朱艷華++王興剛++郭欣++閻雪瑩

摘 要：目的 建立高效液相色譜法測(cè)定消炎痛凝膠劑中歐前胡素含量的方法。方法 甲醇-水（55：45）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)：300 nm；流速：1.0 mL·min-1；柱溫：30 ℃。結(jié)果 本法可測(cè)定歐前胡素的含量，其在0.8～16 ?g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率為99.53%；RSD為1.82%。結(jié)論 該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可作為消炎痛凝膠劑的含量測(cè)定方法。

關(guān)鍵詞：凝膠劑 歐前胡素 高效液相色譜法

中圖分類(lèi)號(hào)：R286 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2014）06（a）-0214-02

Determination of Imperatorin in Xiaoyantong Gel

ZHU Yanhua WANG Xinggan GUO Xin YAN Xueying

（Heilongjiang University of Chinese Medicine，Harbin，Heilongjiang，150040）

Abstract：Objective：To establish a HPLC method for determination of imperatorin in Xiaoyantong gel.Methods：Mobile phase was methanol-water（55：45）.Detection wavelength：300nm.Flow rate：1.0mL min-1.Column temperature：30℃.Results：The content of imperatorin is determined by this method，while the linear relation was good.The average recovery was 99.53%.The RSD was 1.82%.Conclusions：This method is simple，accurate and can be used for determination of Xiaoyantong gel.

Key words：Gel Imperatorin HPLC

消炎痛凝膠劑是由白芷浸膏、薄荷腦等藥組成。具有消炎止痛的功效，臨床上主要用于治療肌肉痛、關(guān)節(jié)痛、腰腿痛、跌打損傷及網(wǎng)球肘引起的腫痛。為了有效控制消炎痛凝膠劑的質(zhì)量，參考相關(guān)文獻(xiàn)[1-4]采用高效液相色譜法建立了其主要藥味白芷中歐前胡素的含量測(cè)定方法，結(jié)果表明該方法準(zhǔn)確可靠。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀（LC-2010 AHT，日本島津公司）；消炎痛凝膠劑（自制，批號(hào)：20130912、20130913、20130914、20130915、20130916）；歐前胡素對(duì)照品（購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)： 110826-201013）；甲醇為色譜純；水為超純水；其他所用試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

色譜柱：（250 nm×4.6 nm，5 ?m）；流動(dòng)相：甲醇-水（55∶45）；檢測(cè)波長(zhǎng)：300 nm；流速：1.0 mL·min-1；柱溫：30 ℃；理論塔板數(shù)不得低于2000。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

取歐前胡素對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含100 ?g的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取凝膠劑約1g，精密稱(chēng)定，置具塞玻璃試管中，加0.1 mol·L-1鹽酸0.1 mL，用甲醇定容至刻度，超聲30 min，取出后補(bǔ)加甲醇至刻度，用0.45 ?m的微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液作為供試品的溶液。

2.4 陰性溶液的制備

按處方比例稱(chēng)取除白芷浸膏外的其他藥物，按照供試品溶液的制備方法制備陰性供試品溶液。

2.5 干擾試驗(yàn)

照上述色譜條件，分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照品溶液注入色譜儀，記錄色譜圖，歐前胡素對(duì)照品、供試品在9 min左右出現(xiàn)吸收峰，陰性樣品無(wú)干擾。

2.6 線性關(guān)系考察

吸取歐前胡素對(duì)照品溶液，加入甲醇制備成濃度分別為0.8、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 μg·mL-1的溶液。分別進(jìn)樣10 ?L，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行回歸處理得回歸方程：A=1.6×105C-14356，R2=0.9995，表明歐前胡素在0.8～16 ?g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取消炎痛凝膠劑（批號(hào)：20130912）按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，照上述色譜條件，分別在第0、12、24、36、48、60、72 h進(jìn)樣，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)樣3次，測(cè)得峰面積積分值，RSD為2.2%。結(jié)果表明供試液在72 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.8 精密度試驗(yàn)

取本品（批號(hào)：20130912）按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液液10 μL，進(jìn)樣6次，分別記錄峰面積積分值，RSD為1.9%。結(jié)果表明此方法的日內(nèi)精密度良好，符合含量測(cè)定的要求。

2.9 重復(fù)性試驗(yàn)

取本品（批號(hào)：20130912）按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法平行制備6份供試品溶液，照上述色譜條件重復(fù)測(cè)定3次，結(jié)果表明該法測(cè)定歐前胡素含量重復(fù)性良好，RSD為1.57%。

2.10 加樣回收率試驗(yàn)

取已知含量的本品（批號(hào)：20130912）9份，每份約0.1g精密加入歐前胡素對(duì)照品1 mL，濃度分別為12 ?g·mL-1、10 ?g·mL-1、8 ?g·mL-1，每個(gè)濃度三份，按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，進(jìn)行含量測(cè)定，并計(jì)算回收率。結(jié)果平均回收率為99.53%；RSD為1.82%，加樣回收率符合要求，表明該方法準(zhǔn)確。

2.11 樣品的測(cè)定

按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，取供試品溶液和對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣，測(cè)定5批樣品中異歐前胡素的含量，結(jié)果平均含量為0.1692 mg·g-1，RSD為0.18%（表1）。

3 討論

3.1 流動(dòng)相的選擇

通過(guò)對(duì)乙腈-水，甲醇-水等多個(gè)流動(dòng)相系統(tǒng)，以及甲醇-水的多個(gè)比例進(jìn)行了考察，結(jié)果表明甲醇-水（55∶45）系統(tǒng)作為流動(dòng)相，供試品色譜圖中歐前胡素與其它峰能夠達(dá)到很好的分離。因此選擇該系統(tǒng)作為流動(dòng)相。

3.2 提取溶劑的選擇

試驗(yàn)中曾經(jīng)選用丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇進(jìn)行提取，結(jié)果以甲醇提取測(cè)得的含量較高且分離度好，乙醇提取測(cè)得的含量雖高，但有一些雜質(zhì)峰的分離不好，故選用甲醇作為樣品前處理溶劑。

3.3 超聲提取時(shí)間選擇

研究比較了超聲提取10、20、30、40 min，結(jié)果表明超聲30 min歐前胡素提取率高于10、20 min，并與40 min提取率基本相同，故本試驗(yàn)采取了超聲30 min的方法。

參考文獻(xiàn)

[1] 馬開(kāi)，秦文杰.HPLC測(cè)定痛可停膠囊中歐前胡素和異歐前胡素含量[J].中成藥，2003，25（10）：801-803.

[2] 王洪志，李惠芬，周靜，等.HPLC測(cè)定元胡止痛片中歐前胡素和異歐前胡素[J].中草藥，2007，38（7）：1018-1019.

[3] 胡華杰，樓招歡，呂圭源，等.HPLC測(cè)定不同產(chǎn)地白芷飲片中歐前胡素和異歐前胡素的含量[J].浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，34（3）：418.

[4] 劉偉明，王金榮，高曉杰.HPLC法測(cè)定復(fù)方羊角片歐前胡素[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2008，3（11）：134-135.endprint

摘 要：目的 建立高效液相色譜法測(cè)定消炎痛凝膠劑中歐前胡素含量的方法。方法 甲醇-水（55：45）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)：300 nm；流速：1.0 mL·min-1；柱溫：30 ℃。結(jié)果 本法可測(cè)定歐前胡素的含量，其在0.8～16 ?g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率為99.53%；RSD為1.82%。結(jié)論 該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可作為消炎痛凝膠劑的含量測(cè)定方法。

關(guān)鍵詞：凝膠劑 歐前胡素 高效液相色譜法

中圖分類(lèi)號(hào)：R286 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2014）06（a）-0214-02

Determination of Imperatorin in Xiaoyantong Gel

ZHU Yanhua WANG Xinggan GUO Xin YAN Xueying

（Heilongjiang University of Chinese Medicine，Harbin，Heilongjiang，150040）

Abstract：Objective：To establish a HPLC method for determination of imperatorin in Xiaoyantong gel.Methods：Mobile phase was methanol-water（55：45）.Detection wavelength：300nm.Flow rate：1.0mL min-1.Column temperature：30℃.Results：The content of imperatorin is determined by this method，while the linear relation was good.The average recovery was 99.53%.The RSD was 1.82%.Conclusions：This method is simple，accurate and can be used for determination of Xiaoyantong gel.

Key words：Gel Imperatorin HPLC

消炎痛凝膠劑是由白芷浸膏、薄荷腦等藥組成。具有消炎止痛的功效，臨床上主要用于治療肌肉痛、關(guān)節(jié)痛、腰腿痛、跌打損傷及網(wǎng)球肘引起的腫痛。為了有效控制消炎痛凝膠劑的質(zhì)量，參考相關(guān)文獻(xiàn)[1-4]采用高效液相色譜法建立了其主要藥味白芷中歐前胡素的含量測(cè)定方法，結(jié)果表明該方法準(zhǔn)確可靠。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀（LC-2010 AHT，日本島津公司）；消炎痛凝膠劑（自制，批號(hào)：20130912、20130913、20130914、20130915、20130916）；歐前胡素對(duì)照品（購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)： 110826-201013）；甲醇為色譜純；水為超純水；其他所用試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

色譜柱：（250 nm×4.6 nm，5 ?m）；流動(dòng)相：甲醇-水（55∶45）；檢測(cè)波長(zhǎng)：300 nm；流速：1.0 mL·min-1；柱溫：30 ℃；理論塔板數(shù)不得低于2000。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

取歐前胡素對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含100 ?g的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取凝膠劑約1g，精密稱(chēng)定，置具塞玻璃試管中，加0.1 mol·L-1鹽酸0.1 mL，用甲醇定容至刻度，超聲30 min，取出后補(bǔ)加甲醇至刻度，用0.45 ?m的微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液作為供試品的溶液。

2.4 陰性溶液的制備

按處方比例稱(chēng)取除白芷浸膏外的其他藥物，按照供試品溶液的制備方法制備陰性供試品溶液。

2.5 干擾試驗(yàn)

照上述色譜條件，分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照品溶液注入色譜儀，記錄色譜圖，歐前胡素對(duì)照品、供試品在9 min左右出現(xiàn)吸收峰，陰性樣品無(wú)干擾。

2.6 線性關(guān)系考察

吸取歐前胡素對(duì)照品溶液，加入甲醇制備成濃度分別為0.8、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 μg·mL-1的溶液。分別進(jìn)樣10 ?L，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行回歸處理得回歸方程：A=1.6×105C-14356，R2=0.9995，表明歐前胡素在0.8～16 ?g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取消炎痛凝膠劑（批號(hào)：20130912）按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，照上述色譜條件，分別在第0、12、24、36、48、60、72 h進(jìn)樣，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)樣3次，測(cè)得峰面積積分值，RSD為2.2%。結(jié)果表明供試液在72 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.8 精密度試驗(yàn)

取本品（批號(hào)：20130912）按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液液10 μL，進(jìn)樣6次，分別記錄峰面積積分值，RSD為1.9%。結(jié)果表明此方法的日內(nèi)精密度良好，符合含量測(cè)定的要求。

2.9 重復(fù)性試驗(yàn)

取本品（批號(hào)：20130912）按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法平行制備6份供試品溶液，照上述色譜條件重復(fù)測(cè)定3次，結(jié)果表明該法測(cè)定歐前胡素含量重復(fù)性良好，RSD為1.57%。

2.10 加樣回收率試驗(yàn)

取已知含量的本品（批號(hào)：20130912）9份，每份約0.1g精密加入歐前胡素對(duì)照品1 mL，濃度分別為12 ?g·mL-1、10 ?g·mL-1、8 ?g·mL-1，每個(gè)濃度三份，按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，進(jìn)行含量測(cè)定，并計(jì)算回收率。結(jié)果平均回收率為99.53%；RSD為1.82%，加樣回收率符合要求，表明該方法準(zhǔn)確。

2.11 樣品的測(cè)定

按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，取供試品溶液和對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣，測(cè)定5批樣品中異歐前胡素的含量，結(jié)果平均含量為0.1692 mg·g-1，RSD為0.18%（表1）。

3 討論

3.1 流動(dòng)相的選擇

通過(guò)對(duì)乙腈-水，甲醇-水等多個(gè)流動(dòng)相系統(tǒng)，以及甲醇-水的多個(gè)比例進(jìn)行了考察，結(jié)果表明甲醇-水（55∶45）系統(tǒng)作為流動(dòng)相，供試品色譜圖中歐前胡素與其它峰能夠達(dá)到很好的分離。因此選擇該系統(tǒng)作為流動(dòng)相。

3.2 提取溶劑的選擇

試驗(yàn)中曾經(jīng)選用丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇進(jìn)行提取，結(jié)果以甲醇提取測(cè)得的含量較高且分離度好，乙醇提取測(cè)得的含量雖高，但有一些雜質(zhì)峰的分離不好，故選用甲醇作為樣品前處理溶劑。

3.3 超聲提取時(shí)間選擇

研究比較了超聲提取10、20、30、40 min，結(jié)果表明超聲30 min歐前胡素提取率高于10、20 min，并與40 min提取率基本相同，故本試驗(yàn)采取了超聲30 min的方法。

參考文獻(xiàn)

[1] 馬開(kāi)，秦文杰.HPLC測(cè)定痛可停膠囊中歐前胡素和異歐前胡素含量[J].中成藥，2003，25（10）：801-803.

[2] 王洪志，李惠芬，周靜，等.HPLC測(cè)定元胡止痛片中歐前胡素和異歐前胡素[J].中草藥，2007，38（7）：1018-1019.

[3] 胡華杰，樓招歡，呂圭源，等.HPLC測(cè)定不同產(chǎn)地白芷飲片中歐前胡素和異歐前胡素的含量[J].浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，34（3）：418.

[4] 劉偉明，王金榮，高曉杰.HPLC法測(cè)定復(fù)方羊角片歐前胡素[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2008，3（11）：134-135.endprint

摘 要：目的 建立高效液相色譜法測(cè)定消炎痛凝膠劑中歐前胡素含量的方法。方法 甲醇-水（55：45）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)：300 nm；流速：1.0 mL·min-1；柱溫：30 ℃。結(jié)果 本法可測(cè)定歐前胡素的含量，其在0.8～16 ?g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率為99.53%；RSD為1.82%。結(jié)論 該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可作為消炎痛凝膠劑的含量測(cè)定方法。

關(guān)鍵詞：凝膠劑 歐前胡素 高效液相色譜法

中圖分類(lèi)號(hào)：R286 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2014）06（a）-0214-02

Determination of Imperatorin in Xiaoyantong Gel

ZHU Yanhua WANG Xinggan GUO Xin YAN Xueying

（Heilongjiang University of Chinese Medicine，Harbin，Heilongjiang，150040）

Abstract：Objective：To establish a HPLC method for determination of imperatorin in Xiaoyantong gel.Methods：Mobile phase was methanol-water（55：45）.Detection wavelength：300nm.Flow rate：1.0mL min-1.Column temperature：30℃.Results：The content of imperatorin is determined by this method，while the linear relation was good.The average recovery was 99.53%.The RSD was 1.82%.Conclusions：This method is simple，accurate and can be used for determination of Xiaoyantong gel.

Key words：Gel Imperatorin HPLC

消炎痛凝膠劑是由白芷浸膏、薄荷腦等藥組成。具有消炎止痛的功效，臨床上主要用于治療肌肉痛、關(guān)節(jié)痛、腰腿痛、跌打損傷及網(wǎng)球肘引起的腫痛。為了有效控制消炎痛凝膠劑的質(zhì)量，參考相關(guān)文獻(xiàn)[1-4]采用高效液相色譜法建立了其主要藥味白芷中歐前胡素的含量測(cè)定方法，結(jié)果表明該方法準(zhǔn)確可靠。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀（LC-2010 AHT，日本島津公司）；消炎痛凝膠劑（自制，批號(hào)：20130912、20130913、20130914、20130915、20130916）；歐前胡素對(duì)照品（購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)： 110826-201013）；甲醇為色譜純；水為超純水；其他所用試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

色譜柱：（250 nm×4.6 nm，5 ?m）；流動(dòng)相：甲醇-水（55∶45）；檢測(cè)波長(zhǎng)：300 nm；流速：1.0 mL·min-1；柱溫：30 ℃；理論塔板數(shù)不得低于2000。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

取歐前胡素對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含100 ?g的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取凝膠劑約1g，精密稱(chēng)定，置具塞玻璃試管中，加0.1 mol·L-1鹽酸0.1 mL，用甲醇定容至刻度，超聲30 min，取出后補(bǔ)加甲醇至刻度，用0.45 ?m的微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液作為供試品的溶液。

2.4 陰性溶液的制備

按處方比例稱(chēng)取除白芷浸膏外的其他藥物，按照供試品溶液的制備方法制備陰性供試品溶液。

2.5 干擾試驗(yàn)

照上述色譜條件，分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照品溶液注入色譜儀，記錄色譜圖，歐前胡素對(duì)照品、供試品在9 min左右出現(xiàn)吸收峰，陰性樣品無(wú)干擾。

2.6 線性關(guān)系考察

吸取歐前胡素對(duì)照品溶液，加入甲醇制備成濃度分別為0.8、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 μg·mL-1的溶液。分別進(jìn)樣10 ?L，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行回歸處理得回歸方程：A=1.6×105C-14356，R2=0.9995，表明歐前胡素在0.8～16 ?g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取消炎痛凝膠劑（批號(hào)：20130912）按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，照上述色譜條件，分別在第0、12、24、36、48、60、72 h進(jìn)樣，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)樣3次，測(cè)得峰面積積分值，RSD為2.2%。結(jié)果表明供試液在72 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.8 精密度試驗(yàn)

取本品（批號(hào)：20130912）按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液液10 μL，進(jìn)樣6次，分別記錄峰面積積分值，RSD為1.9%。結(jié)果表明此方法的日內(nèi)精密度良好，符合含量測(cè)定的要求。

2.9 重復(fù)性試驗(yàn)

取本品（批號(hào)：20130912）按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法平行制備6份供試品溶液，照上述色譜條件重復(fù)測(cè)定3次，結(jié)果表明該法測(cè)定歐前胡素含量重復(fù)性良好，RSD為1.57%。

2.10 加樣回收率試驗(yàn)

取已知含量的本品（批號(hào)：20130912）9份，每份約0.1g精密加入歐前胡素對(duì)照品1 mL，濃度分別為12 ?g·mL-1、10 ?g·mL-1、8 ?g·mL-1，每個(gè)濃度三份，按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，進(jìn)行含量測(cè)定，并計(jì)算回收率。結(jié)果平均回收率為99.53%；RSD為1.82%，加樣回收率符合要求，表明該方法準(zhǔn)確。

2.11 樣品的測(cè)定

按2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，取供試品溶液和對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣，測(cè)定5批樣品中異歐前胡素的含量，結(jié)果平均含量為0.1692 mg·g-1，RSD為0.18%（表1）。

3 討論

3.1 流動(dòng)相的選擇

通過(guò)對(duì)乙腈-水，甲醇-水等多個(gè)流動(dòng)相系統(tǒng)，以及甲醇-水的多個(gè)比例進(jìn)行了考察，結(jié)果表明甲醇-水（55∶45）系統(tǒng)作為流動(dòng)相，供試品色譜圖中歐前胡素與其它峰能夠達(dá)到很好的分離。因此選擇該系統(tǒng)作為流動(dòng)相。

3.2 提取溶劑的選擇

試驗(yàn)中曾經(jīng)選用丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇進(jìn)行提取，結(jié)果以甲醇提取測(cè)得的含量較高且分離度好，乙醇提取測(cè)得的含量雖高，但有一些雜質(zhì)峰的分離不好，故選用甲醇作為樣品前處理溶劑。

3.3 超聲提取時(shí)間選擇

研究比較了超聲提取10、20、30、40 min，結(jié)果表明超聲30 min歐前胡素提取率高于10、20 min，并與40 min提取率基本相同，故本試驗(yàn)采取了超聲30 min的方法。

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