■ 胡彥茹 何余湧 陸 偉 程宗佳

(1.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江西南昌 330045；2.中糧營養(yǎng)健康研究院，北京 100020）

畜禽飼料消化吸收程度的高低與其糞污污染的嚴重程度直接相關(guān)，飼料消化吸收好，則畜禽糞污對環(huán)境的污染程度就低。飼料調(diào)質(zhì)有助于減少飼料中的病原微生物含量、提高飼料淀粉糊化程度和促進蛋白質(zhì)變性，從而改善畜禽腸道內(nèi)環(huán)境、促進腸上皮細胞的發(fā)育和提高飼料營養(yǎng)物質(zhì)的消化率，減少糞污對環(huán)境的污染，這對推動生態(tài)畜牧業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展具有重要的科學(xué)意義和經(jīng)濟價值。目前，不同調(diào)質(zhì)溫度對飼料營養(yǎng)物質(zhì)消化率和畜禽生產(chǎn)性能影響的研究已見報道，盧新流(1996)[1]報道了不同調(diào)質(zhì)溫度(65、69、76、81、85、90 ℃)對顆粒飼料粉化率的影響，結(jié)果表明：隨著調(diào)質(zhì)溫度的升高，顆粒飼料粉化率呈下降趨勢；Abdollahi等(2005,2010)[2-3]比較了玉米型、小麥型和高粱型日糧分別在60、75、90℃調(diào)質(zhì)后對蛋白質(zhì)表觀消化率和肉雞生產(chǎn)性能的影響，試驗表明調(diào)質(zhì)溫度對肉雞日增重和采食量的影響與日糧類型有關(guān)，但提高調(diào)質(zhì)溫度不利于改善肉雞的料肉比；Creswell等(2006)[4]將6種不同的基礎(chǔ)日糧分別經(jīng)65～105℃調(diào)質(zhì)后制粒，結(jié)果表明過高的調(diào)質(zhì)溫度將降低肉雞生產(chǎn)性能，主要表現(xiàn)在體重和料重比的降低；Cowieson等(2005)[5]研究了不同調(diào)質(zhì)溫度(80、85、90 ℃)條件下的小麥型飼料對肉雞生產(chǎn)性能的影響，數(shù)據(jù)表明當(dāng)制粒溫度超過80℃時，肉雞的生產(chǎn)性能就會下降。上述研究結(jié)果表明，過高和過低的調(diào)質(zhì)溫度對飼料營養(yǎng)物質(zhì)消化率和肉雞生產(chǎn)性能有不利的影響，生產(chǎn)顆粒飼料適宜的調(diào)質(zhì)溫度為80℃左右，這有助于降低顆粒飼料粉化率和提高家禽生產(chǎn)性能。已有文獻中未見有關(guān)于經(jīng)不同調(diào)質(zhì)溫度處理的玉米-豆粕型日糧對肉雞小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)與消化酶活性影響的報道。本文設(shè)置70、80、90℃三個調(diào)質(zhì)溫度，研究經(jīng)不同調(diào)質(zhì)溫度處理的玉米-豆粕型日糧對肉雞生產(chǎn)性能、肉雞小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)與消化酶活性的影響。本文擬通過比較經(jīng)不同調(diào)質(zhì)溫度處理的玉米-豆粕型日糧對肉雞生產(chǎn)性能和小腸黏膜形態(tài)與消化酶活力間的差異顯著性，獲得適宜的調(diào)質(zhì)溫度，為肉雞飼料的生產(chǎn)加工提供技術(shù)支持，以生產(chǎn)出高品質(zhì)的肉雞飼料，從而提高肉雞對飼料營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收效果和肉雞生產(chǎn)性能，降低肉雞糞便對環(huán)境的污染。

1 材料和方法

1.1 試驗動物及分組

選擇1日齡艾維茵肉雞558只，根據(jù)體重大小隨機分為I、II和III共3個處理組，每組設(shè)6個重復(fù)，每個重復(fù)31只，3個處理組間的小雞平均體重?zé)o顯著差異(P＞0.05)。另外，設(shè)置70、80、90 ℃三個調(diào)質(zhì)溫度，按表1配方將試驗料配成全價粉料，將全價粉料分別經(jīng)70、80、90 ℃調(diào)質(zhì)后制粒，其中1～28日齡肉雞顆粒料用?？字睆綖?.0 mm的環(huán)模制粒并破碎，29～49日齡肉雞顆粒料用?？字睆綖?.8 mm的環(huán)模進行制粒，隨機選取其中的一種飼料飼喂其中的一組小雞。

1.2 肉雞全價粉料日糧組成及營養(yǎng)水平(見表1)

表1 肉雞全價粉料配方及營養(yǎng)水平

1.3 試驗地點

本試驗在江西省飼料科學(xué)研究所肉雞試驗場進行。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗分1～28日齡和29～49日齡兩期進行、試驗期間自由采食和飲水、所有肉雞均按常規(guī)飼養(yǎng)管理及免疫程序接種疫苗。

1.5 樣品采集

1.5.1 飼料樣品

記錄每天每個重復(fù)組肉雞的喂料量和剩料量并抽取飼料樣品、粉碎后于4℃冰箱溫保存。

1.5.2 糞便樣品

分別在試驗的第4周和第7周收集各重復(fù)組雞只的新鮮糞便并稱重、剔除羽毛雜物、混勻后按總重的1/10～1/50取樣、然后每100 g鮮糞加入10%鹽酸10 ml、充分混勻、于65～75℃鼓風(fēng)烘干至恒重、回潮、粉碎后制成風(fēng)干樣品，連續(xù)收集4 d，用于測定營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率。

1.5.3 腸內(nèi)容物及腸組織樣品

在第50 d的早上8:00，從每組隨機選取12只雞，每重復(fù)2只，公母各半，斷頸屠宰雞只、打開腹腔、分離十二指腸、空腸、回腸和盲腸、收集十二指腸和空腸食糜和黏膜后充分混合，用于測定消化酶活性。擠出消化道內(nèi)容物后，剪取肉仔雞十二指腸中段，空腸前段（前1/4處）和回腸中段等部位的腸道組織2 cm左右、用生理鹽水沖洗凈內(nèi)容物，置于10%甲醛磷酸緩沖液中固定(37%～40%福爾馬林100 ml，NaH2P04·H2O 6.5 g，Na2HPO44.0 g，加水定容至1 000 ml)、用于腸黏膜形態(tài)指標的測定。

1.6 測定指標和方法

1.6.1 肉雞體重

分別于試驗開始、第29 d和第50 d對供試肉雞進行空腹稱重。

1.6.2 營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率

飼料和糞便樣品的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、鈣和總磷的測定均按張麗英主編的第二版《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》[6]中的方法進行測定。

1.6.3 小腸消化酶活性

淀粉酶和胰蛋白酶活性測定按南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒方法進行。

1.6.4 絨毛長度和隱窩深度

將固定的小腸標本用自來水沖洗12 h、經(jīng)梯度酒精(75%、85%、90%、95%、100%、100%)脫水→透明(無水酒精∶二甲苯為2∶3)→浸蠟→包理等處理后、在室溫下切成7 μm厚的切片、最后用蘇木精-伊紅染色法(HE)染色。在低倍鏡下觀測切片、選擇典型視野、用Leica Qwin圖象分析系統(tǒng)檢測、每個樣品觀察5個非連續(xù)性7 μm的縱切片、每張切片測量5個最長腸絨毛高度和最深隱窩深度。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析和Duncan's法多重比較、數(shù)據(jù)均以平均值±標準差形式表示。

2 結(jié)果

2.1 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對肉雞采食量的影響（見表2)

表2數(shù)據(jù)可知，不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對肉雞的營養(yǎng)物質(zhì)采食量沒有顯著影響(P＞0.05)，但當(dāng)調(diào)質(zhì)溫度超過80℃后，營養(yǎng)物質(zhì)采食量有降低的趨勢。

表2 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對肉雞采食量的影響(g/d)

2.2 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響(見表3)

在1～28日齡階段，70℃處理組的粗蛋白消化率顯著高于90℃組(P＜0.05)，而70℃組與80℃組，80℃組與90℃組的粗蛋白消化率之間差異均不顯著(P＞0.05)；另外，各處理組其它營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率均無顯著差異(P＞0.05)。

2.3 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對肉雞生產(chǎn)性能的影響(見表4)

在1～28日齡階段，各處理組之間的平均日增重和飼料報酬均無顯著差異(P＞0.05)，但80℃處理組肉雞的平均日增重和飼料報酬最好；在29～49日齡階段，隨著調(diào)質(zhì)溫度的升高，肉雞平均日增重和飼料報酬均呈下降趨勢，但各處理組之間差異不顯著(P＞0.05)；在1～49日齡階段，80℃組肉雞的平均日增重和平均料重比最好。

2.4 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對肉雞十二指腸和空腸消化酶活性的影響(見表5)

由表5可知，不同調(diào)質(zhì)溫度日糧對肉雞十二指腸及空腸的胰蛋白酶和淀粉酶活性均無顯著影響(P＞0.05)，兩種酶的活性表現(xiàn)為隨調(diào)質(zhì)溫度的升高而呈現(xiàn)下降的趨勢，但空腸中的胰蛋白酶例外。

表3 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響(%)

表4 飼喂經(jīng)不同溫度調(diào)質(zhì)的飼料對肉雞生產(chǎn)性能的影響

表5 不同調(diào)質(zhì)溫度日糧對肉雞十二指腸及空腸消化酶活性的影響

2.5 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對肉雞十二指腸和空腸組織形態(tài)的影響(見表6)

由表6可知，不同調(diào)質(zhì)溫度日糧對肉雞十二指腸和空腸組織形態(tài)有影響，但差異不顯著(P＞0.05)。其中、十二指腸的V/C值表現(xiàn)為隨調(diào)質(zhì)溫度的升高而呈下降的趨勢，而空腸的V/C值則以80℃組最大。

表6 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對肉雞十二指腸和空腸組織形態(tài)的影響

3 討論

3.1 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對肉雞營養(yǎng)物質(zhì)采食量的影響

調(diào)質(zhì)溫度影響顆粒飼料的硬度和顆料飼料耐久性，而顆粒飼料的硬度和顆料飼料耐久性又與動物的采食量有關(guān)[7]。本研究結(jié)果表明，三種調(diào)質(zhì)溫度對肉雞的營養(yǎng)物質(zhì)采食量沒有顯著影響(P＞0.05)，這說明在實際生產(chǎn)中可選擇其中的任何一種溫度進行肉雞飼料的調(diào)質(zhì)處理，但究竟哪種更好、還需結(jié)合飼料的生產(chǎn)成本和肉雞的生產(chǎn)性能進行綜合考慮。

3.2 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對肉雞飼料營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

不同調(diào)質(zhì)溫度對飼料中營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響主要與調(diào)質(zhì)溫度對淀粉糊化，蛋白質(zhì)變性及其他營養(yǎng)物質(zhì)變性的影響有關(guān)。趙思明等(2002)[8]認為，一定條件下，淀粉在淀粉酶的作用下被水解的程度與淀粉的糊化程度有關(guān)，酶解力隨糊化程度的增加而上升。熱處理能夠鈍化如胰蛋白酶抑制因子，植物凝集素等熱敏性及水溶性抗營養(yǎng)因子的活性，也有利于動物的消化吸收，但是如果熱處理強度過高，反而會降低蛋白質(zhì)的消化率[9]。這是由于當(dāng)有還原性糖類存在時，蛋白質(zhì)分子經(jīng)過加熱，賴氨酸殘基上的ε-氨基將與糖分子發(fā)生美拉德反應(yīng)所致，并且隨溫度升高，蛋白質(zhì)因褐變的損失越嚴重。本試驗對粉料進行不同溫度的調(diào)質(zhì)后加工成顆粒料飼喂肉雞，測定其對蛋白質(zhì)的消化率。結(jié)果表明，隨調(diào)質(zhì)溫度的升高，蛋白質(zhì)消化率有降低的趨勢，當(dāng)調(diào)質(zhì)溫度為90℃時最低(P＞0.05)。

有研究表明調(diào)質(zhì)溫度對總磷（主要是植酸磷）的表觀消化率產(chǎn)生一定的影響。袁洪嶺試驗表明，制?？商岣吖任镲暳现锌偭祝ㄖ饕侵菜崃祝┑挠行訹10]；而邢建軍等(2001)[11]研究卻發(fā)現(xiàn)，調(diào)質(zhì)溫度越高，植酸酶活性損失越大，當(dāng)仔豬飼料的調(diào)質(zhì)溫度從50℃升到70℃時，植酸酶回收率由95%降為73%。本試驗結(jié)果表明，隨著調(diào)質(zhì)溫度升高總磷的消化率有降低趨勢，可能是由于高溫破壞了飼料中的天然植酸酶。本試驗結(jié)果也發(fā)現(xiàn)調(diào)質(zhì)溫度對粗脂肪，粗纖維和鈣的消化率也有一定的影響、但是有關(guān)調(diào)質(zhì)制粒對這些營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響尚未見報道，調(diào)質(zhì)溫度對顆粒料中其他營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響有待進一步的研究。

3.3 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對肉雞生產(chǎn)性能的影響

大量研究表明，對家禽日糧進行熱處理能夠提高家禽的生產(chǎn)性能。Svihus等(2004)[12]研究發(fā)現(xiàn)，與飼喂粉料相比，給肉雞飼喂經(jīng)75℃調(diào)質(zhì)的顆粒料顯著提高肉雞生產(chǎn)性能；Silversides等(1999)[13]研究指出，調(diào)質(zhì)溫度過高將降低雛雞的生長性能(特別是當(dāng)溫度超過95℃時)、而Nissinen(1994)[14]的研究也得到了類似的結(jié)論，并且其試驗結(jié)果還顯示85℃是肉雞顆粒料的最佳調(diào)質(zhì)溫度，隨著調(diào)質(zhì)溫度的升高，肉雞增重和飼料報酬均顯著降低，特別是當(dāng)調(diào)質(zhì)溫度達到95℃時。

本試驗結(jié)果表明，隨著調(diào)質(zhì)溫度的升高，肉雞的體重，日增重以及飼料報酬均大致呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢、當(dāng)調(diào)質(zhì)溫度為80℃時達到最高。這與Nissinen[14]的研究結(jié)論類似。調(diào)質(zhì)溫度過高將降低肉雞生長性能可能是因為過度的熱處理使飼料里的酶和維生素失活造成的，另外，蛋白質(zhì)和氨基酸發(fā)生美拉德反應(yīng)利用率降低也有一定的影響。

3.4 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對肉雞十二指腸和空腸消化酶活性的影響

家禽小腸中各種酶的活性決定了其對飼料營養(yǎng)物質(zhì)的利用程度，而小腸不同部位酶活性的不同，則影響營養(yǎng)物質(zhì)在小腸的消化率[15]。研究表明、食糜在空腸內(nèi)的停留時間遠遠大于十二指腸[16]、肉雞日增重與小腸內(nèi)淀粉酶，蛋白酶的活性呈正相關(guān)[17]。王瀟等(2006)[18]研究發(fā)現(xiàn)，膨化處理的玉米可顯著提高十二指腸和空腸內(nèi)容物的淀粉酶活力(P＜0.05)。本試驗結(jié)果也發(fā)現(xiàn)、隨調(diào)質(zhì)溫度的升高，十二指腸和空腸淀粉酶活性均呈下降趨勢，這與王瀟等(2006)[18]的研究結(jié)不一致、可能是由于調(diào)質(zhì)溫度過高、使得飼料中可利用的營養(yǎng)物質(zhì)損失過多，從而使進入到小腸上皮泌酶細胞的營養(yǎng)基質(zhì)減少，抑制了內(nèi)源淀粉酶的分泌。

Bird等(1978)[19]研究指出、高蛋白飼料使禽胰蛋白酶活性升高，而提高日糧碳水化合物的采食量能使胰淀粉酶活性升高。Larsen等(1994)[20]的試驗結(jié)果表明，日糧黏度增強使胰蛋白酶活性增強。本試驗結(jié)果與以上研究結(jié)論一致，隨著調(diào)質(zhì)溫度的升高，十二指腸和空腸胰蛋白酶的活性呈先上升后下降的趨勢，80℃組的胰蛋白酶活性最高，90℃組的胰蛋白酶活性最低?？赡苁怯捎谡{(diào)質(zhì)溫度過高使日糧中賴氨酸與還原糖發(fā)生美拉德反應(yīng)從而造成了蛋白質(zhì)和氨基酸的損失。

3.5 不同調(diào)質(zhì)溫度飼料對肉雞小腸黏膜組織形態(tài)的影響

小腸絨毛高度，隱窩深度以及V/C等指標是用來衡量小腸消化吸收功能的主要指標[21]。腸絨毛高度與細胞數(shù)量呈顯著正相關(guān)，絨毛長度變短時，腸上皮細胞量減少，對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力降低。而隱窩深度則反映了腸道絨毛的發(fā)育狀況，隱窩變淺，意味著腸上皮細胞成熟率上升，吸收能力提高。V/C反映了小腸的功能狀態(tài)、比值上升，則黏膜的消化吸收功能增強，生長發(fā)育加快[22]。

本試驗的結(jié)果表明，70℃、80℃組的V/C值均比90℃組高，隱窩均淺于90℃組，V/C均大于90℃組。其原因可能是隨著調(diào)質(zhì)溫度的升高，飼料抗營養(yǎng)因子被降解得越多，淀粉糊化和蛋白變性效果越好，使得腸絨毛的生長得以改善；但調(diào)質(zhì)溫度過高會使得美拉德反應(yīng)加劇，降低了蛋白質(zhì)和能量的利用效率，使能被小腸黏膜利用的養(yǎng)分減少，導(dǎo)致腸絨毛的生長受阻。

4 小結(jié)

4.1 調(diào)質(zhì)溫度過高將降低肉雞的日增重和飼料報酬，采食經(jīng)80℃調(diào)質(zhì)處理飼料的肉雞表現(xiàn)出最好的生長速度和飼料報酬。

4.2 調(diào)質(zhì)溫度從70℃升高到80℃，十二指腸、空腸中淀粉酶和胰蛋白酶的活性提高，但過高溫度(90℃)將降低消化酶的活性。

4.3 飼喂經(jīng)70℃和80℃調(diào)質(zhì)處理飼料的肉雞，其十二指腸和空腸的V/C均大于飼喂經(jīng)90℃調(diào)質(zhì)處理飼料的肉雞。

4.4 綜合考慮飼料生產(chǎn)成本和肉雞生產(chǎn)性能，建議進行玉米-豆粕型肉雞顆粒飼料生產(chǎn)時將調(diào)質(zhì)溫度控制在70～80℃。

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