李曉華 蒙以良 趙麗娟 漆光紫 黃承樂 黃鉅略

(右江民族醫(yī)學院微生物學與免疫學教研室，廣西 百色 533000)

鼻咽癌(NPC)具有地區(qū)聚集性，在我國南方，比如廣西、廣東、湖南等省份是NPC的高發(fā)區(qū)。廣西屬壯族自治區(qū)，而位于西南部的百色地區(qū)居住大量的壯族同胞，很少有學者研究壯族NPC患者EB病毒(EBV)抗體水平與NPC之間的關(guān)系。EBV是NPCⅠ類致癌原，參與NPC的發(fā)生與發(fā)展，檢測EBV相關(guān)抗體EBNA1/IgA，EA/IgG，EA/IgA是篩查和輔助診斷常用的方法。有學者認為〔1〕正常人群中EBNA1/IgA抗體的血清水平存在年齡上的差異，但波動在一定范圍內(nèi)。在NPC的臨床診斷和高危人群篩查中有必要根據(jù)具體的人群界定不同的陽性臨界值。為了解本地區(qū)壯族NPC患者BNA1/IgA、EA/IgG及EA/IgA抗體水平，觀察它們在不同年齡段的分布及其陽性率，并與正常人進行比較，本文就廣西地區(qū)壯族患者3種抗體水平和陽性率與不同年齡之間的關(guān)系進行探索研究。

1 材料與方法

1.1 一般資料 收集2009年6月至2012年6月在廣西百色市人民醫(yī)院腫瘤科住院的未經(jīng)治療但已經(jīng)病理檢查確診的NPC患者140例，女44例，男96例，年齡20～73歲，中位年齡為(47.5±12.8)歲。對照組為同期的健康體檢者280例(包括80例患有鼻出血、耳鳴等NPC疑似癥狀，經(jīng)確診為非NPC患者)，男188例，女92例，年齡20～70歲，中位年齡(43±5.6)歲。抽取待檢者5 ml肘靜脈血，離心收集血清置于-70℃冰箱冷凍保存待檢。

1.2 抗體檢測方法 EBNA1/IgA抗體檢測試劑盒購自中山生物工程有限公司;EA/IgG、EA/IgA抗體檢測試劑盒購自德國歐蒙醫(yī)學實驗診斷股份公司;均采用ELISA法檢測，具體操作過程按產(chǎn)品說明書進行。血清稀釋度分別為1∶10和1∶20，結(jié)果參照Cheng等〔2〕以相對A值(rA值)表示。

1.3 結(jié)果判斷 EA/IgA、EA/IgG抗體的診斷界值參照說明書。按以下的公式計算對照血清或患者抗原吸光度值的比值，通過比例判斷結(jié)果:比值=對照血清或患者抗原吸光度值/標準品的吸光度值。當比值＜0.8為陰性;≥0.8且＜1.1為可疑;≥1.1為陽性。EBNA1/IgA抗體的診斷界值參照說明書:臨界值≥(0.5+正常對照均值)為陽性;臨界值＜(0.5+正常對照均值)為陰性。

1.4 統(tǒng)計學處理 應(yīng)用SPSS17.0軟件。計量資料經(jīng)正態(tài)性檢驗，如果資料呈正態(tài)分布且方差齊，采用s進行描述性統(tǒng)計，樣本均數(shù)比較采用t檢驗，多樣本均數(shù)比較采用方差分析，兩兩比較采用q檢驗。如果資料呈偏態(tài)分布，采用M(Q)進行描述性統(tǒng)計，兩組中位數(shù)比較采用Mann-Whitney檢驗，多組中位數(shù)比較采用Kruskal-Wallis檢驗，兩兩比較采用擴展t檢驗。計數(shù)資料采用χ2檢驗或確切概率法，其中兩兩比較采用調(diào)整檢驗水準法。

2 結(jié)果

2.1 NPC患者與對照組3種抗體水平及陽性率比較 各組數(shù)據(jù)經(jīng)正態(tài)性檢驗，均屬非正態(tài)分布(P＜0.05)。NPC患者3種EBV抗體水平和陽性率與健康人對比的關(guān)系見表1，表2。NPC患者的EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗體rA值均高于健康人(P＜0.05)。2.2 不同年齡段NPC患者與對照組3種抗體水平比較 20～29歲年齡段的病人與健康人EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗體rA值的比較，差異均有統(tǒng)計學意義(Z=3.586;P＜0.001;Z=3.588;P＜0.001;Z=2.576;P＜0.001)，病人的 EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗體rA值均高于健康人。30～39歲年齡段的病人與健康人EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗體rA值的比較，差異均有統(tǒng)計學意義(Z=5.157;P＜0.001;Z=5.005;P＜0.001;Z=3.783;P＜0.001)，病人的 EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗體rA值均高于健康人。40～49歲年齡段的病人與健康人EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗體rA值的比較，差異均有統(tǒng)計學意義(Z=4.163;P＜0.001;Z=4.521;P＜0.001;Z=3.308;P=0.001)，病人的 EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA 抗體 rA 值均高于健康人。50～73歲年齡段的病人與健康人EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗體rA值的比較，差異均有統(tǒng)計學意義(Z=3.916;P＜0.001;Z=2.737;P=0.001;Z=2.079;P=0.038)，病人的EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗體rA值均高于健康人。見表3。

表1 NPC患者與對照組3種抗體水平比較〔M(Q)〕

表2 NPC患者與對照組3種抗體陽性率的比較〔n(%)〕

表3 不同年齡段血清3種抗體水平NPC患者與健康人的比較〔M(Q)〕

2.3 不同年齡段NPC患者與對照組3種抗體陽性率比較20～29歲年齡段的病人與健康人EA/IgA抗體陽性率的比較，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.001)，病人的EA/IgA抗體陽性率高于健康人。30～39歲年齡段的病人與健康人EA/IgG、EA/IgA抗體陽性率的比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.001)，病人的EA/IgG、EA/IgA抗體陽性率均高于健康人。40～49歲年齡段的病人與健康人EA/IgG、EA/IgA抗體陽性率的比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.001)，病人的EA/IgG、EA/IgA抗體陽性率均高于健康人。

50～73歲年齡段的病人與健康人各抗體陽性率的比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表4。

表4 不同年齡段血清中3種抗體陽性率NPC患者與健康人的比較〔n(%)〕

3 討論

EBV與NPC的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，EBV血清學檢測通常用于NPC的診斷以及高危人群的篩查〔3〕。EBV核抗原EBNA為DNA結(jié)合蛋白，在感染的細胞核內(nèi)，出現(xiàn)于感染的晚期。EBNA-1具有抑制細胞處理和提呈抗原的功能，維持EBV基因存在感染細胞中。EBV早期蛋白(EA)提示EBV活躍增殖，是細胞進入溶解周期的信號，出現(xiàn)于感染的早期。

本研究中，NPC患者 EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗體rA值及EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗體陽性率均高于健康人，在50歲以后的年齡段病人與健康人EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗體陽性率無顯著差異。劉巖等〔4〕對羅城3 060例患者(仫佬族1 497例、毛南族963例、漢族僅600例)研究發(fā)現(xiàn)不同年齡段的EBNA1-IgA的陽性率差異有統(tǒng)計學意義，介于50～59歲之間的年齡段EBNA1-IgA的陽性率較其他年齡段的陽性率明顯升高，中老年人EBV感染率較高。3個民族之間各年齡段的EBNA1-IgA抗體的校正相對吸光度(ArA)差異無統(tǒng)計學意義。劉巖采用的是不同年齡段之間的兩兩比較，而本研究采用的是病人與健康人之間的比較，統(tǒng)計的方法不同，而且少數(shù)民族占的比例較大。而本研究結(jié)果是50歲以后的年齡段病人與健康人EA/IgG、EA/IgA、EBNA1/IgA抗體rA值比較有顯著差異，但陽性率均無顯著差異，說明50歲以后的中老年人可能由于機體免疫力下降，即使同樣感染EBV但抗體的水平會有所不同，提示對于不同年齡段的人群可能應(yīng)選擇不同的診斷界值，才能提高患者的診斷率。提高老年鼻咽癌治療效果的關(guān)鍵是早期診斷、早期治療〔5〕。本研究結(jié)果提示EBNA1/IgA抗體的診斷界值可能并不適合用于桂西地區(qū)壯族患者NPC的診斷。各年齡段健康人與病人EA/IgG、EA/IgA抗體水平和陽性率的比較之前未見相關(guān)的報道。

1 程敏婷，程偉民，季明芳.ELISA法檢測中國中山市正常人及鼻咽癌患者血清EB病毒抗體水平〔J〕.第一軍醫(yī)大學學報，2002;22(9):817-22.

2 Cheng WM，Chan KH，Chen HL，et al.Assessing the risk of nasopharyngeal carcinoma on the basis of EBV antibody spectrum〔J〕.Int J Cancer，2002;97(4):489-92.

3 吳文翰，陳國雄，吳子柏，等.早期發(fā)現(xiàn)和篩選鼻咽癌的EB病毒血清學檢測〔J〕.癌癥，2006;25(2):250-6.

4 劉 巖，胡春卉，尹瑞興，等.廣西羅城縣少數(shù)民族和漢族人群血清EB病毒感染情況分析〔J〕.重慶醫(yī)學，2012;41(14):1404-6.

5 謝文佳，楊智寧，林志雄.老年鼻咽癌患者臨床特征及預(yù)后因素〔J〕.中國老年學雜志，2012;32(17):3642-4.