陳杰翔，李利

(1.瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科;2.瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院護(hù)理部，四川 瀘州 646000)

飲酒是當(dāng)今世界一個(gè)重要的公共衛(wèi)生問題，它不僅危害社會(huì)治安，更嚴(yán)重影響人體健康。我國是酒精及其飲品的消費(fèi)大國，自20 世紀(jì)90 年代以來，我國酒類消費(fèi)急劇增加，城鎮(zhèn)居民成人飲酒率達(dá)到了40.1%～60%，飲酒相關(guān)問題已經(jīng)嚴(yán)重影響我國居民的身心健康。為提高人類生活質(zhì)量和優(yōu)生優(yōu)育［1］，研究酒精對(duì)人類的生殖毒性具有重要意義。本研究通過建立不同劑量的飲酒大鼠模型［2］，觀察酒精對(duì)大鼠精子動(dòng)態(tài)參數(shù)的影響，為拓寬男性不育的診斷及治療措施提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康雄性清潔級(jí)Sprague-Dawley雄性大鼠40 只，8 w 齡，體重(210 ±20)g，購自重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。飼養(yǎng)過程中，大鼠均自由采食、飲水，每天早中晚3 次喂食換水，保證充足的水、食物供應(yīng)，籠中保持清潔。環(huán)境溫度20～25 ℃，日照時(shí)間12 h。

1.2 模型制備 將大鼠隨機(jī)分為4 組，每組10只，對(duì)照組給予蒸餾水、低劑量酒精組給予無水酒精0.5 g/ (kg·d)、中劑量酒精組給予無水酒精2.5 g/ (kg·d)、高劑量酒精組給予無水酒精5 g/ (kg·d)灌胃，連續(xù)20 w。

1.3 精子動(dòng)態(tài)參數(shù)的測(cè)定 末次灌胃24 h 后采用頸椎脫臼法將大鼠處死，取各組大鼠右側(cè)附睪尾部精子，將其懸浮于精子營養(yǎng)液中［3］(HBSS 中加入4.2 g/L 的羥乙基哌嗪乙硫磺酸、0.35 g/L 的NaHCO3、2.0 g/L 的BSA、0.9 g/L 的D—葡萄糖、0.1 g/L 的丙酮酸鈉和0.025 g/L 的大豆-胰蛋白酶抑制劑，pH=7.4，37 ℃)，使用計(jì)算機(jī)輔助精子分析儀［4］(清華同方CASAA-QH-III)進(jìn)行分析，具體參數(shù)包括精子密度、平均速率、直線運(yùn)動(dòng)速率、曲線運(yùn)動(dòng)速率、精子頭側(cè)擺幅度、鞭打頻率、前向性、直線性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，檢測(cè)數(shù)據(jù)以表示，采用方差分析和q 檢驗(yàn)，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

對(duì)照組與各酒精組大鼠精子動(dòng)態(tài)參數(shù)的比較見表1。與對(duì)照組相比較，各酒精組大鼠精子的直線運(yùn)動(dòng)速率、精子頭側(cè)擺幅度、鞭打頻率、前向性、直線性均明顯減弱，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05 或P ＜0.01);而精子密度、平均速率及曲線運(yùn)動(dòng)速率變化不明顯。

表1 各酒精組與對(duì)照組精子動(dòng)態(tài)參數(shù)檢測(cè)結(jié)果比較(n=10，)

表1 各酒精組與對(duì)照組精子動(dòng)態(tài)參數(shù)檢測(cè)結(jié)果比較(n=10，)

注:* 與對(duì)照組比較P ＜0.01，Δ 與對(duì)照組比較P ＜0.05

3 討 論

不育癥是全球性的醫(yī)學(xué)和社會(huì)性問題，在不育的夫婦當(dāng)中，男性生殖能力的異常約占60%。世界衛(wèi)生組織將夫妻雙方均不采用任何避孕措施生活1 年以上，且由于男方因素造成女方不孕者，稱之為男性不育癥［5］。隨著生物化學(xué)技術(shù)手段的不斷發(fā)展，精液分析目前已成為臨床常用的評(píng)價(jià)男性生育功能的重要檢測(cè)指標(biāo)［6］，而精漿生化指標(biāo)的評(píng)價(jià)及男性附屬性腺功能對(duì)男性生殖能力的影響越來越受到人們的重視［7］。

精子動(dòng)態(tài)參數(shù)是精子許多功能的一種綜合而直觀的表現(xiàn)，是正常生理狀態(tài)下完成受精過程的基礎(chǔ)，是評(píng)價(jià)成熟精子功能的重要指標(biāo)之一，對(duì)評(píng)價(jià)生育能力十分重要［8］。本研究顯示各酒精組大鼠在直線運(yùn)動(dòng)速率、精子頭側(cè)擺幅度、鞭打頻率、前向性、直線性方面較對(duì)照組均明顯減弱;而在精子密度、平均速率及曲線運(yùn)動(dòng)速率方面變化不明顯，說明酒精對(duì)精子的活動(dòng)能力方面有著明顯的影響。

酒精是親脂性的小分子物質(zhì)，其代謝產(chǎn)物乙醛能與各種蛋白質(zhì)結(jié)合，形成乙醛-蛋白質(zhì)毒物［9］，此毒物可抑制蛋白質(zhì)的合成，干擾細(xì)胞膜中類脂和蛋白結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)胞功能障礙。本研究結(jié)果表明，各酒精組大鼠在直線運(yùn)動(dòng)速率、精子頭側(cè)擺幅度、鞭打頻率、前向性、直線性方面較對(duì)照組均明顯減弱，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05 或P ＜0.01);而在精子密度、平均速率及曲線運(yùn)動(dòng)速率方面變化不明顯，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明酒精一方面直接作用于睪丸，使生精細(xì)胞退化變性，精子產(chǎn)生受到抑制，精子質(zhì)量和活動(dòng)能力下降，另一方面直接或間接地作用于附屬性腺，使精子失去精漿對(duì)其的能量供應(yīng)、穩(wěn)定染色質(zhì)及減少氧自由基傷害等作用［10］，從而進(jìn)一步影響睪丸的生殖能力，導(dǎo)致不育的發(fā)生。因此，減少飲酒對(duì)男性不育的防治具有重要意義。

［1］CHEN SS，HUANG WJ.Differences in biochemicai markers and body mass index between patients with and without varicocele［J］.Chin Med Assoc，2010，73 (4):194-198.

［2］李紅葉.慢性飲酒對(duì)大鼠大腦中動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞BK 通道電流的影響及維生素C 的保護(hù)作用［D］.山西:山西醫(yī)科大學(xué)，2012.

［3］齊飛，邢俊平，薛煒，等.計(jì)算機(jī)輔助精液分析男性不育患者精子運(yùn)動(dòng)參數(shù)與精子活力的相關(guān)性［J］.現(xiàn)代泌尿外科雜志，2007，12 (3):182-184.

［4］馬存亮.CASAS-QH-Ⅲ型精子自動(dòng)分析儀在不育癥檢驗(yàn)中的應(yīng)用［J］.中國農(nóng)村醫(yī)學(xué)雜志，2013，1 (1):77-78.

［5］Oliva SU，Messias AG，Silva DA，et al.Impairment of adult male reproductive function in rats exposed to ethanol since puberty ［J］.Reprod Toxicol，2006，22 (4):599-605.

［6］世界衛(wèi)生組織.人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2011:2.

［7］EISENBERG ML，LIPSHULTZ LI.Varicocele-induced infertility;Newer insights into its pathophysiology［J］.Indian J Urol，2011，27 (1):58-64.

［8］閏蓓.電磁輻射對(duì)男性生殖功能影響的研究現(xiàn)狀［J］.環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué)，2007，24 (4):423-425.

［9］Madani AH，F(xiàn)alahatkar S，Heidarzadeh A，et al.Sensitivity and specificity of serum FSH and testis size in predicting the existence of spermatogenesis in azoospermic infertile men ［J］.Andrologia，2011，25 (10):1439-1442.

［10］Singh P，Singh M，Cugati G，et al.Hyperprolactinemia:An often missed cause of male infertility ［J］.J Hum Reprod Sci，2011，4 (2):102-103.