王 紅 王威龍 趙偉麗 趙 楠 孫世曉

（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)·哈爾濱 150040）

研究表明，左室肥厚是獨(dú)立于高血壓之外的心血管病危險(xiǎn)因子[1]，是主要的高血壓靶器官損害，高血壓患者約有1/3伴有左室肥厚[2]。目前臨床研究和基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)已證實(shí)針刺療法有一定心血管保護(hù)作用[3]，但對(duì)心肌肥厚的相關(guān)研究較少報(bào)道。故本實(shí)驗(yàn)以腹主動(dòng)脈縮窄法復(fù)制壓力負(fù)荷性心肌肥厚家兔模型，觀察同步電針曲池、神門、足三里穴對(duì)模型家兔心電圖、心肌肥厚參數(shù)及心肌形態(tài)學(xué)變化的影響，為臨床合理使用電針治療積累實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：從黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購(gòu)入健康成年家兔60只，體重1.5～2.5kg，雌雄各半，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK黑2008-004。實(shí)驗(yàn)儀器：PL202-S電子天平、狗兔兩用解剖臺(tái)、G6805-Ⅱ電針儀、BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。

1.2 方法

將家兔隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組、模型組、電針高頻組（頻率100Hz，電壓3V，連續(xù)波）、電針中頻組（頻率50Hz，電壓3V，連續(xù)波）、電針低頻組（頻率2Hz，電壓3V，連續(xù)波），每組10只。參照Anversea方法[4]，20%的氨基甲酸乙酯5ml/kg經(jīng)耳緣靜脈注射麻醉，仰臥固定并行腹部無(wú)菌手術(shù)，分離腹主動(dòng)脈鞘，剝離并縮窄腹主動(dòng)脈，然后關(guān)腹。術(shù)后三天每天皮下注射青霉素5萬(wàn)u/只預(yù)防感染。假手術(shù)組手術(shù)過(guò)程如上，但不縮窄腹主動(dòng)脈。參照《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)穴位圖譜，家兔曲池穴位于肘橫紋外側(cè)端，屈肘，當(dāng)尺澤穴與肱骨外上髁連線中點(diǎn)。神門穴位于腕部，腕掌橫紋尺側(cè)端，尺側(cè)腕屈肌腱的橈側(cè)凹陷處。足三里穴位于外膝眼下四橫指、脛骨邊緣。術(shù)后即開(kāi)始電針治療，治療組用G6805-Ⅱ電針儀分別給予高、中、低頻率電針刺激，每次持續(xù)45min，每日一次，連續(xù)電針12周。假手術(shù)組和模型組僅給予相同時(shí)間的捆綁。

1.3 心電圖、心重指數(shù)（HW/BW）、左心室重量指數(shù)（LVMI=LVW/BW）檢測(cè)

末次電針后，家兔稱重（BW），用20%的氨基甲酸乙酯5ml/kg經(jīng)耳緣靜脈注射麻醉，通過(guò)BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄II導(dǎo)聯(lián)心電圖，然后處死家兔并開(kāi)胸取心，用預(yù)冷生理鹽水充分灌洗心臟，剔除心臟周圍血管、脂肪等組織，用濾紙吸干心臟表面及室腔液體，稱全心重量（HW），計(jì)算HW/BW，再沿房室交界剪去心房和右心室游離壁，保留左心室及室間隔，濾紙吸干后稱取左心室重量（LVW），計(jì)算LVMI。心電圖主要分析HR、P-R間期和ST段電位值。

1.4 HE染色

在心尖部橫向截取約0.5cm×0.5cm×0.2cm大小組織塊，放入4%多聚甲醛固定行HE染色以觀察心肌組織形態(tài)學(xué)變化。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS11.5軟件做t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

各組家兔II導(dǎo)聯(lián)心電圖的HR、P-R間期和ST段電位值統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表1；HW/BW和LVMI統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 各組HR、P-R間期和ST段變化的統(tǒng)計(jì)結(jié)果（，n=10）

表1 各組HR、P-R間期和ST段變化的統(tǒng)計(jì)結(jié)果（，n=10）

注：與正常組比較：*P＜0.01；與模型組比較△P＜0.05。

組別 HR（次/min） ST段振幅（mV） P-R間期（mS）正常組 322±12.12 0.06±0.008 59±1.32假手術(shù)組 346±18.09 0.04±0.007 60±3.09模型組 203±14.31* 0.12±0.021* 101±9.43*低頻組 208±23.45 0.11±0.027 100±10.04中頻組 251±10.91△ 0.10±0.012 86±8.62△高頻組 290±14.37△ 0.07±0.022△ 73±9.11△

表2 各組HW/BW和LVMI變化的統(tǒng)計(jì)結(jié)果（，n=10）

表2 各組HW/BW和LVMI變化的統(tǒng)計(jì)結(jié)果（，n=10）

注：與正常組比較：*P＜0.01；與模型組比較△P＜0.05。

組別 HW/BW（mg/g） LVMI（mg/g）正常組 2.36±0.28 1.52±0.11假手術(shù)組 2.41±0.32 1.47±0.18模型組 3.33±0.21* 2.53±0.14*低頻組 3.23±0.35 2.38±0.22中頻組 3.05±0.12△ 2.26±0.41△高頻組 2.87±0.22△ 1.82±0.28△

3 討論

本實(shí)驗(yàn)觀察了壓力負(fù)荷性心肌肥厚模型家兔心電圖、心肌肥厚參數(shù)及心肌組織學(xué)變化。心電圖HR、P-R間期和ST段統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，模型組家兔HR減慢，ST段抬高，P-R間期延長(zhǎng)，與正常組比較經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理存在顯著性差異，高頻電針組HR、P-R間期和ST段均有明顯改善，與模型組比較存在顯著性差異；中頻電針組HR、P-R間期與模型組比較有顯著性差異。HW/BW和LVMI的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，模型組家兔HW/BW、LVMI升高，與正常組比較經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理存在顯著性差異，高頻電針組、中頻電針組家兔HW/BW、LVMI與模型組比較經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理存在顯著性差異。HE染色結(jié)果表明，正常組心肌細(xì)胞排列整齊，橫紋清楚，觀察細(xì)胞核大小均一，細(xì)胞中的胞漿染色均勻，總體心肌纖維排列整齊，間質(zhì)中無(wú)明顯膠原纖維增生；模型組家兔可見(jiàn)心肌細(xì)胞變肥大，細(xì)胞核形態(tài)不規(guī)則，胞漿染色加深，心肌纖維增粗增大、紊亂、斷裂，血管周圍有膠原纖維增生，間質(zhì)中有不同程度膠原纖維增生并伴有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等改變等病理改變；低頻電針組可見(jiàn)心肌纖維增粗增大，核仁濃染，間質(zhì)中伴有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等改變；中頻電針組心肌細(xì)胞肥大、細(xì)胞核增大、形態(tài)不規(guī)則、核仁濃染、胞漿染色加深、心肌膠原纖維增生有不同程度改善，間質(zhì)伴隨炎癥浸潤(rùn)現(xiàn)象消失；高頻電針組心肌細(xì)胞排列紊亂、血管周圍膠原纖維增生、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等病理改變有明顯改善。以上結(jié)果表明高頻、中頻電針神門、曲池、足三里穴對(duì)腹主動(dòng)脈縮窄造成的負(fù)荷性家兔心肌肥厚有一定的干預(yù)作用。

[1] Hunter JJ,Chien KR.Signaling pathways for cardiac hypertrophy and failure[J].N Engl J Med,1999,314（17）：1276-1283.

[2] 葛志明，季曉平，郝恩魁，等.氯沙坦逆轉(zhuǎn)高血壓患者左室肥厚的臨床研究[J].山東醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，38（2）：172.

[3] 易春濤，程曉曙，俞建華，等.辛伐他汀對(duì)一氧化氮缺乏性高血壓大鼠心肌纖維化的作用[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2006，7（4）：306-310.

[4] Anversea P,Hagopian M,Alder V.Quantitative radioautographic local-izstiorl of protein synthesis in experimental cardiac hypertrophy[J].LabInvest,1973,29（3）：282.