李高偉 蘇曉娜 王 閣

第三軍醫(yī)大學(xué)第三附屬醫(yī)院腫瘤中心 重慶 400042

腦膠質(zhì)瘤為起源于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的，發(fā)病率較高的顱內(nèi)腫瘤［1-2］。本病隨著膠質(zhì)瘤分級(jí)及生長(zhǎng)部位不同，其疾病程度嚴(yán)重也不同［3］。目前雖然臨床已有大量的研究顯示，在腦膠質(zhì)瘤接受手術(shù)治療后給予放化療治療對(duì)于改善患者的預(yù)后有極為重要的作用［4-5］，但對(duì)于手術(shù)放化療改善患者預(yù)后的作用機(jī)制仍不明確。本文通過對(duì)接受腦膠質(zhì)瘤患者進(jìn)行體外研究，分析聯(lián)合X線輻射及TMZ化療干預(yù)后腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)情況，現(xiàn)介紹如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本采集 將51例我院于2012-12—2014-08經(jīng)病理學(xué)檢查明確診斷為腦膠質(zhì)瘤的手術(shù)標(biāo)本作為觀察對(duì)象。將所有標(biāo)本根據(jù)腦膠質(zhì)瘤分級(jí)分為低級(jí)別組及高級(jí)別組。其中低級(jí)別組標(biāo)本22例，腦膠質(zhì)瘤分級(jí)為Ⅰ～Ⅱ級(jí)；高級(jí)別組標(biāo)本29例，腦膠質(zhì)瘤分級(jí)為Ⅲ～Ⅳ級(jí)。所有入選標(biāo)本患者在入組前均未接受放化療治療。

1.2 標(biāo)本干預(yù)方法 所有標(biāo)本均需接受X線輻射及TMZ化療治療。X線輻射吸收劑量給予6Gy，按200cGy／min為吸收率。輻射結(jié)束后給予TMZ化療處理，即給予半數(shù)抑制濃度的藥物計(jì)量對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理。

1.3 標(biāo)本干細(xì)胞標(biāo)志物檢測(cè)方法及觀察方法 取得標(biāo)本后立即進(jìn)行血清培養(yǎng)及非血清培養(yǎng)，于標(biāo)本在顯微鏡下可見到有球形生長(zhǎng)且可經(jīng)輕微震蕩后出現(xiàn)明顯晃動(dòng)時(shí)進(jìn)行離心，并洗滌細(xì)胞，以作備用。將每個(gè)標(biāo)本經(jīng)培養(yǎng)及洗滌后的細(xì)胞均分為A及B兩份，其中A份立即進(jìn)行CD133及ABCG2的表達(dá)情況檢測(cè)，作為干預(yù)前檢測(cè)所用標(biāo)本，B份立即給予X線輻射及TMZ化療干預(yù)，作為干預(yù)后檢測(cè)所用標(biāo)本。CD133及ABCG2的表達(dá)情況檢測(cè)均應(yīng)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行，計(jì)算每組干預(yù)前后CD133及ABCG2的陽(yáng)性表達(dá)情況，并進(jìn)行對(duì)比。同時(shí)對(duì)治療前后CD133及ABCG2的陽(yáng)性表達(dá)改善情況與標(biāo)本惡性程度的相關(guān)性進(jìn)行分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 以SPSS 19.0作為統(tǒng)計(jì)分析軟件，計(jì)數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗(yàn)，分別應(yīng)用χ2檢驗(yàn)及直線相關(guān)分析進(jìn)行檢測(cè)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 干預(yù)前后CD133及ABCG2的陽(yáng)性表達(dá)情況比較 2組間CD133及ABCG2的表達(dá)均存在顯著的差異，高級(jí)別組表達(dá)程度均明顯高于低級(jí)別組（P＜0.05）；2組在接受聯(lián)合X線輻射及TMZ化療干預(yù)后，CD133及ABCG2均明顯改善，以低級(jí)別組改善更為明顯（P＜0.05）。見表1。

表1 干預(yù)前后CD133及ABCG2的陽(yáng)性表達(dá)情況比較 ［n（%）］

2.2 CD133及ABCG2陽(yáng)性表達(dá)改善情況與惡性程度相關(guān)性分析 治療前后CD133及ABCG2改善度與細(xì)胞惡性程度存在負(fù)向直線相關(guān)性（P＜0.05），見表2。

表2 CD133及ABCG2陽(yáng)性表達(dá)改善情況與惡性程度相關(guān)性分析

3 討論

目前，隨著臨床對(duì)于腦膠質(zhì)瘤研究的深入，已有大量的研究顯示，在患有腦膠質(zhì)瘤的患者中，患者的預(yù)后與腫瘤分級(jí)、分期，治療并發(fā)癥及手術(shù)切除程度均存在密切相關(guān)性［6-7］。同時(shí)，臨床通過對(duì)比研究也證實(shí)，在患有腦膠質(zhì)瘤患者的治療中，以手術(shù)后聯(lián)合放療化療治療的有效率最高［8-9］。為深入了解腦膠質(zhì)瘤患者在行手術(shù)治療后聯(lián)合接受放化療對(duì)患者預(yù)后的改善作用，本文將我院近年來所收治的行手術(shù)治療的腦膠質(zhì)瘤患者作為觀察對(duì)象，將手術(shù)所得的病理標(biāo)本作為觀察標(biāo)本，通過干細(xì)胞標(biāo)志物的陽(yáng)性表達(dá)程度來分析其預(yù)后改善的作用機(jī)制。

本研究選取了在惡性腫瘤干細(xì)胞中與細(xì)胞惡性程度有著密切相關(guān)性的CD133及ABCG2作為觀察指標(biāo)［10］，以期可以更好的對(duì)臨床作用機(jī)制進(jìn)行分析。其中CD133是為相對(duì)分子量較大的跨膜蛋白之一，是臨床具有極高評(píng)估作用的膠質(zhì)瘤細(xì)胞干細(xì)胞標(biāo)志物。而ABCG2為首先于乳腺癌細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)的干細(xì)胞標(biāo)志物，其屬ABC基因族，為該基因族中最為重要的一個(gè)標(biāo)志物。同時(shí)近年來研究顯示，在膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中其含量的升高對(duì)于患者的耐藥性有一定相關(guān)性。本文將兩者作為觀察指標(biāo)，以提高研究的準(zhǔn)確性。本研究首先對(duì)不同惡性程度的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本間CD133及ABCG2的差異進(jìn)行比較顯示，2組間CD133及ABCG2的表達(dá)均存在顯著的差異，高級(jí)別組表達(dá)程度均明顯高于低級(jí)別組，可見CD133及ABCG2對(duì)于評(píng)價(jià)腦膠質(zhì)瘤惡性程度同樣有顯著意義。而進(jìn)一步即對(duì)聯(lián)合X線及TMZ化療干預(yù)的作用價(jià)值進(jìn)行分析顯示，在接受干預(yù)后，CD133及ABCG2均明顯改善，以低級(jí)別組改善更為明顯?？梢娫诓煌瑦盒猿潭鹊幕颊咧校m然聯(lián)合兩種干預(yù)方式均可達(dá)到有效的改善CD133及ABCG2的效果，但是以臨床惡性程度輕者其改善更為明顯。為進(jìn)一步對(duì)CD133及ABCG2改善程度與腫瘤細(xì)胞惡性程度間的關(guān)系進(jìn)行探討，本文對(duì)CD133及ABCG2改善程度與腫瘤細(xì)胞惡性程度進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，治療前后CD133及ABCG2改善度與細(xì)胞惡性程度存在負(fù)向直線相關(guān)性。

綜上所述，不同惡性程度的膠質(zhì)瘤細(xì)胞中CD133及ABCG2的表達(dá)存在顯著差異。聯(lián)合X線輻射及TMZ化療可有效改善CD133及ABCG2表達(dá)，且與細(xì)胞惡性程度存在負(fù)向直線相關(guān)性。

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