)胞角蛋白19 片段的2 個單克隆抗體組成，即單抗BMl9-21 和KSl9.1，主要分布于肺、胸腺上皮，由癌變的上皮釋放入血，與肺癌的發(fā)生發(fā)展分化及轉(zhuǎn)移有關(guān)［7］。TPS 是細(xì)胞角蛋白18 片段上與M3 單克隆抗體結(jié)合的抗原表位，與傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)志物（如CEA、CA153 和CA125等）不同的是，TPS 是腫瘤活性依賴型的，它的血清含量的高低與正在分裂、增殖的細(xì)胞數(shù)目有關(guān)，即與腫瘤的活性有關(guān)；CEA、CA153 和CA125 等則是腫瘤容量依賴型的，與腫瘤的瘤體負(fù)荷即腫瘤細(xì)胞的數(shù)目有關(guān)，因此在腫瘤的早期，在出現(xiàn)肉眼復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移之前，由于腫瘤細(xì)胞數(shù)目較少，那些反映腫瘤容量的標(biāo)志物的血清水平往往是很低的，而此時腫瘤細(xì)胞分裂、增殖活躍，因而TPS 可以很高，從而有利于腫瘤的早期診斷、治療、病情監(jiān)測和預(yù)后判斷［9］。

本研究結(jié)果顯示，47 例患者BALF 中CEA、CYFRA21-1 和TPS 水平均明顯高于血清（均P＜0.01），考慮BALF 中腫瘤標(biāo)志物高濃度可能來源于肺癌局部的產(chǎn)生及細(xì)胞分泌的代謝產(chǎn)物，經(jīng)沖洗從細(xì)胞表面直接脫落，尚未經(jīng)過機(jī)體代謝、吸收和釋放就直接收集，所以比血清濃度高，表明檢測BALF 中腫瘤標(biāo)志物對肺癌的診斷更有意義。

［1］Jemal A，Siegel R，Ward E，et al.Cancer statistics，2009［J］.CA Cancer J Clin，2009，59（4）：225-249.

［2］Schneider J.Early detection of lung cancers-Comparison of computed tomography，cytology and fuzzy-based tumor markers panels［J］.Cancer Biomark，2010，6（3/4）：149-162.

［3］林稱意.肺泡灌洗液和血清中腫瘤標(biāo)志物檢測在肺癌診斷中的價值［J］.臨床肺科雜志，2014，19（4）：712-714.

［4］吳金如，鄭玉蘭.支氣管肺泡灌洗液中腫瘤相關(guān)物質(zhì)群和鐵蛋白的早期診斷價值［J］.中國呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志，2014，13（1）：82-83.

［5］孟曉燕，趙杰，賈曉民，等.肺泡灌洗液中Survivin、CYF RA21-1、NSE 和CEA 在肺癌中診斷價值［J］.臨床肺科雜志，2012，17（9）：1661-1663.

［6］Cao C，Chen Z B，Sun S F，et al.Evaluation of VEGF-C and tumor markers in bronchoalveolar lavage fluid for lung cancer diagnosis［J］.Sci Rep，2013，3：3473.

［7］Ghosh I，Bhattacharjee D，Das A K，et al.Diagnostic role of tumour markers CEA，CA15-3，CA19-9 and CA125 in lung cancer［J］.Indian J Clin Biochem，2013，28（1）：24-29.

［8］郝素華，郝琳，楊衛(wèi)華，等.血清CEA、CA19-9、SCC-Ag、NSE、CYFRA21-1 和ProGRP 在肺癌診斷中的價值［J］.中國腫瘤，2012，21（11）：852-855.

［9］王敬慧，時廣利，張樹才，等.血清TPS、CEA、Pro-GRP和CYFRA21-1 水平在肺癌患者中的臨床意義［J］.中國肺癌雜志，2010，13（5）：500-505.