王磊，孫俊英

(1.蘇州市立醫(yī)院普外科;2.蘇州大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨科，江蘇 蘇州 215007)

骨折在日常生活中很常見，對患者的身體健康危害很大，嚴重影響患者的正常生活和工作，對于骨折，醫(yī)生及患者最為關(guān)心的問題就是骨折的愈合［1］，而眾多臨床實踐表明，骨折的愈合與多種因素有關(guān)［2-3］，血清TGF-β1 和EGF 水平是兩種重要的血清標記物，本文對比觀察了這兩種血清學(xué)標志物在不同程度創(chuàng)傷性骨折中的表達，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究對象為2010 年7 月至2011 年7 月我院收治的38 例創(chuàng)傷性骨折患者(觀察組)，將同期26例健康體檢者設(shè)為對照組。觀察組(38 例):男27 例，女11 例;年齡26～64 歲，平均年齡為(47.32 ±12.18)歲;上肢骨折24 例、下肢骨折14 例。對照組(26 例):男18 例，女8 例;年齡27～65 歲，平均年齡為(48.07 ±10.11)歲。

1.2 方法

觀察組患者入院后根據(jù)骨折種類，分別行切開復(fù)位內(nèi)固定手術(shù)。分別在入院時和骨折切開復(fù)位內(nèi)固定手術(shù)后2 w，外周靜脈采血檢測。根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑采集血漿樣本，混合10～20 min 后，離心20 min 左右(2 000～3 000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA 法。實驗原理為用抗人TGF-β1 (或EGF)單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的TGF-β1 (或EGF)與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人TGF-β1 (或EGF)，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin 與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍色，最后加終止液硫酸，在450 nm 處測OD 值，TGF-β1 (或EGF)濃度與OD 值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中TGF-β1 (或EGF)濃度。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS 統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析。治療前后的比較采用配對資料的t 檢驗，兩組間比較采用兩獨立樣本的t 檢驗。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者一般資料比較

兩組患者在性別、年齡等方面無統(tǒng)計學(xué)差異，具有可比性(P ＞0.05)，結(jié)果見表1。

表1 兩組患者一般資料比較

2.2 兩組患者血清TGF-β1 及EGF 水平的比較。

觀察組治療前血清TGF-β1 及EGF 水平顯著高于對照組(P ＜0.05);而治療后，血清TGF-β1 及EGF 水平顯著低于術(shù)前水平(P ＜0.05)，與對照組相比無顯著差異(P ＞0.05)，結(jié)果見表2和表3。

表2 觀察組治療前后血清TGF-β1 及EGF 水平的比較

表3 兩組血清TGF-β1 及EGF 水平的比較

3 討 論

近年來，隨著工業(yè)、農(nóng)業(yè)和交通運輸業(yè)的迅速發(fā)展，各種事故不斷增多，創(chuàng)傷后發(fā)生骨折者非常多，特別是交通事故，常造成嚴重的開放性骨折，再加上內(nèi)固定手術(shù)的開展，發(fā)生感染的機會的增多，導(dǎo)致創(chuàng)傷性骨折患者易并發(fā)創(chuàng)傷性骨髓炎，成為臨床較為棘手的問題。然而骨折的愈合是需要一定時間的，并不會立竿見影。臨床上將骨折的愈合分為4 期:(1)血腫機化期:骨折以后，骨膜、骨質(zhì)和骨髓等組織損傷或斷裂，同時損傷了骨骼周圍的小血管，引起血管破裂、出血，形成血腫。傷后4～5 h，骨折部位血液開始凝固，形成含有網(wǎng)狀纖維素的血凝塊。骨折處的成纖維細胞、毛細血管等受到血腫的刺激而再生，且自骨折處生長深入血腫內(nèi)，壞死組織及血凝塊受到侵入，繼而消除積血，肉芽組織增生，進而生成纖維組織，最終纖維愈合。這個過程叫血腫機化期，這一時期約2～3 w 完成;(2)骨痂形成期:在骨的表面有一層骨膜，它對骨的再生和生長有非常重要的作用。在骨折后1 w，骨膜內(nèi)的成骨細胞開始大量分裂增生，形成新生骨，并從骨折兩端沿著血腫機化后變成纖維組織，最后兩端連接一起，將纖維組織變成骨組織。這一階段大約在骨折后1 w 開始，4～6 w 完成。此時斷裂的骨頭被新生骨組織連接在一起，雖不會移位，但仍不能持重，否則容易發(fā)生成角變形;(3)骨性愈合期:骨痂內(nèi)的新生骨小梁逐漸增加，骨折間隙的橋梁骨痂完全骨化，這就是愈合期。約在骨折后8～12 w，X 線片上顯示骨折線消失，骨閘密度增加，髓腔為骨痂所充填，骨痂與皮質(zhì)的界限已不清。此時骨折端之間已形成骨連接，外力作用時骨折部不再變形，故夠負重活動;(4)塑形期:骨折治療骨折的愈合過程中和愈合中的一定時期內(nèi)，都通過成骨和破骨過程進行塑形。最后在形態(tài)和結(jié)構(gòu)上恢復(fù)或接近和恢復(fù)到和正常骨一樣。至此，骨折愈合過程方可完全結(jié)束。

而在整個骨折愈合過程中，血腫機化期尤為重要，此期骨折端壞死的骨細胞、成骨細胞以及被吸收的骨基質(zhì)均向周圍釋放內(nèi)源性生長因子，如胰島素生長因子I、Ⅱ(IGF-I、IGF-Ⅱ)、血小板衍生生長因子(PDGF)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)、內(nèi)皮細胞生長因子(EGF)［4-9］、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)［10-11］等，在炎癥期刺激間充質(zhì)細胞聚集、增殖及血管增生，并向成骨細胞轉(zhuǎn)化。肉芽組織內(nèi)成纖維細胞合成和分泌大量膠原纖維，轉(zhuǎn)化為纖維結(jié)締組織，使骨折兩端連接起來，稱為纖維連結(jié)。這一過程約在骨折后2 w 完成。同時，骨折端附近骨外膜的成骨細胞傷后不久即活躍增生，1 w 后即開始形成與骨干平行的骨樣組織，并逐漸延伸增厚。骨內(nèi)膜在稍晚時也發(fā)生同樣改變?？梢?，各類內(nèi)源性生長因子在病情演變及骨折愈合過程中起到至關(guān)重要的作用。

我們的研究發(fā)現(xiàn)創(chuàng)傷性骨折患者的血清TGFβ1 和EGF 水平顯著高于正常人(P ＜0.05)，且治療后血清TGF-β1 和EGF 水平顯著下降(P ＜0.05)，接近正常水平?？梢姡錞GF-β1 和EGF 在骨折愈合和重塑過程中起著十分重要的作用，如文獻所敘述，此類生長因子在成骨細胞的增殖、分化、蛋白合成中發(fā)揮重要的調(diào)控作用，通過其各自的機制，始終嚴格調(diào)控著骨吸收和骨形成之間的平衡，它們共同作用刺激骨細胞的活性，參與調(diào)節(jié)骨修復(fù)和重塑的一系列過程，因此，它們水平的變化正可以有效反映創(chuàng)傷性骨折的嚴重情況及愈合情況，是創(chuàng)傷性骨折患者有效的監(jiān)測指標，值得臨床上推廣應(yīng)用。

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