劉新興,李建穎,趙彥巧,王凱
(天津商業(yè)大學生物技術與食品科學學院,天津市食品生物技術重點實驗室,天津300134)
青稞(HordeumvulgareL.var.nudumHook.f.),是大麥的一種,又稱裸大麥、元麥[1],在西藏、青海等省份廣為種植,是藏民最為重要的糧食產物[2]。在糧食作物中,青稞具有高蛋白質、高纖維、高維生素、低脂肪、低糖等特點。淀粉平均含量為59.25%,蛋白質含量平均值為11.31%,β-葡聚糖平均含量為5%,遠高于其他谷類作物,粗脂肪平均含量為2.13%,此外還含有豐富的水分,纖維和微量元素[3]。
隨著人們對青稞中β-葡聚糖的深入研究,對其保健功能認識程度的加深,及其在預防糖尿病、高血壓、肝病、心血管等疾病方面所具有的奇特功效[4],青稞的保健制品更加激起了人們開發(fā)和研究的興趣。而青稞中含量最高的淀粉卻很少進入人們的視線。實際上與其他谷類作物相比,青稞淀粉成分非常獨特。青裸中平均含有55.25%的淀粉,其中普遍含有74%~78%的支鏈淀粉,近年西藏自治區(qū)農牧科學院培育的新品種青稞25支鏈淀粉達到或接近100%[5]。支鏈淀粉含大量凝膠黏液,加熱后呈弱堿性,對胃酸過多有抑制作用,在醫(yī)學上有著重要應用。同時還可作為優(yōu)良的增稠劑、乳化劑、黏著劑、懸浮劑而廣泛的用于食品、造紙、紡織和黏著劑工業(yè)[6-7]。本實驗利用NaOH對青稞面粉中的淀粉進行提取,同時通過單因素和正交試驗優(yōu)化設計來獲得最佳的提取工藝,為提高青稞淀粉的附加值及對直鏈、支鏈淀粉的分離打下良好的基礎。
短芒黑青稞粉:香格里拉縣購得;氫氧化鈉:天津市德恩化學試劑有限公司提供;碘化鉀,鹽酸,乙醇,其他試劑均為分析純。
DL-6000B低速冷凍大容量離心機:上海安亭科學儀器廠;AUY220分析天平:日本島津制作所;DZF-6050B真空干燥箱:上海一恒科技有限公司;PHS-3B酸度計:上海精密科學儀器有限公司;FWLOO高速粉碎機:天津市特斯特儀器有限公司。
1.3.1 淀粉的提取
取一定量青稞粒,用高速粉碎機粉碎后制成原料青稞粉,過100目篩,按1∶5(g/mL)的固液比添加質量濃度為0.4%的NaOH溶液,攪拌,浸泡一定時間后(2 h),用鹽酸溶液滴定至中性(此時混合物呈淡粉色),再用離心機( 5000 r/min)離心10 min,去掉深黃色上層黏稠液體和暗黃色表層,并將黃色上層物質轉移到另一只離心管中,分別用去離子水清洗兩只離心管中的沉淀物,再次分別離心,去掉上層深黃色粘稠液體,之后重復離心清洗3次,分別取下層白色物質收集在一起,用蒸餾水再次清洗多次,離心,去掉淡黃色表層,收集下層白色固體,即可獲得最大的淀粉提取效果,用95%的乙醇進行洗滌,抽濾,隨后置于表面皿中自然干燥16 h即可獲得青稞淀粉[9-10]。
1.3.2 淀粉提取率的計算
式中:m為提取的淀粉的質量,g;M為原料的質量,g。
2.1.1 青稞淀粉提取工藝單因素試驗
根據(jù)單因素試驗,確定影響青稞淀粉提取率的3個因素:固液比、NaOH質量濃度、NaOH浸提時間的3個不同水平,并做出正交試驗因素水平表。
2.1.1.1 固液比對青稞淀粉提取率的影響
為了檢測不同固液比對青稞淀粉提取率的影響,本試驗在固液比分別為 1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7(g/mL),常溫下浸泡時間2 h,加入質量濃度為0.4%的NaOH溶液的條件下分別對青稞淀粉進行提取。試驗結果如圖1所示。
從圖1可以看出,青稞淀粉的提取率隨固液比的增大呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,當固液比為1∶5(g/mL)時青稞淀粉的提取率最高。這是因為適度的固液比有利于青稞蛋白的溶解。但隨著液體量的增加,乳液的堿濃度降低,致使蛋白質不能被堿液溶解出來,從而降低了青稞淀粉的提取效率。故固液比不能太大,應選在 1∶5(g/mL)附近。
圖1 固液比對青稞淀粉提取率的影響Fig.1 Solid-liquid ratio on the yield of hullessbarleystarch
2.1.1.2 NaOH濃度對青稞淀粉提取率的影響
為了檢測不同NaOH濃度對青稞淀粉提取率的影響,在NaOH質量濃度分別為0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%,固液比為 1∶5(g/mL),常溫下浸泡時間2 h的條件下分別對青稞淀粉進行提取。試驗結果如圖2所示。
圖2 NaOH質量濃度對青稞淀粉提取率的影響Fig.2 NaOH concentration on the yield of hullessbarley starch
從圖2可以看出,青稞淀粉的提取率隨NaOH質量濃度的增大呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,當NaOH質量濃度在0.4%左右時,青稞淀粉的提取率最高。這是因為青稞中含量最高的谷蛋白為堿溶性蛋白,易溶于堿液。但隨著NaOH質量濃度的增加,青稞淀粉開始出現(xiàn)糊化現(xiàn)象,從而影響了提取率。故提取青稞淀粉時NaOH的質量濃度不能太高,應選擇在0.4%附近。
2.1.1.3 浸提時間對青稞淀粉提取率的影響
為了測定不同的NaOH浸提時間對青稞淀粉提取率的影響,試驗選擇常溫下浸泡時間分別為1、2、3、4、5 h,固液比為 1 ∶5(g/mL),NaOH 質量濃度為 0.4%的條件下分別對青稞淀粉進行提取。試驗結果如圖3所示。
圖3 NaOH浸提時間對青稞淀粉提取率的影響Fig.3 Different extraction time on the yield of hullessbarley starch
從圖3可以看出,青稞淀粉的提取率隨NaOH浸提時間的增大呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,當浸提時間為3 h時,青稞淀粉的提取率最高。這是隨著時間的延長,青稞淀粉受到了NaOH溶液的腐蝕,青稞的結構遭到了破壞,不利于蛋白從淀粉中分離出來,從而影響了青稞淀粉提取率的增加。故提取青稞淀粉時,浸提時間不能太長,應控制在在3 h左右。
2.1.2 青稞淀粉提取率最佳工藝條件確定
在單因素試驗的基礎上,進一步進行三因素三水平L9(33)試驗分析,確定最佳的青稞淀粉提取工藝條件。因素水平如表1。
表1 青稞淀粉提取正交試驗因素水平表Table 1 Factors and levels of orthogonal experiment
正交試驗結果如表2所示,極差與方差分析見表3、表 4。
表2 正交試驗結果Table 2 Result of orthogonal experiment
表3 正交試驗極差分析表Table 3 Range analysis of orthogonal experiment
續(xù)表3 正交試驗極差分析表Continue table 3 Range analysis of orthogonal experiment
表4 正交試驗方差分析表Table 4 Variance analysis of orthogonal experiment
從表3青稞淀粉提取率的極差分析可知,對淀粉提取效果影響最大的因素是C(NaOH浸提時間),其次是B(NaOH質量濃度),A(固液比)影響最小,即C>B>A。
A因素的最佳條件是A2,說明固液比對試驗結果的影響是比較小的,在一定條件下固液比的增加,能提高青稞蛋白質的提取效率。
B因素的最佳條件是B3,說明NaOH質量濃度對試驗的影響是比較大的,在一定范圍內提高其濃度,能有效的降低青稞中蛋白質的含量,但濃度也不宜過高。
C因素的最佳條件是C3,說明浸提時間對本試驗的影響是最大的,但考慮到時間成本和淀粉糊化程度,時間也不易太長。
由表4中方差分析的結果可知,在0.01的顯著性水平下,因素C(NaOH浸提時間)對淀粉的提取率有著極顯著的影響,在0.05的顯著性水平下,因素B(NaOH質量濃度)對淀粉提取率有著顯著影響,這說明NaOH浸提時間和NaOH質量濃度對青稞淀粉的提取率有著非常重要的影響。
由表4中F值的大小也可以得出影響青稞淀粉提取率的4個因素的主次排序:C>B>A,即影響淀粉提取效果的3個因素的主次排序是:C(NaOH浸提時間),其次是B(NaOH 質量濃度),A(固液比),這與極差分析的結論相一致。
綜合以上因素考慮,確定最優(yōu)工藝條件組合為C3B3A2,即NaOH浸提時間為4 h、NaOH質量濃度為0.5%、固液比為 1 ∶5(g/mL)。
通過對青稞淀粉的提取條件進行正交試驗的優(yōu)化研究,初步確定最佳提取條件為:固液比1∶5(g/mL)、NaOH質量濃度0.5%、NaOH浸提時間4 h,在此條件下提取率可達到49.43%。利用NaOH對青稞淀粉進行提取,技術路線相對簡單,且提取率較高,是一種值得推廣的工藝流程。
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