陳杰翔，李利

(1.瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科;2.瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院護(hù)理部，四川 瀘州 646000)

飲酒是當(dāng)今世界一個重要的公共衛(wèi)生問題，它不僅危害社會治安，更嚴(yán)重影響人體健康。我國是酒精及其飲品的消費大國，自20 世紀(jì)90 年代以來，我國酒類消費急劇增加，城鎮(zhèn)居民成人飲酒率達(dá)到了40.1%～60%，飲酒相關(guān)問題已經(jīng)嚴(yán)重影響我國居民的身心健康。為提高人類生活質(zhì)量和優(yōu)生優(yōu)育［1］，研究酒精對人類的生殖毒性具有重要意義。本研究通過建立不同劑量的飲酒大鼠模型［2］，觀察酒精對大鼠精子動態(tài)參數(shù)的影響，為拓寬男性不育的診斷及治療措施提供實驗依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實驗動物 健康雄性清潔級Sprague-Dawley雄性大鼠40 只，8 w 齡，體重(210 ±20)g，購自重慶醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心。飼養(yǎng)過程中，大鼠均自由采食、飲水，每天早中晚3 次喂食換水，保證充足的水、食物供應(yīng)，籠中保持清潔。環(huán)境溫度20～25 ℃，日照時間12 h。

1.2 模型制備 將大鼠隨機(jī)分為4 組，每組10只，對照組給予蒸餾水、低劑量酒精組給予無水酒精0.5 g/ (kg·d)、中劑量酒精組給予無水酒精2.5 g/ (kg·d)、高劑量酒精組給予無水酒精5 g/ (kg·d)灌胃，連續(xù)20 w。

1.3 精子動態(tài)參數(shù)的測定 末次灌胃24 h 后采用頸椎脫臼法將大鼠處死，取各組大鼠右側(cè)附睪尾部精子，將其懸浮于精子營養(yǎng)液中［3］(HBSS 中加入4.2 g/L 的羥乙基哌嗪乙硫磺酸、0.35 g/L 的NaHCO3、2.0 g/L 的BSA、0.9 g/L 的D—葡萄糖、0.1 g/L 的丙酮酸鈉和0.025 g/L 的大豆-胰蛋白酶抑制劑，pH=7.4，37 ℃)，使用計算機(jī)輔助精子分析儀［4］(清華同方CASAA-QH-III)進(jìn)行分析，具體參數(shù)包括精子密度、平均速率、直線運動速率、曲線運動速率、精子頭側(cè)擺幅度、鞭打頻率、前向性、直線性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，檢測數(shù)據(jù)以表示，采用方差分析和q 檢驗，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

對照組與各酒精組大鼠精子動態(tài)參數(shù)的比較見表1。與對照組相比較，各酒精組大鼠精子的直線運動速率、精子頭側(cè)擺幅度、鞭打頻率、前向性、直線性均明顯減弱，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.05 或P ＜0.01);而精子密度、平均速率及曲線運動速率變化不明顯。

表1 各酒精組與對照組精子動態(tài)參數(shù)檢測結(jié)果比較(n=10，)

表1 各酒精組與對照組精子動態(tài)參數(shù)檢測結(jié)果比較(n=10，)

注:* 與對照組比較P ＜0.01，Δ 與對照組比較P ＜0.05

3 討 論

不育癥是全球性的醫(yī)學(xué)和社會性問題，在不育的夫婦當(dāng)中，男性生殖能力的異常約占60%。世界衛(wèi)生組織將夫妻雙方均不采用任何避孕措施生活1 年以上，且由于男方因素造成女方不孕者，稱之為男性不育癥［5］。隨著生物化學(xué)技術(shù)手段的不斷發(fā)展，精液分析目前已成為臨床常用的評價男性生育功能的重要檢測指標(biāo)［6］，而精漿生化指標(biāo)的評價及男性附屬性腺功能對男性生殖能力的影響越來越受到人們的重視［7］。

精子動態(tài)參數(shù)是精子許多功能的一種綜合而直觀的表現(xiàn)，是正常生理狀態(tài)下完成受精過程的基礎(chǔ)，是評價成熟精子功能的重要指標(biāo)之一，對評價生育能力十分重要［8］。本研究顯示各酒精組大鼠在直線運動速率、精子頭側(cè)擺幅度、鞭打頻率、前向性、直線性方面較對照組均明顯減弱;而在精子密度、平均速率及曲線運動速率方面變化不明顯，說明酒精對精子的活動能力方面有著明顯的影響。

酒精是親脂性的小分子物質(zhì)，其代謝產(chǎn)物乙醛能與各種蛋白質(zhì)結(jié)合，形成乙醛-蛋白質(zhì)毒物［9］，此毒物可抑制蛋白質(zhì)的合成，干擾細(xì)胞膜中類脂和蛋白結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)胞功能障礙。本研究結(jié)果表明，各酒精組大鼠在直線運動速率、精子頭側(cè)擺幅度、鞭打頻率、前向性、直線性方面較對照組均明顯減弱，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.05 或P ＜0.01);而在精子密度、平均速率及曲線運動速率方面變化不明顯，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，說明酒精一方面直接作用于睪丸，使生精細(xì)胞退化變性，精子產(chǎn)生受到抑制，精子質(zhì)量和活動能力下降，另一方面直接或間接地作用于附屬性腺，使精子失去精漿對其的能量供應(yīng)、穩(wěn)定染色質(zhì)及減少氧自由基傷害等作用［10］，從而進(jìn)一步影響睪丸的生殖能力，導(dǎo)致不育的發(fā)生。因此，減少飲酒對男性不育的防治具有重要意義。

［1］CHEN SS，HUANG WJ.Differences in biochemicai markers and body mass index between patients with and without varicocele［J］.Chin Med Assoc，2010，73 (4):194-198.

［2］李紅葉.慢性飲酒對大鼠大腦中動脈平滑肌細(xì)胞BK 通道電流的影響及維生素C 的保護(hù)作用［D］.山西:山西醫(yī)科大學(xué)，2012.

［3］齊飛，邢俊平，薛煒，等.計算機(jī)輔助精液分析男性不育患者精子運動參數(shù)與精子活力的相關(guān)性［J］.現(xiàn)代泌尿外科雜志，2007，12 (3):182-184.

［4］馬存亮.CASAS-QH-Ⅲ型精子自動分析儀在不育癥檢驗中的應(yīng)用［J］.中國農(nóng)村醫(yī)學(xué)雜志，2013，1 (1):77-78.

［5］Oliva SU，Messias AG，Silva DA，et al.Impairment of adult male reproductive function in rats exposed to ethanol since puberty ［J］.Reprod Toxicol，2006，22 (4):599-605.

［6］世界衛(wèi)生組織.人類精液檢查與處理實驗室手冊［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2011:2.

［7］EISENBERG ML，LIPSHULTZ LI.Varicocele-induced infertility;Newer insights into its pathophysiology［J］.Indian J Urol，2011，27 (1):58-64.

［8］閏蓓.電磁輻射對男性生殖功能影響的研究現(xiàn)狀［J］.環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué)，2007，24 (4):423-425.

［9］Madani AH，F(xiàn)alahatkar S，Heidarzadeh A，et al.Sensitivity and specificity of serum FSH and testis size in predicting the existence of spermatogenesis in azoospermic infertile men ［J］.Andrologia，2011，25 (10):1439-1442.

［10］Singh P，Singh M，Cugati G，et al.Hyperprolactinemia:An often missed cause of male infertility ［J］.J Hum Reprod Sci，2011，4 (2):102-103.