劉艷婷 (海南省農(nóng)墾總醫(yī)院超聲科，海南 ?？?570311)

老年人是乳腺浸潤性癌高發(fā)人群。腫瘤生物學(xué)行為的術(shù)前判定對(duì)治療及判斷預(yù)后有重要價(jià)值〔1〕。臨床上觀察血流最簡便而無創(chuàng)的手段是彩色多普勒超聲檢測阻力指數(shù)(RI)值，其對(duì)判斷乳腺癌的生物學(xué)行為可能有一定意義〔2〕?；グ┭苌L因子相關(guān)肽(Cripto)-1是表皮生長因子相關(guān)肽(EGF)-CFC家族成員之一，研究發(fā)現(xiàn)Cripto-1可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、遷移、侵襲及血管生成過程〔3，4〕。轉(zhuǎn)錄因子SOX-2是干細(xì)胞的關(guān)鍵因子，參與胚胎發(fā)育和細(xì)胞分子調(diào)控，其表達(dá)的增加將使細(xì)胞喪失分化功能，患者預(yù)后差〔5，6〕。本文關(guān)注彩色多普勒超聲檢測乳腺浸潤性癌患者RI值與術(shù)后組織中Cripto-1和SOX-2的關(guān)聯(lián)性。

1 材料與方法

1.1 一般資料 我院確診為乳腺浸潤性癌并進(jìn)行根治手術(shù)的女性患者113例，術(shù)前均行彩色多普勒超聲檢測，年齡54～81(平均64.3)歲。依據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)中關(guān)于乳腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)病理醫(yī)師再次閱片證實(shí)。其中浸潤性導(dǎo)管癌103例，浸潤性小葉癌10例。

1.2 超聲檢測方法 選用飛利浦彩色多普勒超聲診斷儀，探頭頻率7.5～10 MHz?；颊咴跈z查時(shí)均取仰臥位，在乳腺各象限作縱橫切掃查，觀察有無異?；芈晠^(qū)，對(duì)腫瘤區(qū)在常規(guī)觀察基礎(chǔ)上重點(diǎn)觀察血流情況，計(jì)算RI值。

1.3 Cripto-1、SOX-2蛋白檢測 Cripto-1、SOX-2蛋白均由武漢博士德生物工程公司提供，原液按不同比例稀釋后行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇最理想的配比濃度進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。正式實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組化SP法，應(yīng)用DAB顯色。操作均由主管技師完成，嚴(yán)格質(zhì)量控制。Cripto-1以明確的細(xì)胞質(zhì)著色為陽性，SOX-2以明確的細(xì)胞核著色為陽性。Cripto-1和SOX-2均計(jì)數(shù)5個(gè)腫瘤細(xì)胞密集區(qū)的細(xì)胞，取陽性細(xì)胞百分率的平均值，以陽性細(xì)胞＞5%為陽性，以陽性細(xì)胞25%為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 采用SAS6.12軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、方差分析和線性相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 乳腺浸潤性癌患者RI值與Cripto-1和SOX-2陽性表達(dá)率的關(guān)系 術(shù)前RI值為0.43～0.93，平均為0.76±0.16。不同RI值與Cripto-1和SOX-2陽性表達(dá)率差異顯著(P均＜0.05)。見表1。

表1 乳腺浸潤性癌患者RI值與Cripto-1和SOX-2陽性表達(dá)率的關(guān)系(s，%)

表1 乳腺浸潤性癌患者RI值與Cripto-1和SOX-2陽性表達(dá)率的關(guān)系(s，%)

RI值 n Cripto-1 SOX-2＜0.7 20 40.15±11.30 35.48±8.70 0.7 ～0.9 60 65.47±18.48 50.58±11.36＞0.9 33 76.50±19.81 67.33±15.69 F/P值 9.58/0.007 5 9.09/0.010 2

2.2 不同臨床特征患者RI值、Cripto-1和SOX-2陽性表達(dá)率的比較 有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、不同腫瘤最大徑、有無脈管浸潤及不同Ki67增殖指數(shù)亞組中，RI值、Cripto-1和SOX-2陽性表達(dá)率差別顯著(P均＜0.05)。見表2。

2.3 觀察組RI值與Cripto-1和SOX-2表達(dá)關(guān)聯(lián)性 RI值與Cripto-1表達(dá)(r=0.43，P=0.045 2)、RI值與 SOX-2表達(dá)(r=0.54，P=0.009 8)均正相關(guān)。

表2 不同臨床特征患者RI值、Cripto-1和SOX-2陽性表達(dá)率比較(s)

表2 不同臨床特征患者RI值、Cripto-1和SOX-2陽性表達(dá)率比較(s)

臨床病理特征 n RI值 χ2值 P值 Cripto-1(%)χ2值 P值 SOX-2(%)t值 P值腫瘤最大直徑 ≤5 cm 63 0.68±0.34 6.57 0.024 3 57.24±10.25 7.64 0.021 2 42.77±11.61 5.75 0.039 2＞5 cm 50 0.86±0.23 75.35±13.21 65.53±19.60淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 無 73 0.65±0.33 7.64 0.020 1 56.25±18.94 7.35 0.029 2 44.12±18.53 6.53 0.025 2有40 0.92±0.45 79.79±12.56 60.47±17.45脈管浸潤 無 88 0.63±0.25 7.98 0.018 2 57.51±19.24 8.75 0.018 2 43.18±17.53 7.63 0.020 9有25 0.99±0.21 80.75±13.43 69.42±15.44 Ki67 ≤25% 68 0.68±0.34 7.05 0.021 9 57.61±13.73 7.68 0.023 4 41.92±19.02 5.84 0.038 4＞25% 45 0.84±0.25 76.76±19.62 63.50±13.63

3 討論

乳腺浸潤性癌是一組具有旺盛生長能力的腫瘤，其具有累及周圍和其他部位的傾向，多數(shù)為腺癌，主要發(fā)生于乳腺實(shí)質(zhì)上皮細(xì)胞，特別是乳腺末梢導(dǎo)管小葉單位〔7，8〕。研究認(rèn)為其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，常表現(xiàn)為基因異常性，也證實(shí)基因和蛋白異常表達(dá)時(shí)促使腫瘤發(fā)生的危險(xiǎn)性及直接的促進(jìn)作用〔9〕。Cripto-1是從人類胚癌cDNA文庫中用葡萄糖-6-磷酸脫氫酶作為cDNA嵌合體過濾分離偶然發(fā)現(xiàn)的〔10，11〕，其為 EGF-CFC基因家族的成員之一，由于其著絲粒在染色體的3p21.3上，此部位常易出現(xiàn)丟失或呈現(xiàn)雜合子異常錯(cuò)配的改變，因此其異常表達(dá)時(shí)可能引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的明顯改變〔12，13〕。陳琛等〔14〕觀察 Cripto-1在肺腺癌中的表達(dá)，認(rèn)為Cripto-1與其配體Nodal在早期胚胎發(fā)育中發(fā)揮作用，同時(shí)可以引起腫瘤的進(jìn)展，即刺激腫瘤細(xì)胞增殖、遷移和腫瘤的血管新生。SOX-2是SRY相關(guān)基因家族成員，是一種轉(zhuǎn)錄因子，參與胚胎發(fā)育和細(xì)胞分子調(diào)控〔15，16〕。SOX-2含有一個(gè)高度保守的HNG box DNA結(jié)合域，可以參與多種實(shí)體腫瘤的發(fā)生，對(duì)促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)錄起一定作用〔17〕。

術(shù)前對(duì)惡性腫瘤的評(píng)估不僅對(duì)定性有幫助，還對(duì)治療及分期有一定價(jià)值，其依據(jù)有腫瘤間質(zhì)血管生成和相關(guān)的形態(tài)學(xué)改變〔18〕。乳腺癌常表現(xiàn)為形態(tài)不規(guī)則，邊界不清楚，有成角毛刺狀或鋸齒狀，可見不均勻低回聲，病灶內(nèi)有微粒樣鈣化點(diǎn)?？梢娸^強(qiáng)的血流信號(hào)。腫瘤塊內(nèi)可見不規(guī)則型、穿入型血流。本實(shí)驗(yàn)提示RI值在判斷腫瘤有一定價(jià)值。RI值與Cripto-1和SOX-2在一定程度上具有協(xié)同作用。RI值、Cripto-1和SOX-2升高時(shí)提示腫瘤進(jìn)展。由于超聲檢測的RI值為術(shù)前的結(jié)果，因此RI值在術(shù)前一定程度上反映了Cripto-1和SOX-2的變化，其作為無創(chuàng)性檢查，對(duì)綜合考慮患者病情及指導(dǎo)治療有重要意義。隨著RI值升高，Cripto-1和SOX-2表達(dá)也升高。RI值反映腫瘤間質(zhì)的血流，尤其是腫瘤血管生成期，此時(shí)腫瘤迅速增大，血管生成加速，此時(shí)影像學(xué)檢測血流的指標(biāo)較容易，對(duì)腫瘤判斷價(jià)值更理想。腫瘤進(jìn)展時(shí)，由缺氧誘導(dǎo)因子調(diào)控的相關(guān)因子表達(dá)升高，其中包括 Cripto-1和SOX-2表達(dá)增強(qiáng)〔19〕，使適應(yīng)缺氧環(huán)境的腫瘤細(xì)胞表型更容易存活并為了存活而更易于獲得侵襲轉(zhuǎn)移的潛能〔20，21〕，此時(shí)腫瘤生長迅速，腫瘤的血管生成豐富，預(yù)后差。應(yīng)用超聲檢測RI值是無創(chuàng)性評(píng)價(jià)腫瘤指標(biāo)的客觀標(biāo)志，尤其適合機(jī)體狀況較差的患者。

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